缺血預(yù)處理對(duì)小鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用研究.pdf

1、近年來(lái)，隨著動(dòng)脈搭橋術(shù)、溶栓療法、心臟外科體外循環(huán)、經(jīng)皮腔內(nèi)冠脈血管成形術(shù)等方法的建立和推廣應(yīng)用，使得組織器官缺血后得到血液再灌注。多數(shù)情況下，缺血再灌注的器官能得到恢復(fù)，損傷的結(jié)構(gòu)能得到修復(fù)，患者能夠恢復(fù)健康;但有時(shí)缺血再灌注，不僅不能使組織、器官功能恢復(fù)，反而加重組織、器官的功能障礙和結(jié)構(gòu)損傷。這種在缺血基礎(chǔ)上恢復(fù)血流后組織損傷反而加重，甚至發(fā)生不可逆性損傷的現(xiàn)象稱為缺血再灌注損傷。
　　缺血預(yù)處理是指心臟在經(jīng)歷了一次或者多次

2、的短暫缺血后，再進(jìn)行較長(zhǎng)時(shí)間的缺血再灌注時(shí)，會(huì)減輕心肌受損的現(xiàn)象。缺血預(yù)處理能夠減少心肌梗死面積，改善心肌抑頓，減輕缺血再灌注后引起的心律失常等，改善心肌梗死病人的愈后。
　　本研究通過(guò)建立C57/B6雄性小鼠心肌缺血再灌注(ischemia-reperfusion，I/R)模型，探討缺血預(yù)處理對(duì)小鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。首先，將36只6～8周C57/B6雄性小鼠隨機(jī)分為3組(n=12）:假手術(shù)組(Sham組)、缺血再灌注

3、組(I/R組)及缺血預(yù)處理組(Ipost組)。然后，利用蘇木素伊紅(hematoxylin and eosin，HE)染色、脫氧三磷酸尿苷缺口末端標(biāo)記(TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling，Tunel)染色、免疫組化及蛋白質(zhì)印跡方法，對(duì)比三組小鼠的心肌病理學(xué)改變、心肌細(xì)胞凋亡情況、梗死心肌邊緣區(qū)微血管密度(microvessel density,MVD)的變化，以及腫瘤相關(guān)蛋白PTEN(p

4、hosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten，即人第10號(hào)染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源基因的編碼產(chǎn)物）、自噬相關(guān)蛋白LC3Ⅰ/Ⅱ和腺苷酸活化蛋白激酶(5-AMP activated protein kinase，AMPK)的表達(dá)水平。
　　結(jié)果顯示:I/R組心肌組織細(xì)胞水腫、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)等組織病理學(xué)變化情況較Sham組明顯，而Ipost組中的情況相比I/R組有明

5、顯改善;同時(shí)，Ipost組心肌凋亡率高于Sham組，但顯著低于I/R組(P＜0.01);Ipost組梗死心肌邊緣區(qū)域的微血管密度顯著高于I/R組(P＜0.01）。此外，缺血預(yù)處理后，PTEN的表達(dá)水平降低，AMPK磷酸化水平以及LC3Ⅰ/Ⅱ蛋白的表達(dá)水平均增強(qiáng)。由此可見(jiàn)，缺血預(yù)處理可減輕I/R損傷，減少心肌梗死面積，減輕心肌水腫，對(duì)心肌細(xì)胞有明顯的保護(hù)作用，其機(jī)制可能與梗死心肌中PTEN表達(dá)下調(diào)、AMPK磷酸化水平增強(qiáng)、心肌細(xì)胞自噬增強(qiáng)