TM4SF3在不同時(shí)期子宮內(nèi)膜表達(dá)的研究.pdf

1、背景：自1978年首次開展體外受精-胚胎移植(IVF-ET)技術(shù)以來(lái),人類輔助生殖技術(shù)(ART)得到飛速發(fā)展,1980年促排卵藥物的使用更增加了排卵率,但胚胎種植率仍處于較低水平,波動(dòng)于25％-35％之間,其中一個(gè)重要因素即促排周期子宮內(nèi)膜容受性(uterine receptivity)降低,這已成為影響ART成敗的主要問題之一。眾所周知,胚胎通過對(duì)子宮內(nèi)膜上皮的定位和黏附,穿透上皮基底層的連接細(xì)胞并侵入內(nèi)膜基質(zhì)等一系列生理過程最終植入

2、子宮內(nèi)膜,而成功的胚胎植入取決于優(yōu)質(zhì)的胚胎和良好的子宮內(nèi)膜容受性的同步發(fā)育。有資料表明因子官內(nèi)膜容受性問題導(dǎo)致胚胎種植失敗占所有胚胎種植失敗的三分之二,而胚胎質(zhì)量問題僅占三分之一。在每個(gè)有排卵的月經(jīng)周期中子宮內(nèi)膜只有在極短的時(shí)間內(nèi)才允許胚胎植入,這段時(shí)間稱為“種植窗期”,此時(shí)子宮內(nèi)膜形態(tài)組織結(jié)構(gòu)和分泌蛋白都發(fā)生一系列變化,使子宮內(nèi)膜的容受性達(dá)到最大,以利于胚胎著床,普遍認(rèn)為在排卵后6—8天出現(xiàn),并持續(xù)4天左右,即正常月經(jīng)周期的第20-2

3、4天。這是一個(gè)復(fù)雜而又精確的生理過程,子宮內(nèi)膜通過內(nèi)分泌、旁分泌及自分泌的調(diào)節(jié),產(chǎn)生多種粘附分子、細(xì)胞因子,并對(duì)胚胎植入進(jìn)行調(diào)控,已有大量文獻(xiàn)表明整合素αvβ3、選擇素L、鈣黏蛋白E、免疫球蛋白ICAM-1等粘附分子,血小板抑制因子、白介素-1、白介素-6等細(xì)胞因子以及胎盤蛋白14、前列環(huán)素、催乳素等在月經(jīng)周期呈周期性表達(dá),其高水平表達(dá)出現(xiàn)時(shí)間與子宮內(nèi)膜的種植窗期開放同步。四次跨膜超家族成員-3(transmembrane4 super

4、family-3,TM4SF3)在結(jié)直腸癌、胰腺癌、肝癌及食管癌等腫瘤中存在較高的表達(dá),并能通過促血管再生作用促進(jìn)相關(guān)腫瘤的進(jìn)展。胚胎發(fā)育與腫瘤形成之間存在著諸多的相似之處,尤其是滋養(yǎng)層細(xì)胞侵入子宮內(nèi)膜的過程與腫瘤細(xì)胞的侵襲現(xiàn)象十分類似,均涉及廣泛的細(xì)胞外基質(zhì)的降解與重塑。Horcajadas通過基因芯片對(duì)不同階段子宮內(nèi)膜種植窗時(shí)期的各種基因表達(dá)進(jìn)行篩查,發(fā)現(xiàn)TM4SF3在自然周期胚胎種植窗時(shí)期(LH+7)存在表達(dá),其表達(dá)在置入官內(nèi)節(jié)育

5、器后明顯降低,同時(shí)在宮內(nèi)節(jié)育器取出后兩個(gè)月及1年的時(shí)間仍未恢復(fù)正常水平,提示TM4SF3與子宮內(nèi)膜容受性之間可能存在一定關(guān)系。
　　 目的：檢測(cè)四次跨膜超家族成員TM4SF3在不同周期組的子宮內(nèi)膜表達(dá)定位及表達(dá)強(qiáng)弱差異,并與子宮內(nèi)膜容受性之間的可能聯(lián)系。
　　 方法：吸取管性不孕和男性不孕擬行IVF-ET治療的患者內(nèi)膜,按入組條件分為自然周期組、促排周期組和激素替代周期組,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time PC

6、R)和免疫熒光(Immunofluorence)技術(shù)檢測(cè)TM4SF3在mRNA及蛋白質(zhì)水平的表達(dá)及其表達(dá)定位。
　　 結(jié)果：⑴TM4SF3在子宮內(nèi)膜呈周期性表達(dá),其表達(dá)定位于胞漿內(nèi),以腔上皮細(xì)胞及腺上皮細(xì)胞胞漿較為豐富；⑵自然周期種植窗期子宮內(nèi)膜TM4SF3在mRNA及蛋白水平的表達(dá)均高于增生期,并在mRNA水平有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(0.562±0.0296 vs13.582±9.001,p<0.005)；⑶促排周期種植窗期子宮內(nèi)膜TM

7、4SF3的表達(dá)較促排周期增生晚期及分泌早期升高,以腔上皮及腺上皮表達(dá)升高相對(duì)明顯,同時(shí)在mRNA水平有顯著性差異(0.234±0.156 vs30.488±14.854,0.234±0.156 vs1.506±1.427,p<0.001)；⑷.促排周期種植窗時(shí)期子宮內(nèi)膜TM4SF3的表達(dá)高于自然周期種植窗期和激素替代種植窗期TM4SF3的表達(dá),以腺上皮表達(dá)升高相對(duì)明顯,同時(shí)在mRNA水平有顯著性差異(30.488±14.854 vs13

8、.582±9.001,p<0.001；30.488±14.854 vs5.014±3.922,p<0.001)。
　　 結(jié)論：TM4SF3在人子宮內(nèi)膜組織呈周期性表達(dá),并定位于細(xì)胞漿內(nèi),同時(shí)在子宮內(nèi)膜種植窗時(shí)期表達(dá)升高,以腔上皮和腺上皮升高較明顯,提示TM4SF3可能參與子宮內(nèi)膜容受性的建立與調(diào)控。TM4SF3在促排周期子宮內(nèi)膜種植窗的表達(dá)顯著高于自然周期和激素替代周期,可能與促排周期激素水平過高有關(guān),提示雌孕激素可能在種植窗時(shí)