纖維素高效降解混合菌的篩選及其糖化發(fā)酵條件研究.pdf

1、本課題在能源危機(jī)惡化而秸稈纖維又嚴(yán)重浪費(fèi)的雙重大背景下提出，目的是通過尋找對秸稈纖維素有高效降解作用的混合菌對秸稈進(jìn)行降解達(dá)到資源化利用?；谏鲜瞿康?，首先從分菌著手，以長期被秸稈、植被覆蓋的土壤為樣本，經(jīng)反復(fù)富集培養(yǎng)和分離純化逐步得到14株能在以羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上生長的天然菌株；然后經(jīng)濾紙崩解測試、剛果紅纖維素平板識別，篩選出10株適應(yīng)性強(qiáng)、纖維素降解效果明顯的真菌；通過固態(tài)發(fā)酵試驗(yàn)，定量掌握10株

2、菌的生長周期及其產(chǎn)酶情況，從而確定出4種組合方式；通過比較這4組固態(tài)發(fā)酵中CMC、FPA酶活大小及其同生性的優(yōu)劣，最終得到一組對纖維素降解效果最好的混合菌。經(jīng)鑒定兩株菌分別為毛霉菌(Mucor sp.)和曲霉菌(Aspergillus sp)。 為使篩選的混合菌能最大限度的發(fā)揮對纖維素的降解作用，分別從種子制備、培養(yǎng)基優(yōu)化和培養(yǎng)條件優(yōu)化三個方面，通過單因素和正交兩種試驗(yàn)方式對其糖化發(fā)酵條件進(jìn)行深入研究。初步確定種子制備過程中，最

3、佳接種方式為菌絲接種，最佳接種時間為3d；培養(yǎng)基的最佳組合為稻草粉：麩皮=8：1，(NH<,4>)<,2>SO<,4>含量=2.5％，固液比=1：1.5；最適培養(yǎng)條件分別為：當(dāng)pH值自然、接種量20％、接種比2：1、28℃下培養(yǎng)5天時，CMC酶活最大為732.41U，當(dāng)pH值自然、接種量30％、接種比1：1、28℃下培養(yǎng)5d時，濾紙酶活最大為75.34U。與目前報(bào)道的纖維素降解菌相比，酶活有了一定的提高，為實(shí)際中纖維素資源的能源化利用提