缺血后處理對(duì)大鼠缺血再灌注心肌的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的： 研究缺血后處理(I-postC)對(duì)大鼠缺血/再灌注(I/R)心肌鈣網(wǎng)蛋白(CRT)及其下游鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CaN)信號(hào)途徑的影響，探討I-postC保護(hù)I/R心肌的機(jī)制。 方法： 1.通過(guò)阻斷左冠狀動(dòng)脈前降支(LAD)血流致心肌缺血45 min，然后恢復(fù)血液灌注24 h建立Wistar大鼠在體心肌I/R模型； 2.實(shí)驗(yàn)分組：隨機(jī)分為6組(n=8) (1)假手術(shù)(Sham)組：開(kāi)胸暴露心臟后

2、穿線但不結(jié)扎LAD； (2)缺血/再灌注(I/R)組：心肌缺血45 min，再灌注24 h結(jié)束實(shí)驗(yàn)； (3)缺血后處理(I-postC)組：心肌缺血45 min后，再灌注30 s，缺血30 s，反復(fù)3輪，然后再灌注24 h結(jié)束實(shí)驗(yàn)； (4)CsA+I/R組：每日灌胃給予CaN抑制劑環(huán)孢霉素A(CsA)25mg/kg，連續(xù)3天后按I/R組程序操作； (5)CsA+I-postC組：每日灌胃給予CsA 25

3、mg/kg，連續(xù)3天后按I-postC組程序操作； (6)缺血預(yù)處理(IPC)組：心肌缺血5 min，再灌注5 min，反復(fù)3輪，而后按I/R組程序操作。 3.以心功能軟件檢測(cè)血流動(dòng)力學(xué)； 4.以TTC法和TUNEL法分別檢測(cè)心肌梗死面積和細(xì)胞凋亡； 5.采用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血漿乳酸脫氫酶(LDH)和肌酸激酶(CK-MB)活性； 6.發(fā)色底物法測(cè)定心肌CaN活性； 7.免疫印跡法檢測(cè)心

4、肌組織CaN和CRT蛋白表達(dá)。 結(jié)果： 1.I-postC改善I/R所致的左心功能下降，+dp/dtmax、-dp/dtmax分別較I/R組高58.6％和52.9％，左室舒張末壓(LVEDP)較I/R組低21.8％，心肌梗死范圍縮小(較I/R組低51.6％)，LDH和CK-MB漏出減少(分別較I/R組低37.6％和34.3％)，細(xì)胞凋亡率降低(較I/R組低74.3％)，并顯著抑制I/R誘導(dǎo)的心肌組織CaN活性升高(較I/

5、R組低28.3％)及CaN和CRT表達(dá)上調(diào)(分別較I/R組低32.0％和30.4％)，RCRT表達(dá)與CaN活性存在明顯的正相關(guān)性。 2.CAN抑制劑CsA顯著縮小I/R所致的心肌梗死面積，抑制細(xì)胞凋亡，但其對(duì)心肌細(xì)胞凋亡的抑制作用弱于I-postC，且兩者聯(lián)合應(yīng)用并未產(chǎn)生更強(qiáng)的心肌保護(hù)效應(yīng)：CsA對(duì)+dp/dtmax、-dp/dtmax和LVEDP無(wú)明顯改善，與I/R組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3.IPC顯著縮小I/R所致的心