VEGF-C-VEGFR-3及D2-40在喉鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)和意義.pdf

1、目的:喉癌是耳鼻喉-頭頸外科最常見的惡性腫瘤之一。目前喉癌的治療仍是以外科手術(shù)為主,輔以放、化療及生物治療。盡管手術(shù)方式不斷改進(jìn),綜合治療手段不斷完善,但喉癌的5年生存率仍無顯著提高,局部復(fù)發(fā)及淋巴道轉(zhuǎn)移為治療失敗的主要原因。因此,了解淋巴轉(zhuǎn)移的機(jī)制對于喉癌的診斷、治療具有重要的臨床意義。
　　 血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是一類與肝素結(jié)合的生長因子,VEGF-C是VEGF的一種新同源物,是目前己知的最為重要的淋巴管生成誘導(dǎo)因子

2、,可以選擇性地促進(jìn)淋巴管增生和擴(kuò)張,增強(qiáng)淋巴管通透性,促進(jìn)腫瘤周圍相關(guān)淋巴管的生長,有利于腫瘤細(xì)胞經(jīng)淋巴管轉(zhuǎn)移播散。VEGFR-3屬于受體酪氨酸蛋白激酶家族,為淋巴內(nèi)皮細(xì)胞上第一個(gè)被克隆的分子標(biāo)志物,是VEGF的特異性受體,VEGF-C通過多種病理和生理途徑與其受體VEGFR-2和VEGFR-3反應(yīng),刺激血管和淋巴管增生。D2-40是一種新近發(fā)現(xiàn)的特異性抗M2A抗原的單克隆抗體,被認(rèn)為是目前最特異性的新生淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物。本實(shí)驗(yàn)通過

3、觀察三種蛋白在喉癌中的表達(dá),為了解喉癌淋巴道轉(zhuǎn)移機(jī)制及判斷預(yù)后提供新的思路。
　　 方法:材料收集自2008年1月至2009年12月于河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院耳鼻咽喉-頭頸外科住院行手術(shù)治療的喉癌患者。其中喉癌組織40例、相應(yīng)癌旁組織40例(距腫瘤切緣至少0.5cm),并取19例同期行手術(shù)治療的非喉部疾病的正常喉粘膜組織做為對照。應(yīng)用免疫組織化學(xué)及流式細(xì)胞術(shù)方法檢測VEGF-C、VEGFR-3和D2-40在喉癌組織、癌旁組織及正常喉

4、粘膜組織中的表達(dá)。運(yùn)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。以P≤05為差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性意義,P≤0.01為差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有非常顯著性意義。
　　 結(jié)果:
　　 1 VEGF-C的表達(dá)
　　 1.1免疫組化法:VEGF-C在喉癌、癌旁及正常喉粘膜中均有表達(dá),其表達(dá)強(qiáng)度呈下降趨勢,三組相比有非常顯著性差異(P＜0.01)。喉癌組VEGF的表達(dá)高于癌旁組與正常組(P＜0.01,P＜0.01),而正常組與癌

5、旁組相比無顯著性差異(P＞0.05)。VEGF-C的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.01)、臨床分期(P＜0.01)、臨床分型(P＜0.01)有關(guān),與病理分級、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無關(guān)(P＞0.05)。
　　 1.2流式細(xì)胞術(shù):VEGF-C在喉癌組織、癌旁組織及正常粘膜中的均有表達(dá)(FI值分別為:1.4522±0.1884,1.0816±0.0853,0.9971±0.0088),三組相比有非常顯著性差異(P＜0.01)。喉癌

6、組織中VEGF-C的表達(dá)量明顯高于癌旁組織(P＜0.01)及正常喉粘膜組織(P＜0.01),而癌旁組織與正常喉粘膜相比無顯著性差異(P＞0.05)。在喉癌組織中,VEGF-C的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.01)、臨床分期(P＜0.01)及臨床分型(P＜0.01)有關(guān),與病理分級、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無關(guān)(P＞0.05)。
　　 2 VEGFR-3的表達(dá)
　　 2.1免疫組化法:VEGFR-3在喉癌、癌旁及正常喉粘膜

7、中均有表達(dá),其表達(dá)強(qiáng)度呈下降趨勢,三組相比有非常顯著性差異(P＜0.01)。喉癌組VEGFR-3的表達(dá)高于癌旁組與正常組(P＜0.01,P＜0.01),而正常組與癌旁組相比無顯著性差異(P＞0.05)。VEGFR-3的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.01)、臨床分期(P＜0.01)及臨床分型(P＜0.01)有關(guān),與病理分級、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無關(guān)(P＞0.05)。
　　 2.2流式細(xì)胞術(shù):VEGFR-3在喉癌組織、癌旁組織及

8、正常粘膜中均有表達(dá)(FI值分別為1.4974±0.1884,1.1116±0.1385,1.00311±0.0570),三組相比有顯著性差異(P＜0.01)。喉癌組織中VEGFR-3的表達(dá)量明顯高于癌旁組織(P＜0.01)及正常喉粘膜組織(P＜0.01),而癌旁組織與正常喉粘膜相比無顯著性差異(P＞0.05)。在喉癌組織中,VEGFR-3的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.05)、臨床分期(P＜0.05)及臨床分型(P＜0.01)有關(guān),與病理分

9、級、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無關(guān)(P＞0.05)。
　　 3 D2-40的表達(dá)
　　 3.1免疫組化法:D2-40在喉癌組織、癌旁組織和正常粘膜組織中均有表達(dá),其表達(dá)強(qiáng)度呈下降趨勢,三組相比有顯著性差異(P＜0.01)。喉癌組高于癌旁組與正常組(P＜0.01,P＜0.01),而正常組與癌旁組相比無顯著性差異(P＞0.05)。D2-40與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.05)、臨床分期(P＜0.05)和臨床分型(P＜0.05)有關(guān)

10、,與病理分級、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無關(guān)(P＞0.05)。
　　 3.2流式細(xì)胞術(shù):D2-40在喉癌組織、癌旁組織及正常粘膜中均有表達(dá)(FI值分別為2.1155±0.2585,1.2049±0.1618,1.0018±0.0168),三組相比有顯著性差異(P＜0.01)。喉癌組織中D2-40的表達(dá)量明顯高于癌旁組織(P＜0.01)及正常喉粘膜組織(P＜0.01),而癌旁組織與正常喉粘膜相比無顯著性差異(P＞0.05)。在喉

11、癌組織中,D2-40的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.01)、臨床分期(P＜0.01)及臨床分型(P＜0.01)有關(guān)。與病理分級、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無關(guān)(P＞0.05)。
　　 4喉癌組織中VEGF-C、VEGFR-3蛋白與D2-40蛋白的表達(dá)有多元線性回歸關(guān)系,且均為正相關(guān),D2-40蛋白表達(dá)隨著VEGF-C和VEGFR-3蛋白增大而增大,多元線性回歸方程為YD=0.753Xc+0.466XR-0.430(F=9.973,

12、P=0.001)。
　　 結(jié)論:
　　 1 VEGF-C、VEGFR-3及D2-40蛋白在喉鱗狀細(xì)胞癌組織、癌旁組織及正常喉粘膜組織中均有表達(dá)。
　　 2 VEGF-C、VEGFR-3及D2-40蛋白在喉癌組織中的定量及定性表達(dá)均明顯高于癌旁組織及正常喉粘膜組織,可能與喉癌的發(fā)展有關(guān)。
　　 3 VEGF-C、VEGFR-3及D2-40蛋白在喉癌組織中的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、臨床分型有相關(guān)性;與病理