β-catenin與MMP-7在殘胃癌組織中的表達及其臨床意義.pdf

1、殘胃癌是一種比較常見的惡性腫瘤，近年來發(fā)生率有逐漸升高的趨勢，其發(fā)生機制頗為復雜。研究表明，殘胃癌的發(fā)生、發(fā)展與許多基因的異常表達有關。β-catenin與MMP-7在惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中的作用日益受到關注，本實驗采用免疫組化S-P法來檢測32例殘胃癌及癌旁組織的β-catenin與MMP-7的表達況，皆在探討殘胃癌發(fā)生發(fā)展的分子機制，對殘胃癌的早期發(fā)現(xiàn)，預后判定和治療進一步奠定基礎。 方法： 一、實驗材料

2、(一)病例標本32例殘胃癌標本均取自1998年10月-2006年6月中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院腫瘤外科手術病人，首次手術原因均為胃良性病變?；颊吣挲g40-80歲(平均60.25歲)，其中男性26例，女性6例。所有標本經(jīng)4％甲醛固定，石蠟包埋。5 μm厚連續(xù)切片，分別行蘇木素-伊紅及免疫組化染色。全部病例按UICC新TNM分期、日本胃癌處理規(guī)約及中國醫(yī)科大學腫瘤研究所胃癌外科分型進行分期分型，以上病例均經(jīng)病理證實。 (二)實驗用品1

3、、主要試劑β-catenin即用型單克隆抗體、MMP-7濃縮型單克隆抗體、S-P試劑盒、DAB顯色劑、0.01mmolPBS溶液、3％雙氧水、檸檬酸緩沖液。 2、主要儀器 切片機，顯微鏡，保濕盒，冰箱，高壓鍋，PH試紙。 二、實驗方法 (一)組織切片染色：采用免疫組化S-P法對切片分別進行β-catenin即用型單克隆抗體、MMP-7濃縮型單克隆抗體染色，其中MMP-7濃縮型單克隆抗體稀釋倍數(shù)為1：300

4、，具體步驟按試劑盒說明書逐步操作。 (二)結果判定：β-catenin按照Jawhari等的方法，染色分級標準為：0分，細胞膜表達減少或基本消失；1分，細胞質或細胞核表達；2分，異質性表達減弱；3分，保留細胞膜的表達。0～2分為異常表達，3分為正常表達。MMP-7根據(jù)陽性細胞染色程度及著色細胞百分率進行記分：0分，基本不著色；1分，著色淡；2分，著色深。著色細胞占全部記數(shù)細胞百分率<5％為0分；5％～25％為1分；26％～50％

5、為2分；>50％為3分。兩種分值相乘≤1分為陰性，2～4分為陽性。 (三)統(tǒng)計學處理：采用SPSS13.0統(tǒng)計分析軟件進行統(tǒng)計學處理，應用Fisher精確概率法分析β-catenin與MMP-7的表達與臨床病理的關系。應用speraman相關分析β-caten-in與。MMP-7的相互關系，P<0.05為有顯著差異。 結果： 一、β-caten i n、MMP-7與殘胃癌組織中的表達情況在32例癌旁組織中4例(1

6、2.5％)細胞膜β-catenin異常表達，而殘胃癌組織中則19例細胞膜(59.4％)異常表達，殘胃癌組織β-catenin表達的陽性率高于癌旁組織(P<0.01)；在32例癌旁組織中無MMP-7陽性表達，而殘胃癌組織中則18例(56.3％)陽性表達，殘胃癌組織MMP-7表達的陽性率高于癌旁組織(P<0.01)。 二、β-catenin和MMP-7與殘胃癌臨床病理之間的關系β-catenin的異常表達與腫瘤大小、大體分型、浸潤深

7、度和生長方式均顯著相關(P<0.05)，而與年齡、性別、分化程度和淋巴結轉移無關。MMP-7異常表達與浸潤深度、生長方式和淋巴結轉移均顯著相關(P<0.05)，與年齡、性別、腫瘤大小、大體分型、分化程度因素無關。 三、β-catenin和MMP-7在殘胃癌中表達的相互關系經(jīng)speraman相關分析表明殘胃癌組織中β-catenin和MMP-2表達具有顯著相關性(r<,s>=0.55，P<0.05)。 結論： 1、