不同氣腹介質(zhì)及作用時(shí)間對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥大鼠模型異位灶影響的分子機(jī)制研究.pdf

1、子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis，EMs)是臨床婦科常見病之一，臨床主要表現(xiàn)為痛經(jīng)、慢性盆腔痛、性交痛以及不孕，其發(fā)病機(jī)制目前仍未明確。研究表明粘附(Adhesion)、侵襲(Aggression)和血管生成(Angiogenesis)在EMs的發(fā)生發(fā)展中占有重要地位。本課題立足于探討腹腔鏡對(duì)內(nèi)異癥病灶組織的影響，觀察不同氣腹介質(zhì)、氣腹不同作用時(shí)間對(duì)大鼠子宮內(nèi)膜異位癥病灶組織粘附(CD44v6、CD44、ICAM-1)、侵襲(

2、MMP-2、TIMP-2)及血管生成(VEGF-A、ENS)的相關(guān)細(xì)胞和分子機(jī)制研究。
　　 第一部分、子宮內(nèi)膜異位癥大鼠模型的構(gòu)建
　　 目的：評(píng)價(jià)兩種子宮內(nèi)膜異位癥大鼠模型的建立及用于子宮內(nèi)膜異位癥相關(guān)研究的可行性。
　　 方法：雌性Wistar大鼠及雌性SD大鼠各10只，隨機(jī)分組后，用苯甲酸雌二醇0.1ml/kg肌注使動(dòng)物統(tǒng)一處于動(dòng)情期，取自體子宮內(nèi)膜縫合于兩側(cè)腹膜。未行造模術(shù)大鼠為對(duì)照組。4w后觀察兩種系

3、大鼠造模組異位灶組織的粘附、侵襲和血管生成相關(guān)指標(biāo)的變化。
　　 結(jié)果：兩種系大鼠腹膜上均有異位病灶長成，Wistar大鼠模型異位灶組織中CD44v6和ICAM-1的相對(duì)表達(dá)量的均值為3.32±0.18、4.44±0.11，MMP-2、VEGF-A相對(duì)表達(dá)量的均值為2.61±0.11、5.58±0.14，分別為對(duì)照組(1.00±0.04、1.00±0.02，1.00±0.07，1.00±0.04)的3.32倍、4.44倍、2.6

4、1倍、5.58倍(P＜0.05)；TIMP-2、ENS的相對(duì)表達(dá)量均值分別為0.44±0.07、0.62±0.03，分別為對(duì)照組(1.00±0.03、1.00±0.03)的0.44倍和0.62倍(P＜0.05)。SD大鼠模型異位灶組織中上述指標(biāo)的變化趨勢(shì)與Wistar大鼠模型相同。
　　 結(jié)論：兩種不同屬種的大鼠子宮內(nèi)膜異位癥模型均可用于子宮內(nèi)膜異位癥的相關(guān)研究中。
　　 第二部分、不同氣腹介質(zhì)、不同作用時(shí)間對(duì)子宮內(nèi)膜異

5、位癥大鼠模型異位病灶侵襲、粘附和血管生成方面的影響
　　 目的：評(píng)估不同氣腹介質(zhì)以及不同氣腹作用時(shí)間對(duì)大鼠子宮內(nèi)膜異位灶及血清中和粘附、侵襲及血管生成相關(guān)因子的影響。
　　 方法：成模大鼠隨機(jī)分組，分別給予CO2氣腹作用30min及1h組、N2氣腹作用1h，無氣腹干預(yù)為對(duì)照組，分別于氣腹干預(yù)后1w、2w、4w檢測(cè)子宮內(nèi)膜異位灶組織和血清中與粘附、侵襲和血管生成相關(guān)因子(同第一部分)的相對(duì)表達(dá)量和濃度。結(jié)果：CO2氣腹作用

6、1h術(shù)后1w，異位灶組織中CD44v6、ICAM-1的相對(duì)表達(dá)量均值分別為0.52±0.11、0.35±0.16，MMP-2、VEGF-A的相對(duì)表達(dá)量均值分別為0.67±0.18、0.52±0.10，為對(duì)照組(1.00±0.02、1.00±0.03、1.00±0.03、1.00±0.03)的0.52倍、0.35倍、0.67倍、0.52倍(P＜0.05)，較CO2氣腹作用30min組(0.79±0.13、0.79±0.08、0.67±0.

