高效石油烴降解菌的分離、鑒定、菌群構(gòu)建及其在生物修復(fù)中的強(qiáng)化作用的研究.pdf

1、本研究從長期受石油污染的土壤中分離篩選到三株石油烴高效廣譜降解菌株，分別命名為W1、W2和W3。根據(jù)它們的形態(tài)觀察、培養(yǎng)特征、生理生化特征以及16S rDNA序列的同源性分析等，將它們初步鑒定為紅球菌屬(Rhodococcus sp.)。 對它們生物學(xué)特性研究結(jié)果顯示，這3株石油烴降解菌都是革蘭氏陽性菌，有球桿狀變化；其中W1在LB上培養(yǎng)時，菌落呈橙色，W2和W3菌落呈杏黃色；3株菌的最適生長溫度為30℃；最適pH值為6.0～8

2、.0；都能耐受一定濃度(1～4％)的NaCl％和抗生素；對葡萄糖和蔗糖等單糖的利用要好于麥芽糖和淀粉，對蛋白胨、牛肉膏等有機(jī)氮源的利用明顯優(yōu)于硫酸銨等無機(jī)氮源。 對它們降解性能研究結(jié)果顯示，W1、W2、W3都能以正十八烷為唯一碳源生長，在含500mg/L正十八烷為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)56h后正十八烷降解率分別達(dá)100％、96.9％、98.12％。W1、W2、W3降解正十八烷的最適溫度為10～30℃，最適pH值為6.0～8.0，

3、最適NaCl％( NaCl％)在0～5％的范圍內(nèi)變化都不大，在低溫條件下仍具有良好的降解能力。W1、W2、W3都有著很寬的烷烴降解譜，能降解高濃度原油(5g/L)中C13-C32的直鏈烷烴.W1、W2、W3菌株對石油中C27-32降解率不高，但對C13～C26的降解率均達(dá)到了80％以上，其中W1對C13～C26的降解率達(dá)到了90％以上。W1對姥鮫烷和植烷的降解率在90％以上，W2則對這兩種烷烴的降解率都在50％左右，而W3對姥鮫烷的降解

4、率也接近40％，但不能降解植烷。W1在降解烷烴的同時能產(chǎn)生生物表面活性劑，使表面張力由60.5 mN/m下降到36.6mN/m，表明W1具有較強(qiáng)的乳化和分散石油的能力。 通過對實驗室已有的菌株和這3株菌株進(jìn)行優(yōu)化組合，構(gòu)建出由菌株W1、W3、W4、W7組成的菌群D降解效果最好，在裝液量100mL、總接種量1％、石油濃度5g/L的液體無機(jī)鹽培養(yǎng)基中，5d內(nèi)原油降解率達(dá)到70.3％(重量法)、71.4％(紫外法)，復(fù)合菌群之間的相互