高效纖維素降解菌株的篩選及其復合系菌劑在秸稈堆肥中的應用.pdf

1、本研究從土壤、秸稈與牛糞堆腐物及垃圾堆腐物中分離得到293株纖維素降解菌，其中細菌79株，放線菌121株，真菌93株。通過纖維素剛果紅培養(yǎng)基和測定生長速度復篩出高效纖維素降解菌10株，其中細菌4株(b60、b62、b66、b68)，放線菌4株(s96、s98、s99、s106)，真菌2株(f29、f53)。鑒定結(jié)果表明：b60為纖維單孢菌屬(Cellulomonas)，b62為假單孢菌屬(Pseudomonas)，b66、b68為芽孢桿

2、菌屬(Bacillus)；s96、s98、s99為鏈霉菌屬(Sterptomyces)，s106為小單胞菌屬(Micromonospora)；f29為曲霉屬(Aspergillus)，f53為木霉屬(Trichoderma)。 篩選出來的10株纖維素降解菌與本實驗室保存的黑曲霉(HQM)，強壯纖維單脆菌(DBJ)，2株固氮菌(AB9，AB15)，EM菌劑的正交試驗結(jié)果表明，3個組合總體表現(xiàn)出協(xié)同降解纖維素作用，對濾紙降解效果為組

3、合12＞組合8＞組合5。其中，通過對組合12的一系列環(huán)境適應性研究表明，該組合的碳源為微晶纖維素+CMC-Na時CMC酶活最高，最適氮源為蛋白胨+酵母膏，最適pH6.5，最適培養(yǎng)溫度為30℃，培養(yǎng)第6天CMC酶活最高。 對菌株復合系12所產(chǎn)的胞外纖維素酶進行了酶學性質(zhì)研究，結(jié)果表明在60℃，pH6.0條件下，該復合系纖維素酶對CMC-Na的米氏常數(shù)Km為0.32g/L，酶的最大反應速度Vmax為0.15mg/(min·ml)，。

4、經(jīng)過SDS-PAGE電泳結(jié)果表明，菌株復合系12所產(chǎn)胞外纖維素酶的分子量為98.5kD和61.3kD。 以秸稈為堆肥原料進行了好氧堆肥試驗，實驗共設置了3個處理分別為：不接種菌劑(CK1)、外購商品菌劑(CK2)、接種自制復合微生物菌劑(處理T)。對堆肥過程中的溫度、含水率、pH值、C/N比、粗灰分、纖維素含量、耗氧速率、種子發(fā)芽率等11個指標進行了跟蹤測定，結(jié)果表明：接入復合菌劑的CK2和處理T，平均C/N比為19.27，比C

5、K1低17.10：平均纖維素含量為21.25％，比CK1低6.35％；平均耗氧速率為0.035mgO2/(g·h·VS)，而CK1為0.76mgO2/(g·h·VS)；平均種子發(fā)芽率為101.3％，比CK1高33.7％。通過對C/N比、纖維素含量、耗氧速率和種子發(fā)芽率4個堆肥腐熟度指標的方差分析，結(jié)果表明，CK1和CK2，CK1和處理T的C/N比都存在顯著差異，CK2與處理T之間差異不顯著；其他3個指標的CK1、CK2、處理T三者之間的