高產(chǎn)大豆異黃酮β-葡萄糖苷酶菌株的發(fā)酵工藝研究.pdf

1、從sp.R、sp.S、sp.39、sp.42、sp.00、sp.48、sp.848和sp.90八株霉菌中，選出了4種具有較高Genistin酶活力的菌株，它們分別是sp.R、sp.42、sp.00和sp.48，利用液體發(fā)酵的方法比較這四種霉菌的產(chǎn)酶活性，發(fā)現(xiàn)sp.R菌株產(chǎn)酶活力最高。sp.R菌株產(chǎn)Genistin水解酶的最佳發(fā)酵條件為：2.5﹪的麥麩為碳源，0.5﹪的硝酸鈉為無機(jī)氮源，0.5﹪的蛋白胨為有機(jī)氮源，培養(yǎng)基起始p117.0，

2、瓶裝體積為40mL/250mL，按種量10﹪，培養(yǎng)溫度30℃，搖瓶轉(zhuǎn)數(shù)160rpm，培養(yǎng)時(shí)間84h。在此發(fā)酵條件下，sp.R菌株產(chǎn)酶活力為82U/mL。 對大豆異黃酮的生理活性進(jìn)行了研究。通過鄰苯三酚自氧化法和比色法測定Fenton反應(yīng)產(chǎn)生的羥自由基的方法，對大豆異黃酮的抗氧化活性進(jìn)行了比較研究。通過MTT比色法，對大豆異黃酮的抗腫瘤能力進(jìn)行了研究。利用轉(zhuǎn)基因酵母法對大豆異黃酮的雌激素活性進(jìn)行了研究。結(jié)果表明：酶解甙元，糖甙型大

3、豆異黃酮對超氧自由基的清除率達(dá)到50﹪時(shí)所需要的用量即IC50分別為0.14mg/mL，0.32mg/mL，對羥基自由基的清除率達(dá)到50﹪時(shí)所需要的用量即IC50分別為0.57mg/mL，0.63mg/mL。大豆異黃酮酶解甙元對大鼠肝癌7919細(xì)胞生長抑制率達(dá)到50﹪時(shí)所需要的用量即IC50為7.55mg/L，糖甙型大豆異黃酮對大鼠肝癌7919細(xì)胞生長抑制率達(dá)到50﹪時(shí)所需要的用量即IC50為10.35mg/L。大豆異黃酮酶解甙元的雌激