高血壓病患者循環(huán)內(nèi)皮微顆粒與大動(dòng)脈彈性功能關(guān)系的研究.pdf

1、高血壓病(essential hypenension)是我國人民患病率最高的慢性非傳染性疾病之一，由高血壓引起的急性或慢性靶器官損害如高血壓急癥、心腦血管疾病等是導(dǎo)致人類死亡的第一殺手。動(dòng)脈功能和結(jié)構(gòu)損害是高血壓病及其相關(guān)重要靶器官損傷的共同病理基礎(chǔ)，研究證實(shí)，內(nèi)皮功能障礙(endotllelial dysfunction)是啟動(dòng)動(dòng)脈粥樣硬化過程的始動(dòng)環(huán)節(jié)，而動(dòng)脈彈性功能(anterial elasticity)減退是高血壓患者發(fā)生心腦

2、血管事件的獨(dú)立預(yù)測因子。 動(dòng)脈彈性是動(dòng)脈機(jī)械特性的反應(yīng)，主要反映動(dòng)脈舒張功能的狀態(tài)，取決于動(dòng)脈腔徑大小和管壁的僵硬度或可擴(kuò)張性。動(dòng)脈彈性主要由反映動(dòng)脈壁結(jié)構(gòu)組成的被動(dòng)部分和與動(dòng)脈張力相關(guān)的主動(dòng)部分構(gòu)成，后者主要是指血管平滑肌細(xì)胞的張力，血管活性物質(zhì)通過改變平滑肌張力調(diào)節(jié)動(dòng)脈彈性。心血管危險(xiǎn)因素如增齡、高血壓、血脂異常、糖尿病、吸煙等均直接作用于血管，引起動(dòng)脈結(jié)構(gòu)及功能異常。高血壓動(dòng)脈彈性功能減退主要由3方面原因所致：內(nèi)皮功能障礙

3、；血壓增高的機(jī)械應(yīng)力和腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)的過度激活，其中內(nèi)皮功能障礙導(dǎo)致動(dòng)脈壁結(jié)構(gòu)和舒縮功能的變化是導(dǎo)致動(dòng)脈彈性下降的主要原因。血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌一氧化氮、前列環(huán)素、內(nèi)皮素等多種活性物質(zhì)調(diào)節(jié)血管壁平滑肌細(xì)胞張力從而影響動(dòng)脈彈性功能，研究顯示一氧化氮(nitric oxide，No)是調(diào)節(jié)動(dòng)脈彈性功能的最主要的血管活性物質(zhì)之一。采用激光多普勒前臂皮膚微血管血流測定和橈動(dòng)脈脈搏波分析的方法分別對不同年齡的健康志愿者的內(nèi)皮功能狀態(tài)和動(dòng)

4、脈彈性進(jìn)行測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)乙酰膽堿誘導(dǎo)的峰血流變化與動(dòng)脈的容量彈性指數(shù)(C1)和振蕩彈性指數(shù)(C2)呈正相關(guān)。Wikinson和Kinlay等人的研究均發(fā)現(xiàn)內(nèi)皮源性NO生成量影響動(dòng)脈彈性功能，表現(xiàn)為脈搏波傳導(dǎo)速度(pulse wave velocity,PWV)的改變，外源性給予硝酸甘油可提高動(dòng)脈的可擴(kuò)張性，證實(shí)內(nèi)皮功能障礙導(dǎo)致動(dòng)脈彈性功能減退。內(nèi)皮微顆粒(endothelial microparticles，EMPs)是近年來提出的反映

5、內(nèi)皮功能障礙的生物學(xué)指標(biāo)，是血管內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生凋亡或激活時(shí)釋放于外周的亞微米級顆粒，大小約0.1μm到1μm,表面表達(dá)磷脂酰絲氨酸和內(nèi)皮細(xì)胞特征的表面抗原，如血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘付分子(CD31)和玻連蛋白(CD51)等。研究發(fā)現(xiàn)EMPs水平升高損傷內(nèi)皮功能，削弱乙酰膽堿誘導(dǎo)的鼠胸主動(dòng)脈舒張反應(yīng)，應(yīng)用NO合酶抑制劑L-NAME可減輕EMPs的血管損傷作用，提示EMPs不僅是反映內(nèi)皮功能障礙的指標(biāo)，也是內(nèi)皮功能障礙的促進(jìn)因子之一。有關(guān)高血壓病E

6、MPs與大動(dòng)脈彈性功能關(guān)系的研究以及降壓治療對EMPs和大動(dòng)脈彈性功能的影響，目前尚未見研究報(bào)道。 目的： 1.腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞生成EMPs的實(shí)驗(yàn)研究。 2.高血壓病患者循環(huán)EMPs與動(dòng)脈彈性功能的的研究。3.降壓藥物干預(yù)對EMPs及動(dòng)脈彈性功能的影響。 方法： 體外實(shí)驗(yàn)以TNF-α損傷人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(Human

