缺血后處理對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用.pdf

1、目的： 本實驗采用TUNEL，法、化學檢驗法等技術觀察缺血后處理對大鼠大腦缺血再灌注損傷誘導的細胞凋亡的影響，并檢測腦組織勻漿中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性，探討缺血后處理腦保護機制及其可能的臨床應用價值，為在臨床中應用提供理論支持。 方法： 健康雄性SD大鼠，質(zhì)量250-300g，10％水合氯醛0.3ml/100mg腹腔注射麻醉，隨機分為五組：①假手術組(sham組，n=8)，只進行麻醉和

2、分離解剖左右兩側頸總動脈，不做其它處理。②缺血再灌注1組：給予腦缺血30分鐘，再灌注24小時(I/R1組，n=8)。③缺血再灌注2組：給予腦缺血30分鐘，再灌注48小時(I/R2組，n=8)④缺血后處理1組：給予腦缺血30分鐘，缺血后處理后再灌注24小時(Postl組，n=8)。⑤缺血后處理2組：給予腦缺血30分鐘，缺血后處理后再灌注48小時(Post2組，n=8)。使用無創(chuàng)動脈夾夾閉雙側頸總動脈實現(xiàn)腦缺血，撤除動脈夾實現(xiàn)再灌注。在再灌

3、注即刻給予大鼠雙側頸總動脈15s再灌注/15s阻斷3個循環(huán)處理實現(xiàn)缺血后處理。實驗結束，頸動脈放血處死大鼠，快速開顱取腦組織，將左側半球置于10％甲醛溶液固定制作石蠟切片，采用TUNEL法觀察大腦頂葉皮質(zhì)細胞凋亡情況；用右側半球頂葉皮質(zhì)制作腦組織勻漿檢測MDA含量與SOD活性。 結果： 丙二醛和超氧化物歧化酶檢測結果：與sham組相比，I/R1組、I/R2組、Postl組、Post2組MDA含量增高，差別有統(tǒng)計學意義(P

4、<0.05)；與sham組相比，I/R1組、I/R2組、Postl組、Post2組SOD活性降低，差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)：與I/R1組相比，Postl組MDA含量降低，SOD活性升高，差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；與I/R2組相比，Post2組MDA含量降低，SOD活性升高，差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；與I/R1組相比，I/R2組MDA含量降低，SOD活性升高，差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；與Postl組相比，P

5、ost2組MDA含量降低，SOD活性升高，差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 細胞凋亡檢測結果：sham組可見少量凋亡細胞。與sham組相比，I/R1組、I/R2組、Postl組、Post2組凋亡指數(shù)升高(P<0.05)。與I/R1組比較，Postl組凋亡指數(shù)降低(P<0.05)；與I/R2組比較，Post2組凋亡指數(shù)降低(P<0.05)。與I/R1組相比，I/R2組凋亡指數(shù)降低(P<0.05)；與Postl組相比，Post2組