7、18、0.75±0.21)低(P＜0.05)；TIMP-2、ENS的相對(duì)表達(dá)量均值分別為1.60±0.10、1.80±0.12，為對(duì)照組(1.00±0.03、1.00±0.04)的1.6倍和1.8倍，較CO2氣腹作用30min組(1.34±0.05、1.75±0.08)高(P＜0.05)。干預(yù)后2w、4w異位灶組織中相關(guān)指標(biāo)基本回復(fù)至對(duì)照組水平。N2氣腹作用1h術(shù)后1w，異位灶組織中CD44v6、ICAM-1、MMP-2、VEGF-A的

8、相對(duì)表達(dá)量均值分別為0.52±0.10、0.50±0.13、0.67±0.20、0.59±0.19，分別為對(duì)照組的0.52倍、0.50倍、0.67倍、0.59倍(P＜0.05)，TIMP-2、ENS的相對(duì)表達(dá)量均值分別為1.57±0.04、1.74±0.04，為對(duì)照組的1.57倍和1.74倍。干預(yù)后2w、4w異位灶組織中相關(guān)指標(biāo)基本回復(fù)至對(duì)照組水平。
　　 結(jié)論：1、CO2氣腹和N2氣腹介質(zhì)對(duì)于異位病灶的粘附、侵襲和血管生成方面

9、均有抑制作用，且二者產(chǎn)生的抑制作用無明顯差異；2、CO2氣腹時(shí)間越長對(duì)各細(xì)胞因子抑制作用越強(qiáng)；3、氣腹干預(yù)2周后各指標(biāo)逐漸回復(fù)至正常水平，4w時(shí)各指標(biāo)接近正常水平。
　　 第三部分、C02氣腹作用于造模不同階段對(duì)成模后異位灶組織粘附、侵襲、血管生成細(xì)胞因子表達(dá)的影響
　　 目的：探討CO2氣腹對(duì)盆腹腔內(nèi)正在形成的早期子宮內(nèi)膜異位癥病灶的影響。
　　 方法：予大鼠行造模術(shù)，術(shù)后隨機(jī)分組，根據(jù)氣腹干預(yù)時(shí)間設(shè)術(shù)后立即(

10、0w)干預(yù)組、術(shù)后1w干預(yù)組、術(shù)后2w干預(yù)組，未予氣腹干預(yù)為對(duì)照組。術(shù)后4w后觀察不同處理組與對(duì)照組的異位灶組織中各指標(biāo)變化。
　　 結(jié)果：術(shù)后立即干預(yù)組CD44v6、ICAM-1、MMP-2、VEGF-A的相對(duì)表達(dá)量均值分別為2.71±0.52、1.25±0.22、1.61±0.82、2.15±0.92，較對(duì)照組(10.03±1.33、4.79±1.26、12.50±6.27、8.82±3.47)顯著降低(P＜0.05)，TI

11、MP-2、ENS的相對(duì)表達(dá)量均值分別為0.62.±0.20、0.88.±0.41，較對(duì)照組(0.16±0.07、0.38±0.09)顯著升高(P＜0.05)。術(shù)后1w干預(yù)組和術(shù)后2w干預(yù)組異位灶組織中相關(guān)指標(biāo)與對(duì)照組相比具有同樣的趨勢(shì)。
　　 結(jié)論：CO2氣腹對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥形成早期的不同階段的異位病灶均產(chǎn)生抑制粘附、侵襲和血管生成的作用。
　　 全文結(jié)論：
　　 1、兩種不同屬種的大鼠子宮內(nèi)膜異位癥模型均可用于