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1、開放性損傷是一個(gè)復(fù)雜的病理變化過程,不論平時(shí)或戰(zhàn)時(shí)都較多見。因傷口多有污染,如處理不及時(shí)或不當(dāng),易發(fā)生感染,影響愈合和肢體的功能恢復(fù),嚴(yán)重者可造成殘廢甚至危及傷員的生命。過去的研究多集中在開放性損傷本身,而對(duì)影響損傷進(jìn)程的環(huán)境因素涉及較少。海洋生態(tài)環(huán)境與陸地生態(tài)系統(tǒng)有著本質(zhì)的區(qū)別,發(fā)生在海水中的開放性損傷是指漁民或海戰(zhàn)中傷員受海水浸泡的一類特殊損傷,該類傷員的救治是目前我們醫(yī)務(wù)人員面臨的重要課題。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)合并海水浸泡的開放性損傷的傷
2、情特點(diǎn)、發(fā)病機(jī)制及臨床救治均極少見文獻(xiàn)報(bào)道。本研究旨在通過海水浸泡軟組織傷的動(dòng)物模型,在海水浸泡結(jié)束后立即應(yīng)用不同濃度的低滲鹽水對(duì)傷口進(jìn)行沖洗干預(yù),電鏡下觀察肌細(xì)胞、肌間質(zhì)損傷變化及細(xì)胞凋亡情況,研究海水及低滲鹽水的干預(yù)對(duì)開放性傷口的影響,以及對(duì)組織可能帶來的病理改變及對(duì)檢測(cè)細(xì)胞凋亡相關(guān)基因Caspase3基因mRNA表達(dá)的影響,了解組織Na+,K+-ATPase活性的變化,初步確定低滲鹽水沖洗在該類創(chuàng)傷早期清創(chuàng)中的重要性,為臨床外科早
3、期清創(chuàng)治療提供理論依據(jù)。 目的:建立海水浸泡兔軟組織傷的動(dòng)物模型,觀察不同濃度低滲鹽水沖洗后海水浸泡軟組織傷的病理變化及細(xì)胞凋亡,并對(duì)其機(jī)制作進(jìn)一步探討,為臨床收治大量海水浸泡軟組織傷的初步處理提供依據(jù)。 方法:將新西蘭大白兔60只隨機(jī)分為生理鹽水沖洗組(A組)、無菌蒸餾水沖洗組(B組)、0.45%低滲鹽水沖洗組(C組)、單純海水浸泡組(D組)各15只。利用兔后腿軟組織損傷、海水浸泡模型,分別于損傷后浸泡于海水中2小時(shí),
4、浸泡后分別進(jìn)行各種低滲鹽水沖洗,分別于干預(yù)處理后1h、3h、6h、8h、12h,在損傷周圍0.5cm范圍內(nèi)的肌肉組織中取材,0.5cm3損傷組織用4%福爾馬林固定,HE染色,光鏡下觀察損傷組織的細(xì)胞浸潤(rùn)情況,用免疫組化法檢測(cè)受傷肌肉組織凋亡相關(guān)基因Caspase3表達(dá)情況;1 mm3損傷組織用1%戊二醛-%多聚甲醛混合固定液(pH7.4)4℃固定,電鏡觀察其細(xì)胞凋亡及細(xì)胞膜、線粒體等結(jié)構(gòu)的變化;生化檢測(cè)Na+,K+-ATPase活性,了
5、解其組間的差別。 結(jié)果:1、切取標(biāo)本時(shí)損傷區(qū)域的大體觀察:A組(生理鹽水沖洗組)動(dòng)物除出現(xiàn)肌肉組織水腫,表現(xiàn)為表面瘀血、淺表靜脈擴(kuò)張,可見到輕度糜爛、出血點(diǎn);B組(無菌蒸餾水沖洗組)以肌肉組織水腫為主,微血管擴(kuò)張、滲血明顯,極少見創(chuàng)面壞死糜爛;C組(0.45%低滲鹽水沖沈組)由于所用的沖洗液的濃度介于前兩組之間,創(chuàng)面兼有肌肉組織水腫、壞死糜爛,且都占較大比重:D組(單純海水浸泡組)肌肉組織可見到明顯腫脹,充血、滲出、出血、糜爛最
