CaMKⅡα、β亞基mRNA在氯化鋰-匹羅卡品致癇大鼠顳葉皮質(zhì)和海馬表達(dá)的研究.pdf

1、目的 鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶-Ⅱ(calcium/calmodulin-dependent protein kinase-Ⅱ,CaMKⅡ)是一種多功能蛋白激酶,分為α、β、γ、δ 4種基因類型,編碼至少二十種亞基.其中α、β兩種亞基在中樞神經(jīng)元廣泛表達(dá),在調(diào)控神經(jīng)元離子通道和神經(jīng)元興奮性等方面發(fā)揮重要的作用.該研究旨在通過檢測氯化鋰-匹羅卡品腹腔注射致癇大鼠模型不同時間點海馬各區(qū)和顳葉皮質(zhì)內(nèi)CaMKⅡ α、β亞基mRNA的動態(tài)表達(dá),探

2、討CaMKⅡα、β亞基在癲癇(epilepsy)發(fā)病機制中的作用.方法 ①模型制作:6-8周齡健康雄性Sprague-Dawley大鼠94只,體重200-220g,隨機分為兩大組:實驗組(A組,n=54只)、生理鹽水對照組(B組,n=36只)和正常對照組(C組,n=4只),兩組又隨機分為9個亞組(A<,1-9>亞組,n=6只;B<,1-9>亞組,n=4只).實驗組給予LiCl<,2>125mg/kg腹腔注射預(yù)處理18小時后分6次腹腔注射

3、匹羅卡品60mg/kg,30分鐘/次,直至誘發(fā)癲癇持續(xù)狀態(tài)為止.生理鹽水對照組用生理鹽水代替腹腔注射.根據(jù)Racine標(biāo)準(zhǔn)判定癲癇發(fā)作程度.癲癇發(fā)作后每天8AM~8PM觀察動物行為活動,有無自發(fā)性發(fā)作.致癇后3hr、6hr、12hr、24hr、48hr、7d、15d、30d、60d不同時間點處死大鼠;②Nissl染色觀察海馬病理改變;③用原位雜交技術(shù)檢測不同時間點海馬齒狀回、CAi區(qū)、CA3區(qū)和顳葉皮質(zhì)CaMKⅡα、β亞基mRNA的表達(dá)