還原型谷胱甘肽對大鼠腸缺血再灌注抗氧化能力影響的研究.pdf

1、前言本研究采取大鼠模型，主要根據(jù)還原型谷胱甘肽的具有抗氧化，清除氧自由基作用，討論在腸缺血再灌注損傷中腸組織MDA、SOD、血清TNF-a含量變化、小腸組織病理學的改變及還原型谷胱甘肽對其的影響，探討還原型谷胱甘肽是否能減輕腸缺血再灌注損傷及其機制。 實驗材料與方法36只SD大白鼠體重250g-270g，用10％的水合氯醛，按3ml/kg麻醉后，隨機分為A，B，C，D，E，F(xiàn)六組，每組6只，即A假手術60分鐘(n=6開腹假手術，

2、0.3ml的生理鹽水，在相當于再灌注前30分鐘頸外靜脈靜推，在相當于再灌注60分鐘取材)，B缺血—再灌注對照60分鐘(n=6開腹手術，腸缺血60分鐘，再灌注60分鐘，0.3ml的生理鹽水，在再灌注前30分鐘頸外靜脈靜推)，C谷胱甘肽治療60分鐘(n=6開腹手術，腸缺血60分鐘再灌注60分鐘，20％谷胱甘肽生理鹽水溶液0.3ml，在再灌注前30分鐘頸外靜脈靜推)，D假手術120分鐘(n=6開腹假手術，0.3ml的生理鹽水，在相當于再灌注前

3、30分鐘頸外靜脈靜推，在相當于再灌注120分鐘取材)，E缺血—再灌注對照120分鐘(n=6開腹手術，腸缺血60分鐘，再灌注120分鐘，0.3ml的生理鹽水，在再灌注前30分鐘頸外靜脈靜推)，F(xiàn)谷胱甘肽治療120分鐘(n=6開腹手術，腸缺血60分鐘再灌注120分鐘，20％谷胱甘肽生理鹽水溶液0.3ml，在再灌注前30分鐘頸外靜脈靜推)。腸缺血再灌注大鼠模型以夾閉腸系膜上動脈造成腸缺血60分鐘，而后再灌注60分鐘或120分鐘。檢測腸組織SO

4、D、MDA水平、血清TNF-a水平、腸組織病理學研究，HE染色法，光鏡觀察，腸組織HE染色后腸粘膜損傷按Chiu氏六級評分評價。應用SPSS10.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析處理。 實驗結果1.腸缺血再灌注損傷引起腸組織SOD，MDA，血TNF-α及腸組織病理的變化： 腸缺血再灌注60分鐘及120分鐘均引起腸組織SOD，MDA，血TNF-α，腸組織病理的變化，與相應時相點的假手術組相比，各時相點SOD值顯著降低(P＜0.01，

5、P＜0.01)，MDA顯著升高(P＜0.01，P＜0.01)，血TNF-α顯著升高(P＜0.01，P＜0.01)，腸組織損傷顯著加重(P＜0.01，P＜0.01)，其中與缺血再灌注60分鐘組相比，缺血再灌注120分鐘組腸組織SOD活力降低更顯著(P＜0.05)，MDA升高更顯著(P＜0.01)，血TNF-α升高更顯著(P＜0.01)，腸組織損傷更為加重(P＜0.01)。 2.谷胱甘肽治療60分鐘組及谷胱甘肽治療120分鐘組對腸組

6、織SOD、MDA、血TNF-α及腸組織病理損傷的影響： 與相應時相點缺血再灌注對照組相比，谷胱甘肽給藥組腸組織SOD值顯著高于相應時相點的對照組(P＜0.01，P＜0.01)，腸組織MDA值顯著低于相應時相點的對照組(P＜0.05，P＜0.01)。谷胱甘肽給藥組門靜脈血TNF-α值顯著低于相應時相點的對照組(P＜0.01，P＜0.01)。而谷胱甘肽給藥組與相應時相點對照組相比絨毛損傷程度明顯減輕(P＜0.01，P＜0.01)。

7、 討論SOD、MDA是測定IRI損傷常用的指標，SOD活力的高低反映了機體清除氧自由基的能力[6]，MDA是脂質(zhì)過氧化的代謝產(chǎn)物，其含量多少在一定程度上反映了氧自由基對組織損傷的程度。TNF-α是由激活的單核—巨噬細胞系統(tǒng)產(chǎn)生的一種內(nèi)源性細胞調(diào)節(jié)因子，具有多種生物學作用，腸缺血再灌注后，機體單核—巨噬細胞系統(tǒng)可由靜止狀態(tài)轉(zhuǎn)變到活化狀態(tài)。還原型谷胱甘肽(GSH)是人類細胞中自然合成的一種肽，含有巰基(-SH)，有抗氧化作用，廣泛分布

8、于機體各器官內(nèi)，為維持細胞生物功能呈有重要作用。 本實驗結果表明腸缺血再灌注60分鐘及120分鐘與相應時相點的假手術組相比，各時相點SOD值顯著降低，MDA顯著升高，血TNF-α顯著升高，腸組織損傷顯著加重，說明氧自由基對腸IRI組織造成損傷。其中與缺血再灌注60分鐘組相比，缺血再灌注120分鐘組腸組織損傷更為加重。 谷胱甘肽治療60分鐘組及谷胱甘肽治療120分鐘組與相應時相點缺血再灌注對照組相比，谷胱甘肽給藥組腸組織S

9、OD值顯著升高，MDA值顯著降低。提示在腸缺血再灌注損傷中谷胱甘肽通過清除氧自由基，減輕脂質(zhì)過氧化程度，保護細胞結構，谷胱甘肽給藥組門靜脈血TNF-α值顯著低于相應時相點的對照組。說明谷胱甘肽抑制TNF-α的生成，減輕組織和器官的損傷。而谷胱甘肽給藥組與相應時相點對照組相比絨毛損傷程度明顯減輕，說明谷胱甘肽的應用能減輕腸缺血再灌注損傷后的腸黏膜屏障的破壞。 結論腸缺血再灌注可以引起腸組織的損傷，并可引起腸組織形態(tài)學改變。其中腸I