6、重,其中6h是明顯損傷加重,12h時(shí)最為嚴(yán)重。2、光鏡及電鏡下的病理改變:A組(生理鹽水沖洗組)、B組(蒸餾水沖洗組)動(dòng)物軟組織HE染色在顯微鏡下肌肉組織結(jié)構(gòu)分層較清晰,肌肉纖維紋理清楚,結(jié)構(gòu)保持比較完整,各部肌細(xì)胞形態(tài)正常。C組(0.45%低滲鹽水沖洗組)和D組(單純海水浸泡組)所有動(dòng)物損傷軟組織切片均能觀察到損傷部位肌肉、軟組織的變性,表現(xiàn)為散在的斑片狀的空泡樣的變性,肌紋理扭曲不規(guī)則,及大量的白細(xì)胞浸潤(rùn),散在的紅細(xì)胞。傷后1小時(shí),
7、各組之間病理改變差別不明顯。傷后3h的病理特征為出現(xiàn)不同程度的水腫改變。在6h,8h,12h組,D組肌肉纖維腫脹更加顯著。HE染色顯示的各組之間病理改變比較,動(dòng)物海水浸泡傷的肌組織水腫的高峰時(shí)間和嚴(yán)重程度均有差別,B組(蒸餾水沖洗組)肌肉組織水腫、壞死高峰時(shí)間出現(xiàn)在傷后8h,傷后12h的組織水腫程度與8h的觀察相差無幾;但是在D組(單純海水浸泡組),肌肉組織變性壞死高峰時(shí)間出現(xiàn)在傷后6h,且隨時(shí)間延長(zhǎng)水腫持續(xù)加重,12h組所觀察到的組織
8、水腫程度明顯要重于6h組,也比A組內(nèi)任意時(shí)間組的水腫程度都要嚴(yán)重的多,且兩組之間差異明顯。3、Caspase3基因mRNA水平的表達(dá):A組(生理鹽水沖洗組)、正常組光鏡觀察均無明顯改變。B(蒸餾水沖洗組)、C組(0.45%低滲鹽水沖洗組)和D組(單純海水浸泡組)觀察各分析時(shí)相點(diǎn)肌肉、組織主要顯示為斑片狀分布的壞死組織,可見散在分布的凋亡肌細(xì)胞,且有大量的白細(xì)胞、白細(xì)胞浸潤(rùn)。在傷后1h,各組之間創(chuàng)傷病理改變差別不明顯,隨著時(shí)間推移肌細(xì)胞凋
9、亡更加顯著,且各組之間差異明顯。隨著觀察時(shí)間的延長(zhǎng),A,B、C、D各組Caspase3陽性神經(jīng)細(xì)胞0D值均呈現(xiàn)增加趨勢(shì)。組間比較,D組(海水浸泡傷組)Caspase3陽性表達(dá)神經(jīng)細(xì)胞0D值在各時(shí)間組均高于其余各組。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析各組之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。4、Na+,K+-ATPase活性的檢測(cè):A(生理鹽水沖洗組)組,Na+,K+-ATPase活性先下降后逐漸上升至基本正常,其余各組活性變化趨勢(shì)基本一致,其中蒸餾水沖洗組
10、(B組)較生理鹽水沖洗組(A組)偏低,0.45%低滲鹽水沖洗組(C組)次之,單純海水浸泡組(D組)活性最低。各觀察時(shí)間段,生理鹽水沖洗組(A組)一直處于最高水平。 結(jié)論:1、海水浸泡開放性傷口在治療早期用生理鹽水沖洗,與無菌蒸餾水、0.45%低滲鹽水沖洗相比,從大體觀察、病理、生化各方面相比明顯優(yōu)于后兩組;2、海水浸泡開放性傷口早期救治,積極使用生理鹽水沖洗,對(duì)傷口進(jìn)行徹底清創(chuàng),使受傷區(qū)組織早期脫離高滲、堿性環(huán)境,早期恢復(fù)生理狀
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