尋常型銀屑病患者炎癥因子受體表達及其基因多態(tài)性的研究.pdf

1、銀屑病的病因和發(fā)病機制非常復(fù)雜，大量研究表明遺傳背景和免疫因素在發(fā)病中起著重要作用。目前已有PSORS1-7及PSORS9共8個銀屑病易感基因位點被人類孟德爾遺傳在線(OMIM)收錄。在銀屑病的免疫發(fā)病機制中，已有的研究認(rèn)為銀屑病是T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的慢性炎癥性自身免疫性疾病，Th1和Th17細(xì)胞占優(yōu)勢。在銀屑病皮損和外周血中，Th1細(xì)胞因子IL-2、TNF-α、IFN-γ和Th17細(xì)胞因子IL-17、IL22高表達，包括T淋巴細(xì)胞、樹突狀

2、細(xì)胞、漿細(xì)胞和不同的免疫相關(guān)細(xì)胞因子及趨化因子在內(nèi)的細(xì)胞免疫系統(tǒng)的活化促發(fā)了角質(zhì)形成細(xì)胞(KC)的過度增殖和異常分化、血管增生，從而形成銀屑病相應(yīng)的臨床表現(xiàn)。促炎癥因子TNF-α和Th1特征性細(xì)胞因子IFN-γ對銀屑病皮損的形成、維持和發(fā)展具有重要的意義。細(xì)胞因子受體在細(xì)胞因子發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)的過程中起著關(guān)鍵作用。我們初步研究了IFN-γ受體(IFNGR)和TNF-α受體(TNFR)在銀屑病中兩類重要的效應(yīng)細(xì)胞T淋巴細(xì)胞和KC上的表達，探

3、討TNFR和IFNGR在銀屑病發(fā)病機制中可能的作用。并通過分析可能對基因功能有影響的單核苷酸多態(tài)性(SNP)位點，研究SNP位點與相應(yīng)基因mRNA表達之間的關(guān)系，從遺傳學(xué)角度探討影響受體基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控的機制。全文分為三個部分。
　　 第一部分銀屑病患者IFN-γ受體和TNF-α受體mRNA的表達
　　 采集尋常型銀屑病患者外周血分離單個核細(xì)胞(PBMC)，采集尋常型銀屑病患者皮損處和距皮損邊緣1cm處外觀正常的皮膚分離表真

4、皮，以RT-PCR法檢測PBMC和表皮上IFNGR和TNFRmRNA的表達，PASI評分法評估銀屑病的嚴(yán)重程度。分析尋常型銀屑病患者IFNGR和TNFRmRNA表達水平之間的關(guān)系，分析受體mRNA表達與PASI評分的關(guān)系，分析受體mRNA表達水平在PBMC和表皮中是否有關(guān)聯(lián)。
　　 研究結(jié)果如下:1.IFNGR和TNFRmRNA在所有銀屑病患者和正常對照者PBMC和表皮中表達陽性率為100％。①進行期和穩(wěn)定期銀屑病患者與正常對照

5、者比較PBMCIFNGR1和IFNGR2mRNA表達水平均有極顯著升高(P=0.000，P＝0.020)。②進行期和穩(wěn)定期銀屑病患者表皮IFNGR1mRNA表達水平均顯著高于正常對照組(P＝0.000，P＝0.030)。2.銀屑病患者PBMC和表皮IFNGR和TNFRmRNA表達水平與PASI值均無相關(guān)性(P>0.05)。3.進行期銀屑病患者PBMCTNFR與IFNGR2mRNA表達水平正相關(guān)(rs=0.407，P＝0.006)，IFN

