缺血后處理對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的： 本實(shí)驗(yàn)采用TUNEL，法、化學(xué)檢驗(yàn)法等技術(shù)觀(guān)察缺血后處理對(duì)大鼠大腦缺血再灌注損傷誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的影響，并檢測(cè)腦組織勻漿中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性，探討缺血后處理腦保護(hù)機(jī)制及其可能的臨床應(yīng)用價(jià)值，為在臨床中應(yīng)用提供理論支持。 方法： 健康雄性SD大鼠，質(zhì)量250-300g，10％水合氯醛0.3ml/100mg腹腔注射麻醉，隨機(jī)分為五組：①假手術(shù)組(sham組，n=8)，只進(jìn)行麻醉和

2、分離解剖左右兩側(cè)頸總動(dòng)脈，不做其它處理。②缺血再灌注1組：給予腦缺血30分鐘，再灌注24小時(shí)(I/R1組，n=8)。③缺血再灌注2組：給予腦缺血30分鐘，再灌注48小時(shí)(I/R2組，n=8)④缺血后處理1組：給予腦缺血30分鐘，缺血后處理后再灌注24小時(shí)(Postl組，n=8)。⑤缺血后處理2組：給予腦缺血30分鐘，缺血后處理后再灌注48小時(shí)(Post2組，n=8)。使用無(wú)創(chuàng)動(dòng)脈夾夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈實(shí)現(xiàn)腦缺血，撤除動(dòng)脈夾實(shí)現(xiàn)再灌注。在再灌

3、注即刻給予大鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈15s再灌注/15s阻斷3個(gè)循環(huán)處理實(shí)現(xiàn)缺血后處理。實(shí)驗(yàn)結(jié)束，頸動(dòng)脈放血處死大鼠，快速開(kāi)顱取腦組織，將左側(cè)半球置于10％甲醛溶液固定制作石蠟切片，采用TUNEL法觀(guān)察大腦頂葉皮質(zhì)細(xì)胞凋亡情況；用右側(cè)半球頂葉皮質(zhì)制作腦組織勻漿檢測(cè)MDA含量與SOD活性。 結(jié)果： 丙二醛和超氧化物歧化酶檢測(cè)結(jié)果：與sham組相比，I/R1組、I/R2組、Postl組、Post2組MDA含量增高，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

4、<0.05)；與sham組相比，I/R1組、I/R2組、Postl組、Post2組SOD活性降低，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)：與I/R1組相比，Postl組MDA含量降低，SOD活性升高，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與I/R2組相比，Post2組MDA含量降低，SOD活性升高，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與I/R1組相比，I/R2組MDA含量降低，SOD活性升高，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與Postl組相比，P

5、ost2組MDA含量降低，SOD活性升高，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果：sham組可見(jiàn)少量凋亡細(xì)胞。與sham組相比，I/R1組、I/R2組、Postl組、Post2組凋亡指數(shù)升高(P<0.05)。與I/R1組比較，Postl組凋亡指數(shù)降低(P<0.05)；與I/R2組比較，Post2組凋亡指數(shù)降低(P<0.05)。與I/R1組相比，I/R2組凋亡指數(shù)降低(P<0.05)；與Postl組相比，Post2組