人羊膜及其聯(lián)合rHEGF凝膠治療皮膚Ⅲ度燒傷的實驗研究.pdf

1、目的:探討人羊膜(human amniotic membrane，HAM)及其聯(lián)合重組人表皮生長因子凝膠(recombinant human epidermal growth factor，rhEGF)治療皮膚Ⅲ度燒傷的療效與作用機制。方法:銅棒燙傷制備兔皮膚Ⅲ度燒傷，切痂后左側(cè)創(chuàng)面分別貼敷新鮮羊膜、貼敷羊膜聯(lián)合涂抹rhEGF凝膠、涂抹rhEGF凝膠，觀測燒傷創(chuàng)面愈合率和創(chuàng)面痊愈時間，并行創(chuàng)面組織病理學檢查，免疫組化染色與圖像分析微小血

2、管密度，雙色免疫熒光染色觀察人源細胞定植，Masson染色與圖像分析檢測皮膚組織纖維化程度，ELISA法檢測創(chuàng)面組織細胞因子含量。結(jié)果:①第3d、8d和第18d，羊膜組燒傷創(chuàng)面愈合率分別為（35.78±6.75）％、(71.21±6.63)％和（96.65±1.42）％，羊膜聯(lián)合rhEGF凝膠組與羊膜組愈合率相當，rhEGF凝膠組則為（23.75±3.57）％、（63.33±4.18）％和（92.79±1.80）％，前2組愈合率高于rh

3、EGF凝膠組，3組不同處理方案創(chuàng)面愈合率明顯高于對照組（P＜0.05或P＜0.01）。羊膜組、羊膜聯(lián)合rhEGF凝膠組創(chuàng)面分別于18.40±1.26d和18.00±1.83d達痊愈，rhEGF凝膠組20.20±1.69d痊愈，3組痊愈所需時間均顯著低于對照組22.13±1.25d(P＜0.05)，羊膜組、羊膜聯(lián)合rhEGF凝膠組創(chuàng)面痊愈時間較對照組顯著縮短（P＜0.05）。②HE染色病理學檢查，發(fā)現(xiàn)羊膜組、羊膜聯(lián)合rhEGF組創(chuàng)面炎癥反

4、應(yīng)減輕，更早的進入細胞增殖與創(chuàng)面修復，再生皮膚組織結(jié)構(gòu)完整、附屬器官豐富清晰。羊膜、羊膜聯(lián)合rhEGF組，真皮層纖維化比率（8.80±1.65）％、（8.50±1.70）％低于正常皮膚（11.51±2.89）％和對照組及rhEGF組(P＜0.05或P＜0.01);羊膜及羊膜聯(lián)合rhEGF組皮下組織層纖維化比例（16.48±1.86）％、（16.02±2.56）％高于正常組，但明顯低于對照組及rhEGF組（26.74±3.49％）、（26

5、.70±3.27）％(P＜0.01)。③第8d，羊膜組與羊膜聯(lián)合rhEGF組創(chuàng)面組織中，未檢測到表達人細胞核特異性抗原陽性的紅色熒光細胞。且新生組織微細血管數(shù)，羊膜組（19.56±6.00）及羊膜聯(lián)合rhEGF組（19.42±5.05）顯著高于對照組（7.38±1.80）和rhEGF組（8.08±1.34）(P＜0.01)，rhEGF組與對照組織微細血管數(shù)無明顯差異。④第3d，羊膜組、羊膜聯(lián)合rhEGF凝膠組、rhEGF凝膠組SDF-1

6、表達量分別為192.63±17.39 ng/L、157.76±8.69 ng/L和199.21±27.77ng/L，顯著高于對照組（146.97±9.40 ng/L，P＜0.05）和正常皮膚組織含量，羊膜組、羊膜聯(lián)合rhEGF凝膠組又顯著高于rhEGF凝膠組（P＜0.05）;第8、18d已趨于正常皮膚組織水平。⑤第8d，羊膜組、羊膜聯(lián)合rhEGF凝膠、rhEGF凝膠組新生組織TGF-β含量分別為3441.50±125.27、3071.2

7、5±221.04和3504.00±134.41，顯著高于對照組（2912.50±181.68，P＜0.05），羊膜組、羊膜聯(lián)合rhEGF凝膠組TGF-β含量則明顯高于rhEGF凝膠組（P＜0.05）。⑥第8d，羊膜組、羊膜聯(lián)合rhEGF凝膠組新生組織EGF含量明顯高于rhEGF凝膠組(200.73±7.27)和對照組（198.39±8.52）(P＜0.05);第18d，羊膜組、羊膜聯(lián)合rhEGF凝膠組和rhEGF凝膠組新生組織EGF含量

8、則顯著低于對照組(P＜0.05)。⑦第8、18d，羊膜、羊膜聯(lián)合rhEGF凝膠組和rhEGF組新生組織bFGF含量高于正常皮膚含量，但3組間無明顯差異（P＞0.05）。結(jié)論:羊膜及其聯(lián)合rhEGF凝膠治療皮膚Ⅲ度燒傷，明顯提高愈合率，縮短痊愈時間，改善創(chuàng)面組織病理學改變，其作用機制涉及抑制炎癥反應(yīng)，促進新生血管形成，提高創(chuàng)面組織SDF-1、TGF-β和EGF水平，羊膜治療Ⅲ度燒傷的療效及其更接近完美愈合的作用優(yōu)于傳統(tǒng)的凡紗覆蓋包扎與rh