黃體生成素生物活性測(cè)定法及應(yīng)用研究.pdf

1、目的:建立黃體生成素(LH)生物活性測(cè)定法，通過此法檢測(cè)和分析機(jī)體血清中LH生物活性的變化。
　　 方法:以人或SD大鼠血清為樣本刺激在體外培養(yǎng)的大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生睪酮(T)，通過電化學(xué)發(fā)光法(ECLI)測(cè)定T的水平來間接反應(yīng)LH的水平，即LH體外生物活性測(cè)定法，通過此法檢測(cè)和分析機(jī)體血清中LH生物活性。24只二月齡雄性SD大鼠隨機(jī)分為安靜對(duì)照組(C)、中等強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)組（ME，28m/min）和大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)組（HE，35m/min

2、），運(yùn)動(dòng)組在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)，各自訓(xùn)練8周，每周6次，每次全速40分鐘。8周后取血，分離血清。隨機(jī)收集21名體檢的健康成年男性血清，按年齡分為老年組（61～74歲）、青年組(19～37歲)。人或大鼠血清樣本刺激體外培養(yǎng)的睪丸間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生T，間接反應(yīng)血清中LH生物活性的變化。
　　 結(jié)果:
　　 1）大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)4小時(shí)后，所測(cè)得睪酮的量達(dá)到最大值，表明選擇培養(yǎng)4h最合適;
　　 2）不同濃度梯度的人血清、

3、SD大鼠血清刺激睪丸間質(zhì)細(xì)胞分泌T所得出的劑量反應(yīng)曲線有相互平行的趨勢(shì)，且梯度明顯，說明睪丸間質(zhì)細(xì)胞受外源性LH刺激反應(yīng)良好，LH體外生物活性測(cè)定法可以檢測(cè)血清中具有生物活性的LH變化;
　　 3）與C組相比，ME組和HE組大鼠血清刺激睪丸間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生T的量明顯減少(p＜0.01)，反應(yīng)LH生物活性下降;ME組與HE組之間血清LH的生物活性無明顯差異(p＞0.05);
　　 4)與青年男性相比，老年男性血清刺激睪丸間質(zhì)細(xì)