對(duì)急性梗阻性胰腺炎大鼠胰腺細(xì)胞凋亡機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:觀察急性梗阻性胰腺炎(acute obstructive pancreatitis,AOP)大鼠胰腺細(xì)胞凋亡的發(fā)生規(guī)律及其內(nèi)分泌的變化以及大鼠在烏司他丁、善寧干預(yù)后,大鼠胰腺細(xì)胞凋亡的發(fā)生規(guī)律及其內(nèi)分泌的變化。
　　方法:1.采用膽胰管結(jié)扎方法建立AOP大鼠模型梗阻8小時(shí)8只,梗阻12小時(shí)4只,待8~12小時(shí)后松開(kāi)活結(jié),使梗阻膽管暢通,對(duì)照組10只麻醉后開(kāi)腹,翻動(dòng)胃和十二指腸后關(guān)腹。麻醉蘇醒后自由飲水進(jìn)食后觀察72小時(shí),取血

2、檢測(cè)胰島素和胰高血糖素以及血清淀粉酶的水平;取胰腺組織,采用TUNEL法與Real-Time-PCR Bax檢測(cè)胰腺細(xì)胞凋亡情況。2.烏司他丁、善寧聯(lián)合用藥對(duì)急性梗阻性胰腺炎大鼠胰腺細(xì)胞凋亡干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究,將采用膽胰管結(jié)扎方法建立AOP大鼠模型分為①烏司他丁預(yù)處理組②善寧預(yù)處理組③烏司他丁+善寧聯(lián)合預(yù)處理組④梗阻性胰腺炎對(duì)照組,建立大鼠模型24小時(shí)后,取血檢測(cè)胰島素和胰高血糖素以及血清淀粉酶的水平;取胰腺組織,采用TUNEL法與Real

3、-Time-PCRBax檢測(cè)胰腺細(xì)胞凋亡情況。
　　結(jié)果:1.采用膽胰管結(jié)扎方法建立AOP大鼠模型,AOP大鼠在8h、12h時(shí)點(diǎn)的血清淀粉酶為(1198±687)U/l與(1698±1103)U/l、胰島素(8.1±5.8)ng/ml與(12.7±6.9)ng/ml和胰高血糖素水平(6.8±4.6)ng/ml與(7.3±2.9)ng/ml;顯著高于假手術(shù)對(duì)照組的(404±222)U/l(5.6±2.7)ng/ml和(2.6±2.1

4、)ng/ml(P<0.05),胰腺組織在外分泌部分腺泡細(xì)胞與內(nèi)分泌部分胰島細(xì)胞均發(fā)生凋亡,8h、12h的細(xì)胞凋亡率分別為(20.5±11.2)％與(15.5±8.9)%,顯著高于假手術(shù)對(duì)照組的(4.2±1.6)%(P<0.05)。2.烏司他丁、善寧聯(lián)合用藥對(duì)急性梗阻性胰腺炎大鼠胰腺細(xì)胞凋亡干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究,在烏司他丁、善寧干預(yù)后,大鼠烏司他丁預(yù)處理組、善寧預(yù)處理組、烏司他丁+善寧聯(lián)合預(yù)處理組的各種檢測(cè)指標(biāo)分別為:血淀粉酶(681.8±98

5、.2)U/l,(806.4±129.1)U/l,(613.5±201.6)U/l;胰島素(6.8±1.1)ng/ml,(7.2±2.1)ng/ml,(6.6±1.2)ng/ml;胰高血糖素(4.8±1.3)U/l,(5.0±1.5)U/l,(4.6±1.6)U/l,均低于梗阻性胰腺炎對(duì)照組(血淀粉酶979.6±216.2U/l,胰島素8.6±1.8ng/ml,胰高血糖素7.6±1.2U/l),而血淀粉酶,胰高血糖素的改變有顯著的意義(P

6、<0.05)。烏司他丁預(yù)處理組、善寧預(yù)處理組、烏司他丁+善寧聯(lián)合預(yù)處理組Real-Time-PCRBax(1.8±0.3)(2.1±0.6)(1.9±0.6)顯著低于梗阻性胰腺炎對(duì)照組(3.4±0.8)(P<0.05);采用TUNEL法檢測(cè)烏司他丁預(yù)處理組、善寧預(yù)處理組、烏司他丁+善寧聯(lián)合預(yù)處理組胰腺組織在外分泌部分腺泡細(xì)胞與內(nèi)分泌部分胰島細(xì)胞的凋亡程度(±,±,±~-)顯著低于梗阻性胰腺炎對(duì)照組(+~++)(P<0.05)。
　

7、　結(jié)論:1.急性梗阻性胰腺炎胰腺炎模型組8小時(shí)與、12小時(shí)時(shí)點(diǎn)的細(xì)胞凋亡率顯著高于假手術(shù)對(duì)照組,各組大鼠血淀粉酶、胰島素和胰高血糖素檢測(cè)在8小時(shí)、12小時(shí)時(shí)點(diǎn),分別顯著高于假手術(shù)對(duì)照組。2.烏司他丁、善寧聯(lián)合用藥對(duì)急性梗阻性胰腺炎大鼠胰腺細(xì)胞凋亡干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究善寧可降低胰高血糖素,而烏司他丁與善寧聯(lián)合組可降低血清血淀粉酶與胰高血糖素。3.烏司他丁與善寧均可降低凋亡相關(guān)基因Caspase-3的表達(dá)水平,并緩解胰腺內(nèi)分泌與外分泌的凋亡程度,