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1、神經(jīng)老化是生命活動(dòng)的必然,探討神經(jīng)老化機(jī)制,尋找延緩神經(jīng)老化進(jìn)程的方法是神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域里的一個(gè)重要內(nèi)容。在腦衰老研究中,突觸可塑性備受人們關(guān)注。δ-連環(huán)素(δ-catenin)與樹(shù)突棘素(Spinophilin)是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的分布于神經(jīng)元樹(shù)突的蛋白,在突觸塑形中扮演重要角色。δ-catenin是p120-catenin(p120ctn)蛋白家族成員,具有能和鈣粘素(cadherins)近膜端結(jié)合的序列,δ-catenin是這一蛋白家族唯一
2、特異性只表達(dá)于神經(jīng)系統(tǒng)的蛋白,它能和突觸后成分蛋白的PDZ結(jié)構(gòu)域結(jié)合。δ-catenin定位于突觸后區(qū)域,能調(diào)節(jié)突觸的傳入和塑形。Spinophilin因其特異性定位于樹(shù)突棘頭部,故得名樹(shù)突棘素。它具有細(xì)胞連接處絞手架蛋白(scaffoldprotein)的特征,并且含有和PSD95/DLG/zo-1相同的序列,是蛋白磷酸酶-1(PP1)新的靶向亞單位,能將PP1定位于樹(shù)突棘的底物(如受PP1調(diào)節(jié),從而影響突觸功能的神經(jīng)遞質(zhì)受體)上,調(diào)
3、節(jié)樹(shù)突棘的形態(tài),完成突觸塑形。小腦是腦衰老機(jī)理研究的理想模型系統(tǒng)之一。 本實(shí)驗(yàn)在建立大鼠自然老化模型的基礎(chǔ)上,運(yùn)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)δ-catenin及spinophilin在不同年齡大鼠小腦的定位表達(dá);運(yùn)用圖像分析系統(tǒng)和免疫印跡(Western-blot)技術(shù)檢測(cè)δ-catenin及spinophilin在大鼠小腦的表達(dá)水平;運(yùn)用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)δ-catenin,spinophilinmRNA在不同年齡組大鼠小腦表達(dá)的
4、差異。 免疫組織化學(xué)檢測(cè)顯示δ-catenin,spinophilin主要表達(dá)在小腦分子層和顆粒層,在中、青年大鼠蒲肯野細(xì)胞有中等陽(yáng)性表達(dá),老年大鼠蒲肯野細(xì)胞表達(dá)較弱。Westernblot檢測(cè)顯示δ-catenin、spinophilin在中年組大鼠小腦表達(dá)最高,在老年組大鼠小腦表達(dá)最低。RT-PCR檢測(cè)顯示δ-catenin、spinophilinmRNA表達(dá)水平的增齡性變化與其蛋白表達(dá)的增齡性變化一致。 本實(shí)驗(yàn)研究
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