細(xì)菌纖維素耐低溫生產(chǎn)菌株的選育及其改性的研究.pdf

1、以本實驗室保存的木醋桿菌M12為出發(fā)菌株，采用紫外誘變和氯化鋰-紫外復(fù)合誘變的方式對原始菌株進(jìn)行誘變處理，利用CMC固體培養(yǎng)基，對誘變后的菌株進(jìn)行平板培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)，做出致死曲線，得出最佳誘變劑量。在此誘變劑量下誘變原始菌株，經(jīng)過初篩和復(fù)篩以及連續(xù)傳代實驗得到的一株耐低溫、產(chǎn)酸少、細(xì)菌纖維素產(chǎn)量高且遺傳性狀穩(wěn)定的突變株UV3，細(xì)菌纖維素產(chǎn)量比出發(fā)菌株提高了27.2％。 首先通過單因素實驗，分析培養(yǎng)基的碳源種類和濃度、氮源種類和

2、濃度、有機(jī)酸、無機(jī)鹽等添加物質(zhì)對產(chǎn)量的影響；確定培養(yǎng)時間、接種量、pH值等發(fā)酵條件。通過正交試驗確定本實驗室保藏的耐低溫木醋桿菌的培養(yǎng)基成分以及各因素的最佳組合：葡萄糖25g/L、酵母浸粉5g/L、蛋白胨3g/L、檸檬酸1.2g/L、磷酸氫二鈉2.2g/L、磷酸氫二鉀1g/L、乙醇6mL/L、pH5.0、接種量8％，發(fā)酵周期6d。經(jīng)驗證實驗驗證，優(yōu)化后的培養(yǎng)基發(fā)酵合成細(xì)菌纖維素產(chǎn)量達(dá)到7.6g/L，與基本培養(yǎng)基相比，提高了35.7％。

3、 在培養(yǎng)基中添加海藻酸鈉、甲基纖維素、羧甲基纖維素、聚乙烯醇、聚谷氨酸等水溶性高分子物質(zhì)來研究其對細(xì)菌纖維素的影響，用掃描電鏡和紅外光譜對其進(jìn)行表征，同時測定細(xì)菌纖維素產(chǎn)量、含水量、復(fù)水率等指標(biāo)和厚度、硬度、剪切力等物理性質(zhì)，從實驗結(jié)果得出，添加水溶性物質(zhì)的改性細(xì)菌纖維素在產(chǎn)量、復(fù)水率、厚度等方面都遠(yuǎn)勝于原液發(fā)酵產(chǎn)物，而且在電鏡觀察時發(fā)現(xiàn)其結(jié)構(gòu)改變很明顯，纖維束變粗，紅外光譜測試的結(jié)果顯示所加物質(zhì)的特征峰都有明顯的加強，其中聚谷氨