中藥Ⅱ號洗液濕敷對急性濕疹實驗動物組織炎癥及CGRP影響.pdf

1、目的：通過中藥Ⅱ號洗液濕敷對小鼠急性濕疹模型的皮膚組織炎癥及降鈣素相關(guān)基因肽（CGRP）影響的實驗研究，探討其治療急性濕疹的機理。
　　 方法：實驗研究實驗1.取昆明種遠交系健康小白鼠40只,體重(2 0±2 g)，雌雄比 1：1，隨機分4組，每組10只，分別為空白組、模型對照組、3％硼酸組、中藥Ⅱ號洗液組。空白組不作做任何處理，模型對照組、3％硼酸組、中藥Ⅱ號洗液組均采用2,4二硝基氟苯（DNFB）造模。用丙酮、橄欖油(4:1

2、)為溶劑，稀釋2,4二硝基氟苯為0.2％及0.5％溶液備用。小鼠背部脫毛，面積為2×2cm2，在脫毛范圍內(nèi)均勻涂布0.5％DNFB，每天1次，連續(xù)2天，第6天進行激發(fā)：在三組小鼠左右耳背面涂抹0.2％DNFB。激發(fā)后72 h,將硼酸組、中藥組分別外用3﹪硼酸、中藥Ⅱ號洗液浸濕無菌紗布，膠帶固定濕敷小鼠兩耳雙側(cè)面，每天2次,每次30min,連續(xù)10天，模型對照組不作處理。于停藥后24h用頸椎脫臼法處死小鼠，測四組小鼠：(1)左耳厚度差:用

3、千分尺測定耳中部厚度，計算左耳誘發(fā)后厚度差(S1)。(2)耳質(zhì)量差:測定厚度后以打孔器（8mm）取耳中部組織塊，分析天平測質(zhì)量，計算左耳組織塊的質(zhì)量差(S2)。比較各組數(shù)值，結(jié)果進行數(shù)據(jù)分析。實驗2.真皮炎性細胞計數(shù)：實驗方法同實驗（1），取各組小塊左耳組織，石蠟包埋切片,制成常規(guī)蘇木素—伊紅（HE）染色,分別計數(shù)10個高倍視野(HPF)淋巴細胞，取其平均值，計算出各組平均值。實驗3小鼠右耳降鈣素相關(guān)基因肽測試實驗方法同實驗（1），切下

4、各組小鼠右耳，天平測量質(zhì)量，按比例加入冷冰醋酸液0.5ml，100℃水浴10分鐘，入組織勻漿機勻漿3分鐘，至見不到顆粒狀物,將勻漿液移入離心管中，離心機3000轉(zhuǎn)∕分，離心3分鐘，取上清液移入潔凈瓶內(nèi)，滴入ELISA試劑盒，移入酶標儀測定降鈣素相關(guān)基因肽含量。
　　 結(jié)果：1.中藥Ⅱ號洗液組在左耳腫脹度均比模型對照組、硼酸組小(p<0.05)；2.中藥Ⅱ號洗液組抑制小鼠真炎性細胞細胞浸潤的作用明顯優(yōu)于硼酸組(p<0.05)；3.