黃酮類對實(shí)驗(yàn)性糖尿病心血管改變的干預(yù)研究.pdf

1、背景：糖尿病患者極易并發(fā)心血管疾病，心血管并發(fā)癥是糖尿病患者最主要的死亡原因，高血糖誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激、血管內(nèi)皮損傷在糖尿病早期即可出現(xiàn)，是糖尿病心血管病變的關(guān)鍵起始事件。杭白菊總黃酮(total flavonoid of FlosChrysanthemi，TF)及其兩個(gè)主要單體成分luteolin與apigenin具有舒張血管、抗心律失常、抗心/腦缺血再灌注損傷、抗氧化應(yīng)激等生物學(xué)作用，但是有關(guān)TF及其單體luteolin與apigeni

2、n干預(yù)糖尿病心血管并發(fā)癥的研究國內(nèi)外尚未見報(bào)道。
　　 目的：研究杭白菊總黃酮及其主要單體成分luteolin與apigenin對實(shí)驗(yàn)性糖尿病心血管改變的干預(yù)作用以及潛在的作用機(jī)制。
　　 方法：采用鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的早期糖尿病大鼠模型(造模成功8周后)、離體高濃度葡萄糖(44 mM，4 h)胸主動(dòng)脈急性損傷模型及高葡萄糖(33 mM，48 h)培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)模型作為主要研究對象，首先觀察慢性整體給藥杭

3、白菊總黃酮及其主要單體成分luteolin與apigenin對早期糖尿病大鼠心臟病理結(jié)構(gòu)、心肌收縮功能及心肌氧化/抗氧化各項(xiàng)指標(biāo)的影響，探討其可能的作用機(jī)制；之后采用Organ bath系統(tǒng)檢測慢性整體給藥杭白菊總黃酮及其主要單體成分luteolin與apigenin對早期糖尿病大鼠胸主動(dòng)脈內(nèi)皮依賴性舒張功能的影響，并對其可能的作用機(jī)制進(jìn)行研究；最后采用高葡萄糖離體孵育血管及高葡萄糖培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞模型觀察luteolin與apig

4、enin急性給藥對高糖孵育的離體胸主動(dòng)脈內(nèi)皮依賴性舒張功能及高糖培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞活度與PKC表達(dá)的影響，探討其相關(guān)機(jī)制。
　　 結(jié)果：TF(200mg/kg/d)、luteolin(10，50，100 mg/kg/d)、apigenin(10，50，100 mg/kg/d)灌胃治療8周后均不改變糖尿病大鼠血糖，但是濃度依賴性改善了糖尿病大鼠體重。TF、高劑量luteolin及apigenin抑制了糖尿病大鼠心血管氧自由基(ROS)過

5、量生成，提高了心血管組織超氧化物歧化酶(SOD)活性，減少了心肌纖維化和心室肥大，增強(qiáng)了糖尿病大鼠心臟收縮舒張功能、內(nèi)皮依賴性血管舒張功能、胸主動(dòng)脈內(nèi)皮源性一氧化氮合酶(eNOS)活性及一氧化氮(NO)水平，減小了糖尿病心肌Ca2+誘導(dǎo)的線粒體滲透性轉(zhuǎn)換孔開放程度，抑制了PMA誘導(dǎo)的血管收縮反應(yīng)。并且TF、luteolin及apigenin灌胃后對糖尿病大鼠心血管的改善作用無顯著差異，其對糖尿病大鼠的內(nèi)皮依賴性舒血管作用均被NOS抑制劑

6、L-NAME與鳥苷酸環(huán)化酶抑制劑亞甲藍(lán)所取消。luteolin及apigenin濃度依賴性舒張正常大鼠胸主動(dòng)脈，功能性去除胸主動(dòng)脈內(nèi)皮顯著降低了其舒張功能，急性luteolin及apigenin處理均明顯減輕了高葡萄糖對大鼠胸主動(dòng)脈內(nèi)皮依賴性舒張功能的損傷(該改善作用被L-NAME所取消)，增強(qiáng)了高糖胸主動(dòng)脈SOD與eNOS活性，減少了ROS過量生成與NO水平的下降。luteolin及apigenin共培養(yǎng)抑制了高葡萄糖導(dǎo)致的HUVEC

7、細(xì)胞活度下降與ROS過量生成，顯著減少了內(nèi)皮細(xì)胞膜PKCβ2的表達(dá)，對細(xì)胞質(zhì)PKCβ2表達(dá)無明顯影響。
　　 結(jié)論：杭白菊總黃酮灌胃治療對糖尿病大鼠心血管的保護(hù)作用可能主要是通過其單體成分luteolin及apigenin來實(shí)現(xiàn)的，而后兩者通過增強(qiáng)心血管SOD活性，減少ROS過量生成，由此減少心肌MPTP開放，激活血管eNOS-NO-cGMP通路發(fā)揮對糖尿病心血管的保護(hù)作用。luteolin與apigenin抑制糖尿病血管內(nèi)皮細(xì)