表皮生長(zhǎng)因子受體單抗聯(lián)合內(nèi)皮抑素對(duì)人肺腺癌細(xì)胞自分泌VEGF和IL-8的影響.pdf

1、目的： 探索表皮生長(zhǎng)因子受體單抗（C225）聯(lián)合內(nèi)皮抑素（恩度）對(duì)人肺腺癌細(xì)胞株自分泌的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）和白介素-8（IL-8）表達(dá)的抑制作用，了解兩藥抑制腫瘤和抗血管生成的協(xié)同效應(yīng)。 方法： 運(yùn)用細(xì)胞免疫組織化學(xué)、免疫印跡（Western blot）、酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)人肺腺癌細(xì)胞系（H1299、SPC-A1、H460）在C225、恩度及兩者聯(lián)合作用下VEGF和IL-8的表達(dá)水平。運(yùn)用

2、四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法（MTT）法檢測(cè)C225和恩度對(duì)人肺腺癌細(xì)胞系（H1299、SPC-A1、H460）的生長(zhǎng)抑制作用，并運(yùn)用Western blot方法和細(xì)胞免疫組化法檢測(cè)了人肺腺癌細(xì)胞系（H1299、SPC-A1、H460）的EGFR（表皮生長(zhǎng)因子受體）的表達(dá)水平。 結(jié)果： 細(xì)胞免疫組化結(jié)果顯示：3株人肺腺癌細(xì)胞胞漿中VEGF和IL-8的表達(dá)水平在C225、恩度及兩者聯(lián)合作用下均有明顯的下降。 Wester

3、n blot法檢測(cè)顯示：與對(duì)照組比較，H1299細(xì)胞培養(yǎng)液中VEGF和IL-8表達(dá)水平在C225、恩度及兩者聯(lián)合作用下均有下降，并且兩者聯(lián)合具有協(xié)同作用。ELISA法顯示：C225、恩度能使H1299、SPC-A1、H460的自分泌VEGF或IL-8水平下降（P﹤0.05），C225、恩度能使H1299的VEGF表達(dá)水平較對(duì)照組分別下降44.5％和18.4％（P﹤0.05）；C225聯(lián)合恩度具有協(xié)同效應(yīng)，能使H1299、SPC-A1的自

4、分泌VEGF或IL-8水平進(jìn)一步下降（P﹤0.05），C225聯(lián)合恩度能使H1299的VEGF和IL-8表達(dá)水平較C225組分別下降22.8％和17.8％（P﹤0.05）。C225濃度25 ?g/ml時(shí)對(duì)H1299、SPC-A1、H460的生長(zhǎng)抑制率分別是：34.6％、25.7％和20.4％，C225濃度為50 ?g/ml時(shí)對(duì)H1299、SPC-A1、H460的生長(zhǎng)抑制率分別是：47.1％、39.1％和34.3％，呈現(xiàn)劑量依賴(lài)效應(yīng)。C2

5、25對(duì)人肺腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制效應(yīng)與給藥濃度呈正相關(guān)（P﹤0.05）。Western blot法檢測(cè)顯示：H1299的EGFR表達(dá)最高、SPC-A1次之，而H460的表達(dá)最低，C225對(duì)人肺腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制效應(yīng)與其EGFR表達(dá)水平正相關(guān)。在本實(shí)驗(yàn)中未發(fā)現(xiàn)恩度在體外對(duì)人肺腺癌細(xì)胞系（H1299、SPC-A1、H460）有明顯的生長(zhǎng)抑制作用（P﹥0.05），C225聯(lián)合恩度未能增加C225對(duì)人肺腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制效應(yīng)（P﹥0.05）。