Th17-Treg-Th1-Th2細(xì)胞在過敏性哮喘生物共振治療過程中的變化研究.pdf

1、目的：
　　過敏性哮喘是一種氣道慢性炎癥性疾病，由多種細(xì)胞參與，這些細(xì)胞主要包括中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子。過敏性哮喘給患者家庭及社會(huì)帶來了沉重的負(fù)擔(dān)，還影響了患者的日常生活。既往研究發(fā)現(xiàn)Th1/Th2細(xì)胞比例失衡是過敏性哮喘的免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制，但過敏性哮喘的發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜，至今仍然不是十分清楚，最新研究表明Th17/Treg細(xì)胞比例失衡在某些類型的哮喘中也許起著重要作用。本研究旨在

2、通過檢測(cè)生物共振治療前后過敏性哮喘患者Th17/Treg/Th1/Th2及其相關(guān)細(xì)胞因子的變化，來了解過敏性哮喘患者疾病進(jìn)程中Th17/Treg/Th1/Th2細(xì)胞及其相關(guān)因子的作用。
　　方法：
　　(1)利用實(shí)時(shí)定量PCR（Quantitativereal-timePCR，qRT-PCR）技術(shù)在mRNA水平上檢測(cè)健康對(duì)照組、輕、中、重度哮喘組以及生物共振治療組外周血單個(gè)核細(xì)胞中IFN-γ、IL-4、IL-17和IL-10

3、mRNA的相對(duì)表達(dá)變化。
　　(2)利用ELISA技術(shù)在蛋白水平上檢測(cè)健康對(duì)照組、輕、中、重度哮喘組以及生物共振治療組血漿中IFN-γ、IL-4、IL-17和IL-10的表達(dá)變化。
　　(3)通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Th17/Treg細(xì)胞在健康對(duì)照組、輕、中、重度哮喘組以及生物共振治療組的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：
　　(1)通過qRT-PCR，我們發(fā)現(xiàn)IFN-γmRNA在輕、中度哮喘組的表達(dá)量顯著低于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

4、意義，而重度哮喘組與正常組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與哮喘組相比，治療組的IFN-γmRNA的表達(dá)水平明顯升高。與正常組相比，IL-4mRNA在輕、中、重度哮喘組的表達(dá)量逐漸增高，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與哮喘組相比，IL-4mRNA在治療組中的表達(dá)量明顯降低。與正常組相比，IL-17mRNA在中、重度哮喘組的表達(dá)量顯著升高，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但是輕度哮喘組與正常組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與哮喘組相比，IL-17mRNA在治療組中的表達(dá)量顯著下降。在中、重度哮

5、喘組中，IL-10mRNA的表達(dá)量較正常組顯著降低，而輕度哮喘組與正常組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與哮喘組相比，治療組的IL-10mRNA表達(dá)水平明顯增高。我們進(jìn)一步用ELISA方法從蛋白水平上驗(yàn)證了這一結(jié)果。
　　(2)通過流式細(xì)胞術(shù)我們發(fā)現(xiàn)，與正常組相比，中、重度哮喘組Th17/CD4+T細(xì)胞比率(％)顯著升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與哮喘組相比，Th17/CD4+T細(xì)胞比率(％)在治療組明顯減低。但是中、重度哮喘組Treg/CD4+T細(xì)胞

6、比率(％)比正常組顯著下降，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與哮喘組相比，Treg/CD4+T細(xì)胞比率(％)比治療組明顯升高。
　　結(jié)論：
　　1.IFN-γ也許在輕、中度哮喘患者生物共振治療過程中發(fā)揮重要作用;IL-4可能在輕、中、重度哮喘患者生物共振治療過程發(fā)揮關(guān)鍵作用;而IL-17和IL-10或許在中、重度哮喘患者生物共振治療中起著重要作用。
　　2.Th17細(xì)胞和Treg細(xì)胞在中、重度哮喘患者生物共振治療中起著非常重要的作用。