深圳市城鎮(zhèn)化地區(qū)典型水環(huán)境抗生素抗性基因污染研究.pdf

1、抗生素在醫(yī)療業(yè)、畜牧業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)中的長(zhǎng)期濫用,導(dǎo)致抗生素抗性基因大量產(chǎn)生,對(duì)人類和動(dòng)物的健康造成很大威脅?？股乜剐曰蜃鳛橐环N新型污染物,在我國(guó)尚未得到足夠重視,其產(chǎn)生、富集、傳播規(guī)律等方面的研究才剛剛起步。鑒于此,本研究從抗生素抗性基因污染可能較嚴(yán)重的深圳市光明污水處理廠和木墩河采集水樣,利用傳統(tǒng)微生物學(xué)、PCR、定量PCR、克隆與序列分析等分子生物學(xué)方法,研究與人類關(guān)系密切的LFE的動(dòng)態(tài)變化和耐藥性情況、抗生素抗性基因污染情況,并對(duì)

2、抗性基因的傳播機(jī)制做了初步研究。
　　通過分離培養(yǎng)乳糖發(fā)酵型腸桿菌(LFE),對(duì)不同環(huán)境中LFE的存在情況、動(dòng)態(tài)變化和抗生素抗性情況的研究發(fā)現(xiàn):(1)光明污水處理廠進(jìn)水段和木墩河上游中LFE顯示高比例的多藥抗性現(xiàn)象,這說明城市污水和養(yǎng)殖廢水已成為水環(huán)境中重要的抗生素抗性基因污染源;(2)光明污水處理廠污泥段中抗四環(huán)素LFE占總LFE菌株的80％,明顯高于國(guó)外污水處理廠的一般水平。
　　對(duì)光明污水處理廠和木墩河中抗生素抗性基因

3、污染情況進(jìn)行研究后發(fā)現(xiàn):(1)在深圳光明污水處理廠和木墩河中8種四環(huán)素抗性基因被定性檢出,分別是:tetC、tetM、tetA、tetE、tetG、tetO、tetS和tetX,其中tetC、tetG、tetM、tetO和tetX的檢出率為100%,其次為tetA、tetE和tetS均為40%;(2)光明污水處理廠各工段和木墩河中tetC和tetE在抗性LFE中的比例均明顯高于無抗性LFE,適合作為L(zhǎng)FE四環(huán)素抗性的指示基因;(3)在光

4、明污水處理廠和木墩河中,tetC和tetG的含量明顯高于其他四環(huán)素類抗性基因,tetG最高可達(dá)2.31×106copies/ng,說明這兩種抗性基因的污染較嚴(yán)重,可將tetC和tetG作為水體環(huán)境中抗性基因污染指標(biāo)長(zhǎng)期監(jiān)測(cè);(4)木墩河中tetC和tetG的種類較為單一,其中tetG與沙門氏菌某類tetG抗性基因(AY963830.5)具有98%的同源性,tetC與HQ399580C34具有99%的同源性,DNA序列中只有極少數(shù)堿基發(fā)生