甲狀腺多結(jié)節(jié)性增生的克隆性檢測及其與病理參數(shù)的相關(guān)性分析.pdf

1、結(jié)節(jié)性甲狀腺腫(Nodular goiter，NG)與甲狀腺腺瘤(thyroid adenoma，TA)均系臨床常見的甲狀腺疾病，兩者的發(fā)病原因、病理變化及治療原則各不相同。術(shù)前對兩者明確診斷非常重要。但是臨床病理中有時甲狀腺結(jié)節(jié)性增生與腺瘤的鑒別診斷困難，尤其是甲狀腺結(jié)節(jié)性增生與多發(fā)性腺瘤樣結(jié)節(jié)的鑒別，以及甲狀腺結(jié)節(jié)性增生背景上的腺瘤樣增生在國內(nèi)外均未見到克隆起源上的明確分類及分型，是臨床病理診斷中的一個難點。 本課題擬采用激

2、光捕獲顯微切割技術(shù)，及基于女性X染色體的基因長度多態(tài)性分析技術(shù)，針對甲狀腺多結(jié)節(jié)性增生包括結(jié)節(jié)性甲狀腺腫，甲狀腺多發(fā)性腺瘤，以及甲狀腺結(jié)節(jié)性增生背景上的腺瘤樣結(jié)節(jié)，檢測多發(fā)結(jié)節(jié)的克隆組成，同時結(jié)合病理檢測參數(shù)為臨床的鑒別診斷提供依據(jù)。 第一部分克隆性分析檢測甲狀腺多結(jié)節(jié)性增生的克隆性 目的：分析甲狀腺腺瘤、甲狀腺結(jié)節(jié)性增生、甲狀腺多發(fā)性腺瘤樣結(jié)節(jié)和甲狀腺結(jié)節(jié)性增生背景上的腺瘤樣增生結(jié)節(jié)的克隆起源。 方法：搜集華山

3、醫(yī)院2005-2006年女性甲狀腺結(jié)節(jié)性增生組織5例，甲狀腺腺瘤5例，甲狀腺多發(fā)性腺瘤樣結(jié)節(jié)12例，甲狀腺結(jié)節(jié)性增生背景上的腺瘤樣增生結(jié)節(jié)15例。激光捕獲顯微切割技術(shù)精確分離病變組織，抽提基因組DNA，限制性內(nèi)切酶Hpa Ⅱ消化后巢氏PCR擴增人雄激素受體基因(HUMARA)，PCR產(chǎn)物經(jīng)變性聚丙烯酰胺凝膠電泳，銀染分析組織是否為腫瘤性增生。 結(jié)果：HUMARA基因雜合率為86.5％(32/37)。5例單純結(jié)節(jié)性增生為多克隆。5

4、例單發(fā)的包膜完整的腺瘤中1例為HUMARA基因純合子，其余4例為單克隆。12例多發(fā)性腺瘤樣結(jié)節(jié)中2例為HUMARA純合子，4例多發(fā)腺瘤樣結(jié)節(jié)中有多克隆性結(jié)節(jié)(1/3，1/3，1/2，2/2)，其余6例多枚結(jié)節(jié)(其中最多的1例有4枚結(jié)節(jié))均為單克隆。15例甲狀腺結(jié)節(jié)性增生背景上的腺瘤樣增生結(jié)節(jié)中2例為HUMARA純合子，另13例結(jié)節(jié)性增生背景均為多克隆，其中8例腺瘤樣增生結(jié)節(jié)為多克隆，另5例為單克隆。 結(jié)論：女性X染色體失活，HU

5、MARA基因克隆性分析能夠為甲狀腺結(jié)節(jié)性增生和腺瘤的鑒別提供可靠的依據(jù)，組織標本經(jīng)激光捕獲顯微切割技術(shù)精確分離甲狀腺結(jié)節(jié)濾泡上皮組織，為后續(xù)試驗的準確可信提供保證。本研究證實存在多發(fā)性甲狀腺腺瘤以及結(jié)節(jié)性增生與腺瘤并發(fā)的情況。 第二部分甲狀腺多結(jié)節(jié)性增生的克隆性與病理形態(tài)學(xué)參數(shù) 目的：探討甲狀腺腺瘤、結(jié)節(jié)性甲狀腺腫、甲狀腺多發(fā)性腺瘤樣結(jié)節(jié)和甲狀腺結(jié)節(jié)性增生背景上的腺瘤樣增生結(jié)節(jié)的克隆起源與病理組織學(xué)參數(shù)的關(guān)系，為甲狀腺多

6、結(jié)節(jié)性增生的臨床病理診斷提供依據(jù)。 方法：外檢測量結(jié)節(jié)個數(shù)、結(jié)節(jié)最大直徑，多發(fā)結(jié)節(jié)計算所有結(jié)節(jié)直徑的平均值。觀察包膜完整性。標本經(jīng)10％福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋，蘇術(shù)素-伊紅染色，通過所有切片觀察、評估病變包膜的完整程度、包膜的厚度、結(jié)節(jié)內(nèi)濾泡均一度及濾泡細胞數(shù)量。利用目鏡刻度測量包膜最厚和最薄區(qū)域的厚度，并計算平均值。應(yīng)用統(tǒng)計軟件SPSS11.5分析各病理組織學(xué)參數(shù)與結(jié)節(jié)克隆性檢測結(jié)果的相關(guān)性。 結(jié)果：37例標本，其

7、中5例為HUMARA純合子，未計入統(tǒng)計學(xué)相關(guān)性分析中。年齡20～67歲，平均為43.9歲。甲狀腺結(jié)節(jié)共84枚，其中結(jié)節(jié)性增生22枚(26.2％)，單發(fā)腺瘤5枚(5.9％)，多發(fā)性腺瘤結(jié)節(jié)31枚(36.9％)，結(jié)節(jié)性增生背景上的腺瘤樣增生結(jié)節(jié)26枚(31.0％)。所有結(jié)節(jié)直徑平均2.65±1.04cm，各組間結(jié)節(jié)直徑無顯著性差異(P>0.05)?；颊吣挲g、結(jié)節(jié)個數(shù)、直徑與HUMARA克隆性分析無統(tǒng)計學(xué)相關(guān)性。結(jié)節(jié)包膜程度和厚度、結(jié)節(jié)內(nèi)濾泡

8、均一度及細胞構(gòu)成與HUMARA克隆性分析存在統(tǒng)計學(xué)相關(guān)性，特別是結(jié)節(jié)包膜程度對組織克隆性有較強的指示作用。 結(jié)論：通過組織病理學(xué)參數(shù)與結(jié)節(jié)克隆性分析結(jié)果的相關(guān)性分析提示：增生結(jié)節(jié)的包膜完整性、結(jié)節(jié)內(nèi)細胞數(shù)量、濾泡一致性及包膜厚度與結(jié)節(jié)的克隆性有統(tǒng)計學(xué)相關(guān)性，而包膜完整性對甲狀腺結(jié)節(jié)的診斷具有指導(dǎo)意義。 結(jié)論 1．甲狀腺結(jié)節(jié)性增生和甲狀腺腺瘤均為臨床常見的甲狀腺良性疾病，在臨床病理診斷中要注意多發(fā)性甲狀腺腺瘤的存在