基于對(duì)成纖維細(xì)胞調(diào)控探討益腎化瘀法治療盆腔炎性疾病后遺癥機(jī)制.pdf

1、目的:探討中醫(yī)學(xué)、西醫(yī)學(xué)對(duì)盆腔炎性疾病后遺癥的認(rèn)識(shí)及益腎化瘀法治療盆腔炎性疾病后遺癥相關(guān)機(jī)制，明確益腎化瘀法對(duì)盆腔炎性疾病后遺癥過程中成纖維細(xì)胞增殖的干預(yù)機(jī)制及與益腎法、化瘀法機(jī)制差異。
　　方法:通過文獻(xiàn)研究，梳理盆腔炎性疾病后遺癥相關(guān)認(rèn)識(shí);通過益腎化瘀法改善盆腔炎性疾病后遺癥以及女性生育力的臨床研究，探討益腎化瘀方臨床療效。通過體外實(shí)驗(yàn)，分別以不同濃度的YSHY、YS、HY方作用于體外培養(yǎng)的NIH/3T3細(xì)胞，以MTT法檢測(cè)細(xì)

2、胞增殖。觀察不同藥方對(duì)bFGF、TGF-β、HOP表達(dá)的影響。探討不同藥方對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)表達(dá)的影響，如HA、Ⅲ型膠原蛋白等。探討對(duì)成纖維細(xì)胞Ⅲ型膠原蛋白mRNA表達(dá)的影響，觀察不同藥方對(duì)成纖維細(xì)胞STAT6信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響。
　　結(jié)果:臨床研究發(fā)現(xiàn)益腎化瘀序貫組總有效率優(yōu)于對(duì)照組(P＜0.05)，軀體功能障礙、社會(huì)心理?yè)p傷等評(píng)分較對(duì)照組及中藥組下降，差異非常顯著(P＜0.01)。臨床研究還發(fā)現(xiàn)治療組、對(duì)照組患者治療后VAS評(píng)分均較

3、治療前降低，差異非常顯著(P＜0.01)，臨床妊娠率治療組顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。治療組消化系統(tǒng)和總的不良反應(yīng)發(fā)生率低于對(duì)照組，差異顯著(P＜0.05)。
　　體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)益腎化瘀方能夠有效抑制成纖維細(xì)胞增殖及其相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)，并減少HOP的產(chǎn)生，呈劑量依賴關(guān)系。而拆方組中的益腎方與益腎化瘀方相比，其抑制成纖維細(xì)胞增殖及相關(guān)機(jī)制的效應(yīng)差異較低，差異顯著(P＜0.05);拆方組中的化瘀方與益腎化瘀方相比，其抑制成纖維細(xì)胞

4、增殖及相關(guān)機(jī)制的效應(yīng)亦顯著較低，其差異也具有顯著性，（P＜0.05），但化瘀方比益腎方抑制成纖維細(xì)胞增殖的效應(yīng)佳。HA表達(dá)量各干預(yù)組顯著下降。與空白組相比，各干預(yù)組均抑制HA表達(dá)，差異非常顯著(P＜0.01)，較之益腎化瘀組，益腎組及化瘀組抑制作用弱，差異非常顯著(P＜0.01)。各干預(yù)組Ⅲ型膠原蛋白表達(dá)顯著下降。與空白組相比，各干預(yù)組均非常顯著抑制HA表達(dá)(P＜0.01)，但較之益腎化瘀組，益腎組及化瘀組抑制作用弱，具有非常顯著差異(

5、P＜0.01)。采用比較2-△△Ct法分析細(xì)胞Ⅲ型膠原蛋白mRNA的表達(dá)量:即以管家基因β-actin作為內(nèi)參基因相對(duì)定量，以空白組細(xì)胞作為對(duì)照組，計(jì)算各組Ⅲ型膠原蛋白mRNA的△△Ct值。目的基因的量=2-△△Ct。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與空白組比較，干預(yù)各組Ⅲ型膠原蛋白mRNA表達(dá)有非常顯著降低趨勢(shì)(P＜0.01)，益腎化瘀組最低。α-SMA及STAT6的蛋白水平組間均存在顯著性差異。α-SMA蛋白:與正常組相比，益腎化瘀組、益腎組及化瘀組三組

6、該蛋白表達(dá)顯著下降(P＜0.01)，合方組與拆方組間兩兩比較，皆有顯著性差異(P＜0.01)。STAT6蛋白:與正常組相比，益腎化瘀組、益腎組及化瘀組三組該蛋白表達(dá)顯著下降(P＜0.01)，而合方組與拆方組間兩兩比較，皆有非常顯著差異(P＜0.01)。
　　結(jié)論:益腎化瘀法具有顯著抑制盆腔炎性疾病后遺癥過程中成纖維細(xì)胞增殖的效應(yīng)，其機(jī)制是通過抑制成纖維細(xì)胞增殖相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)及抑制細(xì)胞外基質(zhì)相關(guān)膠原蛋白的表達(dá)實(shí)現(xiàn)的。與益腎法、化