人尿激肽原酶對(duì)大鼠腦缺血再灌注后作用機(jī)制的研究.pdf

1、本研究分為二部分：
　　 第一部分：人尿激肽原酶對(duì)大鼠腦缺血再灌注后神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響
　　 目的：觀察人尿激肽原酶(HUK)對(duì)大鼠腦缺血再灌注(I/R)后大腦缺血側(cè)皮質(zhì)缺血灶周?chē)鷧^(qū)Caspase-3、凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)和Survivin的時(shí)相表達(dá)及其對(duì)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響。
　　 方法：將Wistar大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組及HUK干預(yù)組，應(yīng)用線栓法建立大鼠大腦中動(dòng)脈阻塞(MCAO)再灌注模型。假手術(shù)組于

2、術(shù)后，模型組、HUK干預(yù)組于缺血2h再灌注6h、24h、48h、72h，應(yīng)用免疫組化技術(shù)和原位末端標(biāo)記法(TUNEL)檢測(cè)不同時(shí)相各組缺血灶周?chē)X區(qū)Caspase-3、AIF、Survivin和TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá)。
　　 結(jié)果：大鼠I/R后在缺血灶周?chē)鷧^(qū)各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均可以見(jiàn)到Caspase-3、AIF、Survivin和TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá)，HUK組與模型組相比較，兩組Caspase-3、AIF、Survivin和TUN

3、EL陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá)趨勢(shì)基本一致，Caspase-3、AIF和TUNEL的表達(dá)高峰在I/R后24h，Survivin的表達(dá)高峰在I/R后48h。HUK組各時(shí)間點(diǎn)Caspase-3、AIF和TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞的光密度值較模型組明顯降低，Survivin的光密度值較模型組明顯升高。
　　 結(jié)論：HUK對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷有保護(hù)作用，其作用機(jī)制可能與HUK抑制Caspase-3、AIF的表達(dá)，促進(jìn)Survivin的表達(dá)，減輕遲發(fā)性神經(jīng)

4、元的凋亡有關(guān)。
　　 第二部分：人尿激肽原酶對(duì)大鼠腦缺血再灌注后空間學(xué)習(xí)記憶功能及皮質(zhì)巢蛋白表達(dá)的影響
　　 目的：探討人尿激肽原酶(HUK)對(duì)大鼠局部腦缺血再灌注后缺血側(cè)皮質(zhì)巢蛋白(nestin)的表達(dá)及空間學(xué)習(xí)記憶能力障礙的作用。
　　 方法：線栓法制作大鼠大腦中動(dòng)脈阻塞(MCAO)再灌注模型,HUK治療組于術(shù)后2周內(nèi)腹腔注射HUK，第15天開(kāi)始各組大鼠采用Morris水迷宮裝置評(píng)價(jià)大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力，尼

5、氏染色觀察缺血側(cè)皮質(zhì)神經(jīng)元數(shù)量的變化，免疫組化染色檢測(cè)缺血側(cè)皮質(zhì)nestin的表達(dá)。
　　 結(jié)果：腦缺血組大鼠在定向航行試驗(yàn)和空間探索試驗(yàn)中均表現(xiàn)出明顯的空間認(rèn)知功能障礙。在定向航行試驗(yàn)中，HUK中、高劑量治療組大鼠平均逃避潛伏期與缺血組比較明顯縮短。在空間探索試驗(yàn)中，HUK中、高劑量治療組大鼠原平臺(tái)象限停留時(shí)間百分比以及穿過(guò)原平臺(tái)位置次數(shù)均大于腦缺血組。缺血側(cè)皮質(zhì)尼氏染色結(jié)果顯示，HUK中、高劑量治療組大鼠缺血側(cè)皮質(zhì)存活神經(jīng)元