Beclin1在膽管癌中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：
　　探討膽管癌中Beclin1的表達(dá)及意義。采用免疫組化方法、western blot與Real-time RT-PCR檢測不同分化程度膽管癌組織中Beclin1的表達(dá)情況，并結(jié)合臨床隨訪資料分析，探討其表達(dá)與膽管癌的臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系，旨在為判斷膽管癌患者預(yù)后提供參考指標(biāo)。
　　方法：
　　取我院2009年1月至2011年1月間手術(shù)切除并經(jīng)病理證實(shí)的膽管癌標(biāo)本67例。其中男40例，女27例，平均年齡57.

2、5歲（32～75歲）。高/中分化癌53例、低分化癌14例;伴有轉(zhuǎn)移者24例（包括淋巴結(jié)、肝、膽囊、腸系膜和胰腺等），無轉(zhuǎn)移者43例。按TNM分期:Ⅰ+Ⅱ期42例，Ⅲ+Ⅳ期25例。67例膽管癌標(biāo)本中，獲得術(shù)后3～36個月隨訪者60例，其中已死亡病例49例，尚生存病例11例。取與本組膽管癌相應(yīng)的20例正常膽管組織作為對照。標(biāo)本均經(jīng)40 g/L中性福爾馬林液固定，石蠟包埋，4μm厚連續(xù)切片。另留取20例膽管癌組織標(biāo)本和癌旁組織標(biāo)本手術(shù)時立即取

3、材的新鮮冰凍組織標(biāo)本，置液氮冷卻后送-70℃冷凍冰箱保存，以供Western-blot與Real-time RT-PCR檢測。
　　結(jié)果：
　　免疫組化結(jié)果顯示Beclin1在膽管癌組織與癌旁組織中表達(dá)比較，差異有顯著性，P＜0.05。Western blot結(jié)果中Beclin1蛋白表達(dá)情況與免疫組化結(jié)果相似，所有膽管癌組織標(biāo)本均有表達(dá)。Beclin1蛋白在膽管癌組織中的表達(dá)相對含量顯著低于正常膽管組織（P＜0.05）。Re

4、al-time RT-PCR結(jié)果證實(shí)Beclin1 mRNA在所有膽管癌旁組織標(biāo)本均有表達(dá)。膽管癌組織中Beclin1 mRNA相對表達(dá)量顯著低于正常膽管組織（P＜0.05）。膽管癌組織中Beclin1蛋白的表達(dá)均與膽管癌的分化程度、TNM分期相關(guān)（r=0.264，P=0.024;r=0.536，P=0.000）。Beclin1的表達(dá)均與膽管癌患者年齡、性別和腫瘤大小等臨床病理參數(shù)均無關(guān)。由患者的生存函數(shù)曲線可以看出，Beclin1蛋白

5、的表達(dá)與患者預(yù)后生存率相關(guān)件很高。存臨床病例參數(shù)中，TNM分期(P＜0.05)、肝癌分化程度(P＜0.05)和有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.05)對術(shù)后平均無復(fù)發(fā)生存時間均有明顯影響。將Beclin1蛋白表達(dá)、TNM分期、分化程度和有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移進(jìn)行多因素Cox比例風(fēng)險模型分析，結(jié)果見表3，從表中可見Beclin1蛋白表達(dá)(P＜0.05)、TNM分期(P＜0.05)和與預(yù)后明顯相關(guān)。分化程度(P=0.056)和有無轉(zhuǎn)移(P=0.926)與預(yù)后