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文檔簡介
1、實(shí)驗(yàn)一
目的:檢測核因子-κB(nuclear factor κB,NF-κB)在分泌性中耳炎(secretoryotitis media,SOM)動物模型鼓室黏膜中的表達(dá),探討NF-κB活化在SOM發(fā)病機(jī)制中的作用。
方法:應(yīng)用滅活肺炎鏈球菌,注入豚鼠中耳腔,制作SOM動物模型,采用免疫組化的方法檢測:致病鼠鼓室黏膜上皮在注入細(xì)菌6h、1d、3d、7d及14d中NF-κBp65,TNF-α和IL-1β的表
2、達(dá)及關(guān)系。
結(jié)果:SOM動物模型的鼓室黏膜上皮中NF-κBp65在術(shù)后六小時就有表達(dá),24小時表達(dá)最強(qiáng),隨后表達(dá)明顯下降,TNF-α和IL-1β的表達(dá)也出現(xiàn)相應(yīng)波動。
結(jié)論:滅活肺炎鏈球菌致SOM的早期,NF-κB即被激活,在鼓室黏膜中出現(xiàn)過度表達(dá),并與SOM發(fā)病中的重要致炎因子TNF-α和IL-1β的產(chǎn)生相關(guān),提示NF-κB與SOM發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)。
實(shí)驗(yàn)二
目的:探討NF-κ
3、B在分泌性中耳炎(secretory otitis media,SOM)發(fā)病機(jī)制中的作用,為臨床探尋以NF-κB為靶點(diǎn)的治療SOM 提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:將76 只豚鼠隨機(jī)分三組:對照組(10 只),SOM組(22 只)和吡咯醛二硫氨基甲酸(pyrrolidinedithiocarbamat,PDTC)組(44 只)。對照組:右耳注入0.9[%]生理鹽水0.1ml,分別于0h,6h,1d,3d,5d 各處死2 只。SOM組
4、:動物模型經(jīng)右鼓室內(nèi)注入滅活肺炎鏈球菌完成造模。PDTC組:右鼓室注入細(xì)菌后6h分別給予PDTC50mg/kg (PDTC1組)和200mg/kg(PDTC2組)腹腔注射。SOM組、PDTC組按注入細(xì)菌后不同時點(diǎn)0h,6h,1d,3d,5d分別處死五只。通過免疫組化的方法檢測鼓室黏膜NF-κB,TNF-α和IL-1β的表達(dá),并行組織學(xué)觀察。
結(jié)果:SOM組:NF-κBP65,TNF-α,IL-1β在6h 就有表達(dá),三者均于
5、24h 表達(dá)最強(qiáng)。3-5d 鼓室粘膜明顯增厚,大量炎性細(xì)胞浸潤。PDTC1組:各時間段與SOM組表達(dá)相似,僅于1dNF-κBP65 表達(dá)較低,兩者差異(P<0.05)有顯著性。PDTC2組NF-κBP65,TNF-α,IL-1β在6h 表達(dá)與SOM組表達(dá)相似,1d,3d,5d 有表達(dá),但均低于SOM組(P<0.01)。3d-5d 鼓室粘膜厚度明顯低于SOM組(P<0.01),兩組之間的差異具有非常顯著性的意義。
結(jié)論:(1
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