超順磁性氧化鐵攜載Uc-MSC干預(yù)CIA大鼠炎癥反應(yīng)的研究.pdf

1、目的：
　　 為了研究臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(Umbilical cord mesenchymal stem cells，Uc-MSC)對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)免疫炎性病理過程的治療作用，課題選擇SD大鼠建立了類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(collagen typeⅡ-induced arthritis，CIA)模型，采用超順磁性氧化鐵(Superparamagnetic nanoparticles，SPIO

2、)攜帶Uc-MSC，通過MRI下成像的方法觀察其在CIA大鼠病變關(guān)節(jié)聚集和對(duì)RA炎癥網(wǎng)絡(luò)的干預(yù)作用。
　　 研究對(duì)象：
　　 CIA大鼠
　　 方法：
　　 以Ⅱ型膠原和完全弗氏佐劑(complete Freund’s Adjuvant，CFA)建立CIA大鼠模型。實(shí)驗(yàn)分為5組：對(duì)照組、造模組、Uc-MSC組、超順磁性氧化鐵組(Superparamagnetic nanoparticles，SPIO)及超

3、順磁性氧化鐵納米結(jié)合Uc-MSC組(SPIO-UCMSC)，每組10只，其中Uc-MSC組、超順磁性氧化鐵組及超順磁性氧化鐵納米結(jié)合Uc-MSC組完成造模后一周經(jīng)尾靜脈分別給予Uc-MSC、SPIO、SPIO-UCMSC各0.5ml注射。所有實(shí)驗(yàn)組大鼠每周予以AI評(píng)分，第5周于MRI下成像，治療后第1周及第5周于腹主靜脈采血，3ml置于血清管中，分離血清后予酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)各組大鼠血清白介素-1(interleukin

4、-1，IL-1)、白介素-6、白介素-18、腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α)、血管細(xì)胞黏附分子(vascularcell adhesion molecule-1，VCAM-1)；余2ml置肝素抗凝管中，以流式細(xì)胞術(shù)(flowcytometry，F(xiàn)CM)檢測(cè)中性粒細(xì)胞表面CD11b的表達(dá)；處死大鼠后取膝關(guān)節(jié)進(jìn)行常規(guī)病理檢測(cè)了解滑膜增生情況。
　　 結(jié)果：
　　 1、以Ⅱ型膠原和完全弗氏佐劑

5、成功造模CIA大鼠，經(jīng)AI評(píng)分、關(guān)節(jié)X線片以及關(guān)節(jié)滑膜組織病理證實(shí)。
　　 2、造模組CIA大鼠血清IL-1、IL-6、IL-18、TNF-α、VCAM-1及中性粒細(xì)胞表面CD11b的表達(dá)水平明顯增高于對(duì)照組(P<0.05)；含有Uc-MSC組上述指標(biāo)水平于治療后第1周、第5周均降低(P<0.05)，AI評(píng)分亦降低。
　　 3、SPIO-UcMSC組和Uc-MSC組于治療后第5周血清炎癥因子水平低于治療后第1周和模型組(

6、P<0.05)，SPIO-UcMSC組與其他組比較大鼠下肢于MRI下可見明顯低密度影。
　　 4、SPIO-UcMSC組和Uc-MSC組治療后對(duì)血清炎癥因子水平的影響相似，兩組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1、CIA大鼠發(fā)病過程中炎癥網(wǎng)絡(luò)因子釋放明顯增高，是參與形成RA的免疫性關(guān)節(jié)炎和滑膜病變病理過程的重要因素。
　　 2、SPIO-UcMSC在病變關(guān)節(jié)濃聚，并于MRI下顯影且成像