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文檔簡介
1、本研究采用部分腎切除(5/6切除)的方法建立了SD大鼠慢性腎衰模型,并通過檢測相關(guān)病理和生化指標(biāo)對其進(jìn)行了鑒定。免疫組化和RT-PCR結(jié)果顯示5只慢性腎衰大鼠的肝、脾、腎組織中HO-1蛋白及其腎、肝、脾、胃、肺、骨胳肌、附睪、睪丸、輸精管、前列腺、血管、大腸、心、外周血細(xì)胞中HO-1mRNA的相對表達(dá)量均顯著高于對照大鼠,而小腸中HO-1mRNA的表達(dá)無顯著差異,可見慢性腎衰大鼠大部分組織中HO-1表達(dá)均明顯增強(qiáng);同時顯示慢性腎衰大鼠的
2、腎、肝、脾、胃、骨胳肌、附睪、睪丸、輸精管、前列腺、血管、小腸、大腸、心、外周血細(xì)胞中TGF-βmRNA的相對表達(dá)量也均顯著高于對照大鼠,而肺組織中TGF-βmRNA的表達(dá)無顯著差異,提示慢性腎衰大鼠大部分組織中TGF-βmRNA表達(dá)均明顯增強(qiáng)。相關(guān)性分析顯示慢性腎衰大鼠及對照大鼠的腎、脾、胃、肺、骨胳肌、附睪、小腸、大腸、心臟組織中HO-1mRNA的相對表達(dá)量均顯著低于TGF-βmRNA的相對表達(dá)量;慢性腎衰大鼠的睪丸組織中HO-1m
3、RNA的相對表達(dá)量顯著高于TGF-βmRNA的相對表達(dá)量,而對照大鼠的睪丸組織中HO-1mRNA的相對表達(dá)量與TGF-βmRNA的相對表達(dá)量無顯著差異;慢性腎衰及對照大鼠的輸精管組織中HO-1mRNA的相對表達(dá)量均顯著高于TGF-βmRNA的相對表達(dá)量;慢性。腎衰大鼠前列腺組織中HO-1mRNA的相對表達(dá)量顯著高于TGF-βmRNA的相對表達(dá)量,而對照大鼠前列腺組織中HO-1mRNA的相對表達(dá)量顯著低于TGF-βmRNA的相對表達(dá)量;慢
4、性腎衰大鼠肝臟、外周血細(xì)胞中HO-1mRNA與TGF-βmRNA的相對表達(dá)量無顯著差異,而對照大鼠外周血細(xì)胞中HO-1mRNA的相對表達(dá)量顯著高于 TGF-βmRNA的相對表達(dá)量,對照大鼠肝臟中HO-1mRNA的相對表達(dá)量顯著低于 TGF-βmRNA的相對表達(dá)量;慢性腎衰大鼠血管組織中HO-1mRNA的相對表達(dá)量顯著低于TGF-βmRNA的相對表達(dá)量,而對照大鼠血管組織中HO-1mRNA與TGF-βmRNA的相對表達(dá)量無顯著差異.
5、 本研究結(jié)果提示慢性腎衰大鼠部分組織中HO-1mRNA與 TGF-βmRNA表達(dá)的相關(guān)性發(fā)生改變,腎、脾、胃、肺、骨骼肌、附睪、小腸、大腸、心臟、輸精管組織中HollmRNA與 TGF-βmRNA的相對表達(dá)量的改變在大鼠的腎衰前后一致,前列腺組織中HO-1mRNA與 TGF-βmRNA的相對表達(dá)量的改變在大鼠的腎衰前后相反。盡管腎衰前大鼠的睪丸、血管組織中HO-1mRNA與TGF-βmRNA的相對表達(dá)量無顯著差異,但腎衰后其表達(dá)發(fā)生了
6、改變:相反盡管腎衰后大鼠的肝、外周血細(xì)胞組織中HO-1mRNA與 TGF-βmRNA的相對表達(dá)量呈顯著差異,但腎衰前其表達(dá)是無差異的。推測在大鼠的慢性腎衰過程中,HO-1與 TGF-β可能在一定的條件下產(chǎn)生某種的相互作用。AKR1C2是一種腫瘤相關(guān)基因,其與前列腺癌、肝癌等多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān).本研究利用RT-PCR方法顯示了30例腎癌組織中 AKR1C2 mRNA均為上調(diào)表達(dá),其中6例癌旁組織中未見AKR1C2mRNA的表達(dá),提示人
7、類腎癌組織中AKR1C2在轉(zhuǎn)錄水平上高表達(dá)。同時免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示,30例腎癌組織中AKR1C2蛋白均為上調(diào)表達(dá),其中13例癌旁組織中未見AKR1C2蛋白的表達(dá),提示人類腎癌組織中AKR1C2在翻譯水平上高表達(dá)。相關(guān)性分析顯示AKR1C2基因的LI和EI因患者Robson分期、腫瘤分化、腫瘤轉(zhuǎn)移、腫瘤類型等不同而呈顯著的差異。提示人類腎癌組織中AKR1C2在轉(zhuǎn)錄與翻譯水平上均呈過表達(dá),可能有助于腎癌的發(fā)生發(fā)展。 本研究又將pc
8、DNA3.1/AKR<,1>C<,2>及pcDNA3.1空質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染786-0腎癌細(xì)胞,經(jīng)抗生素G418篩選4周后構(gòu)建了過表達(dá)AKR1C2的786-0穩(wěn)定細(xì)胞系.生長曲線分析結(jié)果顯示AKR1C2對786-0細(xì)胞體外生長產(chǎn)生一定的影響,即與轉(zhuǎn)染pcDNA3.1的786-0細(xì)胞系相比,轉(zhuǎn)染pcDNA3.1/AKR<,1>C<,2>的786-0細(xì)胞系的生長速度顯著加快,提示過表達(dá)AKR1C2能促進(jìn)786-0細(xì)胞體外增殖;軟瓊脂集落形成試驗顯
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