雄黃量子點的抗腫瘤研究.pdf

1、第一部分雄黃量子點對肝癌細胞HepG2細胞的凋亡誘導作用
　　目的：在傳統(tǒng)醫(yī)學中，雄黃已被用于解毒、燥濕、截瘧、祛痰等癥。但是它難溶的特性限制了臨床應用。本課題組獲贈粒徑在（6.11±1.19 nm)的雄黃量子點。應用肝癌細胞株HepG2研究雄黃量子點對人肝癌細胞的作用及可能機制。
　　方法：MTT法檢測雄黃量子點對正常肝細胞（L02）和肝癌細胞（HepG2）的毒性。流式細胞儀Annexin V-FITC/PI雙染法檢測雄黃

2、量子點誘導的壞死和凋亡細胞。RT-PCR法檢測凋亡相關基因Bax、B-cell lymphoma/leukemia2(Bcl-2)和內質網(wǎng)應激相關基因CHOP10、(glucose-regulated protein78) GRP78的表達。Western blot檢測凋亡相關蛋白Bax、Bcl-2。以JC-1為探針用共聚焦顯微鏡檢測線粒體膜電位變化。結果：雄黃量子點對正常肝細胞和肝癌細胞的毒性呈現(xiàn)濃度依賴性，對HepG2細胞和L02的

3、IC50分別是23μg/mL和50μg/mL。肝癌細胞（HepG2）比正常肝細胞（L02）更敏感。濃度為15μg/mL時，晚期凋亡和壞死細胞占15以上％，而當濃度為30μg/mL時，晚期凋亡和壞死細胞占60%。雄黃量子點30μg/mL處理組抗凋亡蛋白Bcl-2水平下降50%，促凋亡蛋白Bax隨濃度增加而增加，7.5μg/mL、15μg/mL、30μg/mL組與對照組比較有顯著差異。雄黃量子點（30μg/mL）處理組線粒體膜電位下降。內質

4、網(wǎng)應激基因CHOP10和GRP78隨雄黃量子點濃度增加升高。
　　結論：雄黃量子點能有效抑制肝癌細胞增值，內質網(wǎng)應激引起的細胞凋亡和壞死是其可能機制之一。
　　第二部分雄黃量子點對荷瘤小鼠子宮頸癌的抑制作用
　　目的：觀察雄黃量子點和含雄黃中藥六神丸對荷瘤小鼠宮頸癌的抑制作用。
　　方法：U14瘤株接種 C57小鼠腹腔傳代，傳第三代時在無菌條件下取腹水，接種昆明種小鼠右側腋窩皮下。接種后隨機將昆明種小鼠分為模型組

5、、順鉑組、雄黃量子點組、六神丸組。接種次日開始預防性給藥，順鉑組腹腔注射3 mg/ kg，隔日1次；分別給予雄黃量子點10 mg/kg、六神丸100 mg/kg灌胃給藥，每日1次；模型組給予等體積飲用水灌胃，每日1次，持續(xù)14 d。觀察體重變化并測量腫瘤大小。造模第15日處死小鼠稱體重、瘤重，計算腫瘤指數(shù)、肝腎指數(shù)和抑瘤率。
　　結果：與模型組比較，順鉑組小鼠體重下降明顯（P<0.05），六神丸組和雄黃量子點組無顯著改變（P>0.