治傷膠囊治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:采用佐劑性關(guān)節(jié)炎(AA)大鼠模型,以大鼠足跖原發(fā)性腫脹度、繼發(fā)性腫脹度、關(guān)節(jié)炎指數(shù)、胸腺系數(shù)、脾臟系數(shù)、T細(xì)胞亞群CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平、血清腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細(xì)胞介素1β(IL-1β)水平、血液流變學(xué)等指標(biāo)為研究對象,探討治傷膠囊對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療作用及其作用機(jī)制。方法:SD大鼠,76只,隨機(jī)分為6組:正常組10只、模型組18只、陽性組、治傷膠囊大劑量組、治傷膠囊中劑量組、治傷膠囊小劑量組各

2、12只。除正常組外其余各組大鼠左足跖皮內(nèi)注射佐劑致炎,形成佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠模型,致炎前和致炎后2h、5h、8h、12h、24h、31h、48h和72h分別測量左后足踝部周徑,其中致炎30min前和致炎后8h、22h、32h、46h和56h分別給藥一次,正常組和模型組灌胃給予蒸餾水20ml/kg,陽性組給予雷公藤多苷片40mg/kg,治傷膠囊大、中、小劑量組分別給予治傷膠囊0.54 g/kg、0.27 g/kg和0.135 g/kg。然后

3、停藥至第17天觀察繼發(fā)性病變情況,記錄關(guān)節(jié)炎指數(shù),第17天(即治療第1天)開始再繼續(xù)給藥,每天1次,劑量同上;每2天按上述方法測量右后足踝部周徑及觀察大鼠繼發(fā)性病變情況。致炎后第28天全部大鼠股動脈放血致死,解剖取胸腺和脾臟稱重,計(jì)算臟器系數(shù)。取約2-3 ml全血置于肝素抗凝管中,一部分用于血液流變儀檢測血液流變學(xué)指標(biāo),另一部分用于流式細(xì)胞儀檢測T細(xì)胞亞群CD4+、CD8+水平;其余血液分離血清,采用雙抗體夾心ABC法-ELISA,行血

4、清TNF-α、IL-1β水平檢測。結(jié)果:1.原發(fā)性足跖腫脹:注射佐劑后模型組大鼠左后足跖逐漸腫脹,于造模后第12 h達(dá)到高峰,隨后腫脹度開始下降。各用藥組也呈相應(yīng)的趨勢,但腫脹度與模型組相比存在一定的差異,特別是在注射后31 h,治傷膠囊大、中、小劑量組對大鼠左后足跖的腫脹均有明顯的抑制作用(P<0.01)。2.繼發(fā)性足跖腫脹:與模型組相比,各用藥組對大鼠右后足跖的腫脹度均有不同程度的抑制作用,其中,陽性組除了在治療第10天無顯著性差異

5、外,其余腫脹度均小于模型組,有顯著性差異(P<0.05);治傷膠囊大劑量組除了治療第4天腫脹度與模型組有差異(P<0.05)外,其余時(shí)段均無差異(P>0.05);治傷膠囊中劑量組腫脹度與模型組相比有顯著性差異(P<0.05,其中治療第4、8、12天P<0.01);治傷膠囊小劑量組腫脹度在治療過程中與模型組相比,有顯著性差異(P<0.01)。3.關(guān)節(jié)炎指數(shù):與模型組相比,治傷膠囊大劑量組除了治療第4天有差異外(P<0.05),其余時(shí)段均無

6、差異(P>0.05);中劑量組除了治療第6天無差異外,其余時(shí)段的關(guān)節(jié)炎指數(shù)都明顯低于模型組(P<0.01);小劑量組在治療過程中,各時(shí)段的關(guān)節(jié)炎指數(shù)均明顯低于模型組(P<0.01)。4.脾臟系數(shù)、胸腺系數(shù):與模型組相比,陽性組和治傷膠囊大、中劑量組脾臟系數(shù)、胸腺系數(shù)明顯減小,有顯著性差異(P<0.01),治傷膠囊小劑量組也有一定程度的減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。5.血液T細(xì)胞亞群CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平:與

7、模型組相比,陽性組、治傷膠囊大、中、小劑量組CD4+水平有明顯下降(P<0.05);陽性組、治傷膠囊大劑量組CD8+水平上升，有顯著性差異(P<0.05);陽性組、治傷膠囊大、中、小劑量組CD4+/CD8+水平明顯下降(P<0.01)。6.血清TNF-α、IL-1β水平:與模型組相比,陽性組和治傷膠囊大、中、小劑量組血清TNF-α水平均明顯下降(P<0.01);陽性組和治傷膠囊大、中、小劑量組血清IL-1β水平也明顯下降(P<0.01)

8、。7.血液流變學(xué)指標(biāo):模型組大鼠全血低切、中切、高切及卡松粘度均明顯高于正常組,有顯著性差異(P<0.01);與模型組相比,治傷膠囊小劑量組全血低切、中切、高切指標(biāo)有一定程度的下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),其他用藥組均無顯著性差異(P>0.05);卡松粘度無顯著性差異(P>0.05)。與正常組相比,模型組的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和紅細(xì)胞壓積均上升，有顯著性差異(P<0.05),紅細(xì)胞聚集指數(shù)無顯著性差異(P>0.05);與模型組相比,治傷

9、膠囊小劑量組紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和紅細(xì)胞壓積有一定程度的下降,有顯著性差異(P<0.05),其余各用藥組均無顯著性差異(P>0.05)。結(jié)論:治傷膠囊對佐劑性類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎模型大鼠足跖原發(fā)性腫脹、繼發(fā)性腫脹及關(guān)節(jié)炎指數(shù)有一定的抑制作用;能降低類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎模型大鼠胸腺系數(shù)、脾臟系數(shù);能調(diào)節(jié)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎模型大鼠異常的T細(xì)胞亞群CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平;對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎模型大鼠異常升高的血清TNF-α、IL-1β水平具有顯著的降低