深圳市城鎮(zhèn)化地區(qū)典型水環(huán)境抗生素抗性基因污染研究.pdf

1、抗生素在醫(yī)療業(yè)、畜牧業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)中的長期濫用,導致抗生素抗性基因大量產(chǎn)生,對人類和動物的健康造成很大威脅?？股乜剐曰蜃鳛橐环N新型污染物,在我國尚未得到足夠重視,其產(chǎn)生、富集、傳播規(guī)律等方面的研究才剛剛起步。鑒于此,本研究從抗生素抗性基因污染可能較嚴重的深圳市光明污水處理廠和木墩河采集水樣,利用傳統(tǒng)微生物學、PCR、定量PCR、克隆與序列分析等分子生物學方法,研究與人類關系密切的LFE的動態(tài)變化和耐藥性情況、抗生素抗性基因污染情況,并對

2、抗性基因的傳播機制做了初步研究。
　　通過分離培養(yǎng)乳糖發(fā)酵型腸桿菌(LFE),對不同環(huán)境中LFE的存在情況、動態(tài)變化和抗生素抗性情況的研究發(fā)現(xiàn):(1)光明污水處理廠進水段和木墩河上游中LFE顯示高比例的多藥抗性現(xiàn)象,這說明城市污水和養(yǎng)殖廢水已成為水環(huán)境中重要的抗生素抗性基因污染源;(2)光明污水處理廠污泥段中抗四環(huán)素LFE占總LFE菌株的80％,明顯高于國外污水處理廠的一般水平。
　　對光明污水處理廠和木墩河中抗生素抗性基因

3、污染情況進行研究后發(fā)現(xiàn):(1)在深圳光明污水處理廠和木墩河中8種四環(huán)素抗性基因被定性檢出,分別是:tetC、tetM、tetA、tetE、tetG、tetO、tetS和tetX,其中tetC、tetG、tetM、tetO和tetX的檢出率為100%,其次為tetA、tetE和tetS均為40%;(2)光明污水處理廠各工段和木墩河中tetC和tetE在抗性LFE中的比例均明顯高于無抗性LFE,適合作為LFE四環(huán)素抗性的指示基因;(3)在光

4、明污水處理廠和木墩河中,tetC和tetG的含量明顯高于其他四環(huán)素類抗性基因,tetG最高可達2.31×106copies/ng,說明這兩種抗性基因的污染較嚴重,可將tetC和tetG作為水體環(huán)境中抗性基因污染指標長期監(jiān)測;(4)木墩河中tetC和tetG的種類較為單一,其中tetG與沙門氏菌某類tetG抗性基因(AY963830.5)具有98%的同源性,tetC與HQ399580C34具有99%的同源性,DNA序列中只有極少數(shù)堿基發(fā)生