肥胖對海人酸誘導小鼠顳葉癲癇的影響及機制的初步研究.pdf

1、背景:肥胖(obesity)是引起糖尿病、心血管疾病、肝癌和中樞神經系統損傷等一系列人類疾病的危險因素。流行病學調查表明未經治療的癲癇患者中超重和肥胖者患難治性癲癇比率要比正常體質量者高;超重和肥胖者患難治性癲癇比率高于非難治性癲癇比率。癲癇(epilepsy)是神經元自發(fā)反復超同步放電引起機體抽搐的一種中樞神經系統慢性疾病，發(fā)病率高，嚴重影響患者和家庭的生活工作。顳葉癲癇（temporal lobe epilepsy，TLE）占到癲癇

2、患者的30-40％，其中30％以上會發(fā)展為難治性癲癇（refractory epilepsy）。肥胖在顳葉癲癇的發(fā)生發(fā)展中作用有待進一步研究。瘦素(leptin)不僅是重要的能量平衡因子，在中樞神經系統損傷中也扮演重要角色，肥胖引起瘦素水平的升高，進而影響顳葉癲癇相關病理的改變，可能是肥胖影響顳葉癲癇的潛在機制。
　　方法:首先，將4-5周齡C57BL/6J小鼠隨機分為高脂飼料喂養(yǎng)組和標準飼料喂養(yǎng)組，每周進行體質量稱量，喂養(yǎng)12周

3、后，體質量和血清學指標檢測顯示小鼠肥胖模型建立成功。在此基礎上右側海馬微量注射海人酸（kainic acid，KA）誘導顳葉癲癇小鼠模型，將正常體質量小鼠分為注射Saline組（CS組）、注射KA組（CK組）、leptin預處理組（Lep+CK組）、Nanobody（leptin受體拮抗劑）預處理組（Nanobody+Lep+CK組）、AG490（JAK2/STAT3信號通路阻斷劑）預處理組（AG490+Lep+CK組）;將肥胖小鼠分為

4、注射Saline組（OS組）、注射KA組（OK組）、Nanobody預處理組（Nanobody+OK組）、leptin預處理組（Lep+OK組）、AG490預處理組（AG490+Lep+OK組）。觀察小鼠行為學、損傷相關的血清指標和右側海馬病理損傷。
　　結果:
　　第一部分:
　　1高脂飲食誘導的C57BL/6J小鼠肥胖模型構建成功
　　相比于標準飼料喂養(yǎng)的小鼠，高脂飼料喂養(yǎng)的小鼠體內脂肪量、血清甘油三脂、膽固

5、醇和脂肪酸含量明顯升高(p＜0.05)，體質量增加20％以上。
　　2肥胖加重了海人酸誘導的小鼠顳葉癲癇
　　1)右側海馬微量注射200 ng KA后，肥胖小鼠存活率為25％，而正常小鼠存活率100％，差異顯著(p＜0.05)。
　　2)右側海馬微量注射100 ng KA后，OK組小鼠存活率低，OK組小鼠Racinescore(4.6)顯著增加，與CK組小鼠(3.2)相比差異顯著(p＜0.05)，（≥3分，TLE模型構

6、建成功）。
　　3)海人酸注射后，小鼠血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脫氫酶(LDH)顯著升高(p＜0.05)，OK組小鼠血清CK-MB和LDH濃度高于CK小鼠，但差異不顯著(p＞0.05)。
　　4) OK組小鼠海馬神經元的丟失、膠質纖維酸性蛋白(GFAP)和S-100β的表達都高于正常小鼠，肥胖加重了海人酸誘導的海馬病理損傷。
　　第二部分:
　　1肥胖加重小鼠顳葉癲癇的重要因素可能是其高瘦素水平

7、>　　1)外源性瘦素增加了正常小鼠TLE的Racine score評分，加重了海馬神經元的丟失，過度激活了星形膠質細胞和促進了S-100β的表達，Nanobody預處理逆轉了外源性瘦素對正常小鼠TLE的影響。
　　2)肥胖小鼠血清瘦素水平是正常小鼠的2倍以上，差異顯著(p＜0.05)，且未發(fā)生瘦素耐受。在海人酸誘導前，Nanobody預處理阻斷了內源性瘦素的作用，逆轉了肥胖引起小鼠Racine score評分的增加、星形膠質細胞的

8、過度活化和S-100β表達的升高。另外，外源性瘦素增加了肥胖小鼠TLE的Racine score評分，過度激活了星形膠質細胞和促進S-100β的表達。
　　2 leptin-JAK2/STAT3信號通路的活化可能是星形膠質細胞過度活化的潛在機制
　　外源性瘦素增加了正常小鼠和肥胖小鼠TLE海馬p-STAT3和GFAP的表達，而AG490預處理，小鼠TLE海馬p-STAT3和GFAP的表達降低，逆轉了外源性瘦素的作用。