環(huán)孢霉素A對大鼠缺血再灌注心肌的保護作用.pdf

1、目的：觀察環(huán)孢霉素A對缺血再灌注心肌的影響,并探討其心肌保護的可能機制。
　　 方法：將32只SD大鼠隨機分為4組(n=8):假手術(shù)組(Sham)、缺血再灌注(I/R)模型組、環(huán)孢霉素(CsA)組、環(huán)孢霉素+5-羥基葵酸鹽(CsA+5-HD)組。CsA、CsA+5-HD組給予CsA15mg/kg及1mL生理鹽水腹腔注射,Sham組和I/R組注入相同劑量的生理鹽水,連續(xù)5d,5-HD+CsA組于術(shù)前30min加用5-HD腹腔注射(

2、10mg/kg)。Sham組不阻斷冠狀動脈左前降支,其余三組阻斷冠狀動脈左前降支30min,復(fù)灌24h后,取左心室肌備用。采用免疫熒光染色計數(shù)浸潤的CD4+和CD3+T淋巴細胞,ELISA檢測鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(Calcineurin,CaN)的表達,PT-PCR檢測CaNmRNA的表達。HE染色觀察心肌組織病理改變。
　　 結(jié)果：CD4+T淋巴細胞的免疫熒光顯示,Sham組、I/R組、CsA組和CsA+5-HD組浸潤的細胞量分別為

3、(25.38±2.83)、(43.88±2.47)、(33.84±3.13)和(34.134±3.48)。其中I/R組、CsA組和CsA+5-HD組浸潤的CD4+T細胞高于Sham組(P＜0.05),CsA組和CsA+5-HD組低于I/R組(P＜0.05)。CD3+T淋巴細胞的免疫熒光顯示,Sham組、I/R組、CsA組和CsA+5-HD組浸潤的細胞量分別為(35.75±2.96)、(62.134±3.56)、(45.86±3.44)和

4、(46.00±3.30)。其中I/R組、CsA組和CsA+5-HD組浸潤的CD3+T細胞高于Sham組(P＜0.05),CsA組和CsA+5-HD組低于I/R組(P＜0.05)。CaN的ELISA檢測顯示,Sham組、I/R組、CsA組和CsA+5-HD組表達量分別為(12.16±1.37)、(22.62±2.70)、(17.19±1.93)和(17.51±2.15);CaNmRNA的RT-PCR檢測顯示,各組表達量分別為(0.974±

5、0.05)、(1.64±0.54)、(1.06±0.05)和(1.10±0.04)。其中I/R組、CsA組和CsA+5-HD組表達量高于Sham組(P＜0.05),CsA組和CsA+5-HD組低于I/R組(P＜0.05)。HE染色觀察心肌病理改變:Sham組的心肌細胞顯示清晰組織結(jié)構(gòu),其余組心肌細胞出現(xiàn)不同程度的充血、水腫、變性、壞死及出血。I/R組心肌纖維大量斷裂,間隙增寬,有灶性出血,心肌間質(zhì)可見大量炎性細胞浸潤;CsA及5-HD+