高效纖維素降解菌株的篩選及其復(fù)合系菌劑在秸稈堆肥中的應(yīng)用.pdf

1、本研究從土壤、秸稈與牛糞堆腐物及垃圾堆腐物中分離得到293株纖維素降解菌，其中細(xì)菌79株，放線(xiàn)菌121株，真菌93株。通過(guò)纖維素剛果紅培養(yǎng)基和測(cè)定生長(zhǎng)速度復(fù)篩出高效纖維素降解菌10株，其中細(xì)菌4株(b60、b62、b66、b68)，放線(xiàn)菌4株(s96、s98、s99、s106)，真菌2株(f29、f53)。鑒定結(jié)果表明：b60為纖維單孢菌屬(Cellulomonas)，b62為假單孢菌屬(Pseudomonas)，b66、b68為芽孢桿

2、菌屬(Bacillus)；s96、s98、s99為鏈霉菌屬(Sterptomyces)，s106為小單胞菌屬(Micromonospora)；f29為曲霉屬(Aspergillus)，f53為木霉屬(Trichoderma)。 篩選出來(lái)的10株纖維素降解菌與本實(shí)驗(yàn)室保存的黑曲霉(HQM)，強(qiáng)壯纖維單脆菌(DBJ)，2株固氮菌(AB9，AB15)，EM菌劑的正交試驗(yàn)結(jié)果表明，3個(gè)組合總體表現(xiàn)出協(xié)同降解纖維素作用，對(duì)濾紙降解效果為組

3、合12＞組合8＞組合5。其中，通過(guò)對(duì)組合12的一系列環(huán)境適應(yīng)性研究表明，該組合的碳源為微晶纖維素+CMC-Na時(shí)CMC酶活最高，最適氮源為蛋白胨+酵母膏，最適pH6.5，最適培養(yǎng)溫度為30℃，培養(yǎng)第6天CMC酶活最高。 對(duì)菌株復(fù)合系12所產(chǎn)的胞外纖維素酶進(jìn)行了酶學(xué)性質(zhì)研究，結(jié)果表明在60℃，pH6.0條件下，該復(fù)合系纖維素酶對(duì)CMC-Na的米氏常數(shù)Km為0.32g/L，酶的最大反應(yīng)速度Vmax為0.15mg/(min·ml)，。

4、經(jīng)過(guò)SDS-PAGE電泳結(jié)果表明，菌株復(fù)合系12所產(chǎn)胞外纖維素酶的分子量為98.5kD和61.3kD。 以秸稈為堆肥原料進(jìn)行了好氧堆肥試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)共設(shè)置了3個(gè)處理分別為：不接種菌劑(CK1)、外購(gòu)商品菌劑(CK2)、接種自制復(fù)合微生物菌劑(處理T)。對(duì)堆肥過(guò)程中的溫度、含水率、pH值、C/N比、粗灰分、纖維素含量、耗氧速率、種子發(fā)芽率等11個(gè)指標(biāo)進(jìn)行了跟蹤測(cè)定，結(jié)果表明：接入復(fù)合菌劑的CK2和處理T，平均C/N比為19.27，比C

5、K1低17.10：平均纖維素含量為21.25％，比CK1低6.35％；平均耗氧速率為0.035mgO2/(g·h·VS)，而CK1為0.76mgO2/(g·h·VS)；平均種子發(fā)芽率為101.3％，比CK1高33.7％。通過(guò)對(duì)C/N比、纖維素含量、耗氧速率和種子發(fā)芽率4個(gè)堆肥腐熟度指標(biāo)的方差分析，結(jié)果表明，CK1和CK2，CK1和處理T的C/N比都存在顯著差異，CK2與處理T之間差異不顯著；其他3個(gè)指標(biāo)的CK1、CK2、處理T三者之間的