遠(yuǎn)端肢體缺血后處理對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：通過(guò)建立大鼠心肌缺血再灌注損傷模型，觀察心電圖變化、檢測(cè)血清 CK-MB、CK、LDH濃度變化、觀察心肌組織的形態(tài)及細(xì)胞內(nèi)線粒體等超微結(jié)構(gòu)變化，探討遠(yuǎn)端肢體缺血后處理對(duì)心肌存在的保護(hù)作用。
　　方法：選用健康的SD大鼠（雌雄不限、2-3月齡、體重250-350g）來(lái)建立心肌缺血再灌注損傷模型，隨機(jī)分成三個(gè)實(shí)驗(yàn)組（每組10只）：假手術(shù)組（Sham組)、心肌缺血再灌注損傷組(I/R組)、心肌缺血再灌注損傷組+遠(yuǎn)端肢體缺血后處理組

2、(即I/R組+RLIPOC組,簡(jiǎn)稱(chēng)RLIPOC組）。I/R組和RLIPOC組的大鼠開(kāi)胸后采用6-0絲線結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支（LAD)，Sham組只穿線不結(jié)扎，I/R組和RLIPOC組的大鼠結(jié)扎LAD使大鼠左心室局部心肌缺血30 min，再開(kāi)放LAD使心肌血流恢復(fù)灌注120 min的處理。且RLIPOC組在心肌缺血15min時(shí),對(duì)大鼠左下肢進(jìn)行捆綁實(shí)施10 min缺血后再恢復(fù)左下肢血流灌注。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中連續(xù)監(jiān)測(cè)大鼠的心率（HR)及Ⅱ?qū)?lián) E

3、CG變化，記錄缺血期和再灌注期的心律失常發(fā)生情況并進(jìn)行評(píng)分。于大鼠頸內(nèi)靜脈分別在心肌缺血前和再灌注120min時(shí)抽取血標(biāo)本，檢測(cè)血清肌酸激酶心肌型同工酶（CK-MB)、肌酸激酶（CK）、乳酸脫氧酶（LDH)的濃度。在再灌注120min末取心臟做HE染色觀察心肌組織形態(tài)學(xué)改變，以及透射電鏡觀察心肌細(xì)胞內(nèi)線粒體等超微結(jié)構(gòu)的改變。
　　結(jié)果：1.與 Sham組相比，I/R組、RLIPOC組缺血期和再灌注期的心律失常發(fā)生率顯著增多，心律失

4、常評(píng)分明顯升高。與I/R組相比，RLIPOC組在再灌注60min內(nèi)發(fā)生心律失常的數(shù)目減少，心律失常的評(píng)分明顯降低（3.44±0.53 VS1.63±0.92，P<0.01），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2.在缺血前，各實(shí)驗(yàn)組的血清CK-MB、CK、LDH濃度無(wú)顯著差異（CK-MB:Sham組200.19±30.02U/L，I/R組216.49±15.92U/L，RLIPOC組194.90±46.33U/L；CK：Sham組819.07

5、±177.02U/L，I/R組788.22±151.04U/L，RLIPOC組746.36±132.84U/L；LDH：Sham組111.20±9.36U/L，I/R組120.20±15.83U/L，RLIPOC組146.25±21.23U/L；P>0.05）。在再灌注120min后，與Sham組相比，I/R組、RLIPOC組血清CK-MB、CK、LDH濃度顯著升高（CK-MB:Sham組203.55±32.25U/L，I/R組1229

6、.57±92.03U/L，RLIPOC組610.17±89.18U/L；CK：Sham組789.68±144.66U/L，I/R組11600.67±875.84U/L，RLIPOC組5443.98±821.97U/L；LDH：Sham組119.00±19.92U/L，I/R組1039.43±70.55U/L，RLIPOC組665.83±77.98U/L；P<0.05)。在再灌注120min后，RLIPOC組與I/R組相比，血清CK-MB

7、、CK、LDH濃度明顯降低(P<0.05)。
　　3.在再灌注120min末取心肌做HE染色可見(jiàn)，與Sham組相比，I/R組心肌組織呈區(qū)域性壞死，肌纖維腫脹明顯并排列紊亂，肌絲斷裂溶解；間質(zhì)充血、水腫，有大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，血管明顯擴(kuò)張；心肌細(xì)胞體積明顯增大,呈空泡樣變性，核固縮甚至碎裂。與I/R組相比，RLIPOC組肌纖維排列較整齊，肌纖維輕度腫脹，肌絲部分?jǐn)嗔讶芙猓婚g質(zhì)部分水腫，中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)減少；心肌細(xì)胞體積輕度增大,少數(shù)呈

8、空泡樣變性，核部分固縮。在灌注120min末做透射電鏡下可見(jiàn),I/R組：細(xì)胞核明顯改變，核膜皺縮甚至破裂，染色質(zhì)濃縮，分布雜亂；肌節(jié)各帶的結(jié)構(gòu)消失，肌絲斷裂，Z線增粗；線粒體腫脹，空泡樣變性，呈絮狀改變，嵴松散，有電子致密顆粒沉積。RLIPOC組：細(xì)胞核膜完整；肌節(jié)各帶的結(jié)構(gòu)比較清晰，肌絲排列基本整齊規(guī)則，無(wú)明顯斷裂；線粒體輕度腫脹，無(wú)明顯空泡形成，呈勻質(zhì)樣改變，嵴較密集。
　　結(jié)論：1.RLIPOC降低大鼠心肌再灌注期間室性心律