多巴胺在術(shù)后腸粘連中的作用研究.pdf

1、 目的：(1)、制作SD大鼠腸粘連模型,通過免疫組化的方法檢測術(shù)后第2、5、8天酪氨酸羥化酶(Tyrosine Hydroxylase ,TH)、多巴胺脫羧酶(Dopamine Decarboxylase ,DDC)、多巴胺D2受體(Dopamine D2 Receptor DAD2R)在盲腸的表達(dá),探討多巴胺與術(shù)后腸粘連的關(guān)系。(2)、通過分別抑制 SD 大鼠腸粘連模型術(shù)后的炎癥反應(yīng)及多巴胺的作用,觀察多巴胺與炎癥介質(zhì)之間的相互作用

2、,探討多巴胺在術(shù)后腸粘連形成中的作用機(jī)制。方法：該實(shí)驗(yàn)研究分兩部分：(1)、選取SD雄性大鼠96只,隨機(jī)分為3組：正常對(duì)照組(n=14),假手術(shù)組(n=42),腸粘連模型組(n=42)。正常對(duì)照組不予處理,假手術(shù)組行單純開關(guān)腹手術(shù),模型組采用 Ellis 法制備腸粘連模型。假手術(shù)組及模型組分別在術(shù)后第2、5、8天分批處死,每次每組各14只,正常組動(dòng)物飼養(yǎng)3天后一次性全部處死,動(dòng)物處死之前禁食12小時(shí)。動(dòng)物處死后取盲腸,經(jīng)固定、包埋后行免

3、疫組化染色。利用 IPP5.1軟件進(jìn)行圖像分析,以平均光密度值(OD值)代表各組TH、DDC、DAD2R的表達(dá)。應(yīng)用軟件spss17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,通過單因素方差分析檢驗(yàn)各組間差異性,P<0.05 視為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(2)、將 42只SD雄性大鼠隨機(jī)分組3組：A組：生理鹽水組(n=14)、B組：多潘立酮組(n=14)、C組：保泰松組(n=14)。所有大鼠按Ellis法制備成腸粘連模型,術(shù)后第二天開始,各組予以相應(yīng)藥物灌胃。各組藥物分

4、別為：A組予以0.9%的生理鹽水1ml,B組予以0.09%的多潘立酮混懸液1ml (臨床等效劑量),C組予以0.94%的保泰松混懸液1ml(臨床等效劑量)。術(shù)后第五天麻醉動(dòng)物后采血,同時(shí)動(dòng)物處死后取盲腸。各組動(dòng)物盲腸應(yīng)用免疫組化方法檢測TH、DDC、DAD2R的表達(dá),并行HE染色觀察其病理變化,同時(shí)采用酶聯(lián)免疫法測定所采血液中腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(trans

5、forming growth factor-β1, TGF-β1)、前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)含量,此外運(yùn)用電阻法測定白細(xì)胞計(jì)數(shù)。各組圖像處理及數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理均同實(shí)驗(yàn)第一部分。結(jié)果：(1)、模型組術(shù)后第2、5、8天所測得的代表 TH、DDC、DAD2R 表達(dá)的 OD 值,與正常對(duì)照組及假手術(shù)組比較均有顯著升高(p<0.05、p<0.01)。表達(dá)在術(shù)后第2天最高,到第8天基本接近正常對(duì)照組表達(dá),呈逐漸降低的

6、過程。(2)、多潘立酮組所測 TGF-β1、TNFα、PGE2、白細(xì)胞值均較生理鹽水組低(P<0.05),同時(shí)HE染色結(jié)果可見相應(yīng)的變化；保泰松組TH、DDC、DAD2R表達(dá)均較生理鹽水組低(P<0.05)。結(jié)論：(1)、術(shù)后腸粘連形成過程中,TH、 DDC、 DAD2R表達(dá)增高,提示多巴胺及其受體參與了術(shù)后早期腸粘連的形成。(2)、在術(shù)后腸粘連形成過程中,多巴胺與炎癥相互作用,一方面炎癥反應(yīng)增加了胃腸道多巴胺及其受體表達(dá),進(jìn)而影響胃腸