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1、運(yùn)用高密度寡核苷酸芯片建立大鼠胰腺發(fā)育不同階段(胚胎(E)12.5,E15.5,E18.5,新生和成年)的基因表達(dá)譜,經(jīng)過(guò)生物信息學(xué)數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)許多與胰腺功能相關(guān)的基因在E18.5相對(duì)高表達(dá),這一時(shí)期正是胰島細(xì)胞遷移聚集形成典型胰島結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵階段,而典型的胰島結(jié)構(gòu)是胰腺發(fā)揮正常生物學(xué)功能的基礎(chǔ)。本研究從基因表達(dá)譜中篩選出一條在E15.5和E18.5相對(duì)高表達(dá)的基因--- paxillin(樁蛋白, Pxn),旨在初步探討該基因在胰島細(xì)胞
2、遷移、黏附及胰島結(jié)構(gòu)維持中的作用。 運(yùn)用RT-PCR技術(shù)進(jìn)一步檢測(cè)Pxn在大鼠胰腺發(fā)育不同階段的mRNA表達(dá)水平;應(yīng)用免疫印跡檢測(cè)不同時(shí)期樁蛋白表達(dá);運(yùn)用免疫組織化學(xué)檢測(cè)不同時(shí)期樁蛋白在胰腺的定位。RT-PCR與基因芯片中檢測(cè)的mRNA表達(dá)趨勢(shì)一致,表達(dá)量胚胎期高于新生和成年期;免疫印跡結(jié)果顯示Pxn蛋白在大鼠胰腺發(fā)育不同階段的表達(dá)趨勢(shì)與mRNA表達(dá)趨勢(shì)相反,表達(dá)量出生后遠(yuǎn)高于胚胎期;免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示在不同發(fā)育時(shí)期樁蛋白不
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