極端嗜鹽菌XMQ19菌株發(fā)酵生產(chǎn)聚羥基烷酸酯（PHA）的提取工藝研究.pdf

1、本文對極端嗜鹽菌(Halobacteriumsp)XMQ19菌株生產(chǎn)PHA的下游提取工藝及試驗(yàn)提取物PHA的主要理化性質(zhì)進(jìn)行了研究，主要包括：發(fā)酵液的預(yù)處理工藝、PHA的溶劑萃取、PHA的水相直接提取、提取物的熱熔性質(zhì)和熱分解性質(zhì)的測定等試驗(yàn)。主要試驗(yàn)結(jié)果如下： 1.經(jīng)紫外掃描試驗(yàn)表明本菌種中的PHA經(jīng)硫酸消化后產(chǎn)物的最大紫外吸收波長為234nm，標(biāo)準(zhǔn)曲線表明在該波長下樣品的濃度與紫外吸光值大小具有良好的線性關(guān)系。 2.

2、利用絮凝劑提高細(xì)胞回收效率：將發(fā)酵液稀釋1/2倍體積后，向其中加入0.2％的絮凝劑ZnSO4，然后調(diào)整發(fā)酵液pH值至8.0，用離心機(jī)4000r/min離心30min，濕細(xì)胞收率可達(dá)到96.25％。 3.采用正交試驗(yàn)對氯仿萃取法提取發(fā)酵產(chǎn)物中PHA的工藝條件進(jìn)行了優(yōu)化。氯仿最佳萃取條件為：氯仿用量為25ml/g干細(xì)胞，在45℃下萃取90min，然后濃縮萃取液約至1/10體積，回收氯仿，收集產(chǎn)物。PHA提取率可達(dá)89.34％、純度9

3、8.56％、分子量可達(dá)7.8×105。 4.建立了簡易、經(jīng)濟(jì)、環(huán)保的水相中直接提取PHA的分離純化工藝。即初步純化時調(diào)節(jié)pH值為3.0，在60℃下，向37.5g/L(濕細(xì)胞/水)的細(xì)胞懸浮液液中加入0.1％(w/v)的去垢劑，然后攪拌，再4000r/min離心20min收集沉淀；進(jìn)一步純化時，加水使沉淀再懸，體積達(dá)到50g/L(初濕細(xì)胞量/水)，再調(diào)節(jié)pH值為5.0，在40℃下，加入0.15％SDS和2.0％NaClO，然后攪拌