Occludin蛋白在重癥急性胰腺炎小鼠腸上皮細胞的表達.pdf

1、目的：
　　 觀察小鼠重癥急性胰腺炎腸上皮occludin蛋白表達變化，初步探討occludin蛋白與腸粘膜屏障損傷的關(guān)系。
　　 方法：
　　 雄性昆明種小鼠40只，體重20-25g，隨機分為對照組（n=8）、實驗組（n=32）。實驗組另分為3、6、12、24h四個時間點，每個時間點8只。所有小鼠在實驗前禁食12 h，自由飲水。實驗組小鼠腹腔分兩次注射20％精氨酸（每次劑量250mg/100g），注射間隔為1

2、h。對照組腹腔注射等體積的無菌生理鹽水。對照組小鼠末次注射后立即處死，實驗組小鼠在末次注射后3、6、12、24h隨機各取8只處死，取出胰腺組織、回腸組織，胰腺組織HE染色觀察組織形態(tài)，腸組織電鏡下觀察腸上皮超微結(jié)構(gòu)改變，并應(yīng)用免疫組化測定緊密連接蛋白occludin表達。
　　 結(jié)果：
　　 對照組電鏡下腸上皮超微結(jié)構(gòu)未見異常；實驗組3h無明顯變化，實驗組其他時點可見腸上皮微絨毛稀疏、排列不整齊，部分斷裂、脫落；細胞器受

3、損，核內(nèi)異染色質(zhì)濃縮且邊集，細胞連接增寬，24h時改變最明顯。免疫組化顯示對照組緊密連接蛋白occludin均勻一致地分布于腸上皮細胞連接處的頂端；實驗組分布不均，occludin表達隨時間推移表達逐漸降低，24小時達最低。對照組與實驗組各組平均光密度值分別為0.3448±0.0028，0.3431±0.0020，0.3423±0.0019，0.3394±0.0015，0.3095±0.0027，3h時與對照組相比無統(tǒng)計學(xué)意義，6h、1