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文檔簡介
1、目的:觀察萆薢滲濕湯對動物模型小鼠的治療作用,評價其治療急性濕疹的療效并探討其作用機(jī)理。
方法:實(shí)驗(yàn)一對致敏小鼠血漿CGRP含量的影響
實(shí)驗(yàn)前1天將小鼠50只腹部去毛,范圍約3cm×3cm。用DNCB和丙酮配成5%和1%兩種溶液,開始日(第0天)和第1天于去毛部涂5%DNCB丙酮溶液25μL致敏。第7日于右耳背涂1%DNCB丙酮溶液20μL誘發(fā)皮炎。
將上述小鼠隨機(jī)分成5組,每組10只,設(shè)A組(
2、生理鹽水對照組)、B組(萆薢滲濕湯高劑量組)、C組(萆薢滲濕湯中劑量組)、D組(萆薢滲濕湯低劑量組)、E組(濕毒清陽性對照組)。第0、1、2、3、4、5、6日及第7日誘發(fā)前2h和誘發(fā)后6h,按文獻(xiàn)方法[72],萆薢滲濕湯高、中、低劑量組,用量分別為77.44g/Kg.d、38.72g/Kg.d、19.36g/Kg.d,濕毒清陽性對照組0.68g/kg.d,模型對照組給予等容積生理鹽水。各組均以0.2ml/10g體重灌胃給藥。
3、 (1)血漿CGRP劑量:誘發(fā)后24小時先以肉眼觀察皮損變化,除3個復(fù)方組和2個對照組外,另取10只小鼠不用DNCB誘發(fā)皮炎,僅用生理鹽水作為正常對照。取血,分離血漿,按照放免法測定CGRP的劑量。
(2)真皮炎細(xì)胞計(jì)數(shù):以打孔器取耳中部組織塊,在光鏡下觀察耳組織學(xué)病理改變,并計(jì)算左、右耳組織切片真皮內(nèi)單一核和多形核白細(xì)胞數(shù)目的差值。
實(shí)驗(yàn)二對醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增高的影響
取小鼠5
4、0只,隨機(jī)分5組,每組10只,分組同實(shí)驗(yàn)一。各組均以0.2ml/10g體重灌胃給藥,每天1次,連續(xù)7天。按上述給藥方法于末次給藥(第七天)120min后,腹腔注射0.6%醋酸溶液(每只0.2ml),同時,尾靜脈注射0.5%伊文思藍(lán)溶液(每只0.2ml),30min后脫頸處死,用10ml生理鹽水沖洗腹腔,3000r/min離心15min,取上清液于590nm比色測定吸光度(OD值)。
結(jié)果:實(shí)驗(yàn)一:(1)血漿CGRP劑量:模
5、型組的CGRP含量與空白組CGRP含量比較,差異有顯著性(P<0.01),提示小鼠發(fā)生過敏反應(yīng),造模成功;各組藥物與模型組比較對CGRP都有不同程度的上調(diào);萆薢滲濕湯大、中劑量組有顯著的差異(P<0.01),萆薢滲濕湯小劑量組作用不明顯(P>0.05);大劑量組與濕毒清組比較差異無顯著性(P>0.05),提示萆薢滲濕湯對致敏小鼠血漿CGRP含量的上調(diào)作用與濕毒清相似。(2)真皮炎細(xì)胞計(jì)數(shù):大、中、小劑量組、濕毒清組可明顯減少炎細(xì)胞數(shù)目,
6、與造模組比較有極顯著性差異(P<0.01);大、中劑量組、濕毒清組與小劑量組相比有顯著性差異(P<0.05)。大劑量組與濕毒清無顯著性差異(P>0.05)。提示萆薢滲濕湯抑制致敏小鼠炎細(xì)胞浸潤的作用與濕毒清相似。
實(shí)驗(yàn)二:各組OD值與空白組0D值比較,均有顯著性差異(P<0.05);大劑量組與濕毒清組比較差異無顯著性(P>0.05),提示萆薢滲濕湯大、中、小劑量組對醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增高均有抑制作用,并且其作用與
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