7、umbilical vein endothelialcells,HUVECs)，掃描電鏡觀察EMPs的生成，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞培養(yǎng)液中微顆粒的水平。臨床實(shí)驗(yàn)采用病例對照研究的方法，選擇血壓是否控制良好的兩類高血壓病患者和健康志愿者，抽取空腹靜脈血，經(jīng)兩步低溫離心后利用流式細(xì)胞儀進(jìn)行循環(huán)EMPs水平檢測，采用自動(dòng)的容量體積描記儀器即動(dòng)脈檢測儀(VP-1000，日本科林公司)測定踝肱脈搏波傳導(dǎo)速度(brachial-ankle puls

8、e wavevelocity,BaPWV)，評價(jià)EMPs與BaPWV二者的關(guān)系。選擇初發(fā)的或血壓未控制良好的2級高血壓病患者，給予以鈣離子拮抗劑為基礎(chǔ)的降壓治療3個(gè)月，治療前后檢測EMPs和BaPWV，評價(jià)二者的變化。 結(jié)果： 掃描電鏡觀察見靜息狀態(tài)下的HUVECs呈鵝卵石樣貼壁生長，表面生成小泡(EMPs)較少。TNF-α刺激后的HUVECs呈出疹樣表面，小泡數(shù)量顯著增加幾乎覆蓋細(xì)胞表面。高倍視野下顯示這些泡的直徑約1

9、.0μm左右。流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示HUVECs生成的微顆粒CD31及CD51表達(dá)陽性。TNF-α刺激組EMPs水平顯著高于正常對照組[CD31+EMPs，(164+63)比(42+10)/1000細(xì)胞，p<0.05；CD51+EMPs，(260±108)比(19±4)/1000細(xì)胞，p<0.05]。與健康志愿者組相比，近三個(gè)月內(nèi)血壓未控制的高血壓病組患者循環(huán)EMPs水平顯著升高[(972.6±116.2)比(2141.5±232.6)

10、個(gè)/μl，p<0.001]；血壓未控制高血壓病組患者BaPWV增快[(1369.3±147.3)比(1791.0±351.6)cm/s，p<0.001]。在EMPs進(jìn)入相關(guān)及回歸前進(jìn)行Log轉(zhuǎn)換，Log-EMPs與收縮壓(r=0.47，p<0.001)、舒張壓(r=0.38，p=0.002)、脈壓(r=0.41，p=0.001)、心率(r=0.25，p=0.046)和BaPWV(r=0.52，p<0.001)呈正相關(guān)。BaPWV與年齡(

11、r=0.54，p<0.001)、收縮壓(r=0.67，p<0.001)、舒張壓(r=0.51，p<0.001)、脈壓(r=0.62，p<0.001)、心率(r=0.34，p=0.001)和Log-EMPs(r=0.52，p<0.001)呈正相關(guān)(r=0.52，p<0.001)。以BaPWV為因變量，上述單因素相關(guān)的自變量進(jìn)行多因素回歸分析顯示，收縮壓、年齡和Log-EMPs是其獨(dú)立相關(guān)因素(r=0.81，p<0.001)。 與健

12、康志愿者組相比，近三個(gè)月內(nèi)血壓良好控制的高血壓病組患者循環(huán)EMPs水平仍明顯增高[(972.6±116.2)比(1631.0±237.5)個(gè)/μl，p<0.01]；BaPWV水平也明顯增快[(1369.3±147.3)比(1463.9±190.4)cm/s，p<0.05]。Log-EMPs僅與BaPWV(r=0.39，p=0.003)相關(guān)。BaPWV與年齡(r=0.48，p<0.001)、收縮壓(r=0.48，p<0.001)、舒張壓(

13、r=0.35，P=0.008)、脈壓(r=0.31，p=0.021)、和Log-EMPs(r=0.39，p=0.003)呈正相關(guān)。對BaPWV進(jìn)行多因素回歸分析顯示，年齡、收縮壓和Log-EMPs是其獨(dú)立相關(guān)因素(r=0.68，p<0.001)。 16例初發(fā)或血壓控制不佳的2級高血壓病患者經(jīng)過藥物洗脫期后進(jìn)入以非洛地平為基礎(chǔ)的為期14周的降壓治療隨訪研究。結(jié)果僅兩例患者單用非洛地平降壓達(dá)標(biāo)，其他14例患者為良好控制血壓均聯(lián)用不同

14、種類的降壓藥，其中4例聯(lián)用利尿劑、5例聯(lián)用β-受體阻滯劑、其余5例聯(lián)用血管緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶抑制劑。14周后該組患者收縮壓[(162.3±13.1)比(137.4±13.0)mmHg，p<0.001]及舒張壓[(95.4±6.9)比(85.1±11.4)mmHg，p=0.001]均達(dá)標(biāo)。循環(huán)EMPs水平明顯下降[(2023.3±261.5)比(1335.3±190.6)個(gè)/μl，p<0.05]；動(dòng)脈彈性功能顯著改善[(1898.1±380.