6、GR1與IFNGR2mRNA表達水平也正相關(guān)(rs=0.327，P＝0.030)。穩(wěn)定期銀屑病患者皮損表皮IFNGR1與IFNGR2mRNA表達水平正相關(guān)(rs=0.900，P＝0.037)；進行期銀屑病患者非皮損表皮IFNGR1與IFNGR2mRNA表達水平也正相關(guān)(rs=0.761，P=0，000)。結(jié)論:尋常型銀屑病患者PBMC中IFNGR1和IFNGR2mRNA表達顯著升高，可能與銀屑病的免疫發(fā)病機制有關(guān)。尋常型銀屑病患者表皮K

7、CIFNGR1mRNA表達顯著升高，可能在銀屑病皮損的形成過程中起作用。
　　 第二部分銀屑病患者IFN-γ受體基因多態(tài)性的研究
　　 采集220例尋常型銀屑病患者和144例正常對照者外周靜脈血，提取基因組DNA。采用PCR-RFLP方法及DNA測序方法，檢測IFNGRl-56C/T和IFNGR2839A/G位點基因多態(tài)性，研究這兩個位點多態(tài)性與銀屑病易感性是否相關(guān)。
　　 結(jié)果發(fā)現(xiàn):1.尋常型銀屑病患者與正常對

8、照者之間及銀屑病患者各臨床分組間IFNGR1-56C/T位點基因型及等位基因頻率分布無顯著差異(P>0.05)。2.尋常型銀屑病患者與正常對照者IFNGR2839A/G位點基因型及等位基因頻率分布無顯著差異(P>0.05)，但與部分臨床分組有關(guān)。①伴甲損害銀屑病組與正常對照組相比，839A/A基因型和839A等位基因分布頻率顯著升高(P分別為0.012和0.021)；伴甲損害銀屑病與無甲損害銀屑病組比較，839A/A基因型和839A等位

9、基因分布頻率極顯著升高(P分別為0.009和0.006)。②以上感為誘因或加重因素的銀屑病組與正常對照組比較，839G/G基因型和839G等位基因分布頻率顯著升高(P分別為0.009和0.020)；以上感為誘因或加重因素的銀屑病組與并非以上感為誘因或加重因素的銀屑病組比較，839G/G基因型和839G等位基因分布頻率極顯著升高(P分別為0.003和0.002)，839A/A基因型分布頻率顯著降低(P=0.048)。③早發(fā)型銀屑病與遲發(fā)型

10、銀屑病組比較，839G/G基因型和839G等位基因分布頻率顯著降低(P分別為0.030和0.017)。3.尋常型銀屑病患者與正常對照者IFNGR1-56C/T位點和IFNGR2839A/G位點基因型組合頻率分布無顯著差異(P>0.05)；早發(fā)型和遲發(fā)型銀屑病患者以及有家族史和無家族史銀屑病患者之間IFNGR1-56C/T位點和IFNGR2839A/G位點基因型組合頻率分布也無顯著差異(P>0.05)。
　　 結(jié)論:IFNGR1-

11、56C/T位點和IFNGR2839A/G位點與尋常型銀屑病的易感性無相關(guān)性，但IFNGR2839A/G位點可能與尋常型銀屑病患者的發(fā)病年齡、是否伴有甲損害有關(guān)，也可能與以上感為誘因或加重因素的尋常型銀屑病有關(guān)。
　　 第三部分銀屑病患者IFN-γ受體基因多態(tài)性與mRNA表達的相關(guān)性
　　 通過分析尋常型銀屑病患者IFNGR基因多態(tài)性與PBMC和表皮mRNA表達的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)攜帶IFNGR1-56C/C基因型和IFNGR1-

12、56C/T基因型的銀屑病患者PBMC中IFNGR1mRNA表達水平比正常對照者顯著升高(P=0.034，P=0.013)；攜帶IFNGR2839G/G基因型和IFNGR2839A/G基因型者IFNGR2mRNA表達水平極顯著高于正常對照者(P=0.008，P=0.001)。攜帶IFNGR1-56C/T基因型和IFNGR1-56T/T基因型的銀屑病患者表皮IFNGR1mRNA的表達水平均顯著高于正常對照者(P=0.011，P=0.019)