七氟烷預(yù)處理對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷保護(hù)作用.pdf

1、目的：探討七氟烷預(yù)處理對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用；及一定預(yù)處理時(shí)間內(nèi)七氟烷心肌保護(hù)作用的合理濃度。 方法：雄性成齡Wistar大鼠32只，體重250～300g，隨機(jī)分為缺血-再灌注(I/R)組、和預(yù)處理1(1％七氟烷)、2(2％七氟烷)、3(3％七氟烷)組各8只。大鼠經(jīng)水合氯醛(3mg/kg)腹腔注射麻醉后，手術(shù)分離股動(dòng)、靜脈，股動(dòng)脈置管，接多功能生理記錄儀，連續(xù)監(jiān)測(cè)大鼠平均動(dòng)脈壓(MeanArterialpressur

2、eMAP)、心率(HeartRateHR)，股靜脈置管給藥。在環(huán)狀軟骨上方0.5cm處，取頸部正中縱形切口，切開(kāi)皮膚皮下和淺層肌組織，暴露氣管：在氣管前壁剪一倒“T”型口，置入自制氣管導(dǎo)管，股靜脈注射維庫(kù)溴銨0.08mg/kg后，連接小動(dòng)物呼吸機(jī)，潮氣量5ml，呼吸頻率60bpm機(jī)械通氣。I/R組直接開(kāi)胸，剪開(kāi)心包，尋找并結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支30min；預(yù)處理組通過(guò)微量注射泵以恒定速率，經(jīng)呼吸回路串接的三通分別給予1％(1組)、2％(2

3、組)、3％(3組)七氟烷吸入預(yù)處理10min；再經(jīng)95％O2行10分鐘氣道洗脫，開(kāi)胸、結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支30min。具體操作：沿大鼠胸骨左緣第5肋間逐層切斷胸壁淺層肌，結(jié)扎肋間血管。游離心包，尋找左冠狀動(dòng)脈前降支，掛線、打個(gè)活結(jié)，線上套一段硬塑料管系緊，阻斷血流30min后，剪斷結(jié)扎線，再灌注2小時(shí)。缺血/預(yù)處理前，記錄各組鼠測(cè)MAP、HR，取靜脈血1ml，備測(cè)全血肌酸激酶(creatinekinaseCK)、乳酸脫氫酶(lactat

4、edehydrogenaseLDH)活性作為基礎(chǔ)對(duì)照值。記錄各組缺血前即刻、預(yù)處理10min后、缺血30分鐘末、再灌注30min、再灌注2小時(shí)的HR、MAP數(shù)值，并留取四組鼠缺血前、再灌注末1min靜脈血1ml，測(cè)CK、LDH。實(shí)驗(yàn)結(jié)束，取部分心尖組織切片HE染色；另取部分心尖組織切片TTC染色，觀察缺血后心肌組織學(xué)變化，用ScionImage圖像分析軟件計(jì)算各組大鼠心肌梗死面積。 結(jié)果：(1)HE染色證明大鼠急性心肌梗死模型建

5、立成功，病理圖片分析表明缺血再灌注后，七氟烷預(yù)處理組心肌損傷程度較缺血再灌注(I/R)組明顯減輕(圖1-10)。(2)各組鼠缺血前HR、MAP、全血CK、LDH活性均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；(3)缺血后各組鼠HR、MAP均有下降趨勢(shì)，組內(nèi)不同時(shí)點(diǎn)HR、MAP比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)；組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；各組缺血前心功能明顯優(yōu)于再灌注末；(4)各組間缺血前CK、LDH活性相比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，

6、各組內(nèi)比較，再灌注末CK、LDH活性較缺血前有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)；再灌注末I/R組CK、LDH活性顯著高于預(yù)處理各組(P<0.05)；預(yù)處理各組間CK、LDH活性比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。(5)預(yù)處理組及I/R組TTC染色圖像(見(jiàn)圖13、14、15、16、17)，心肌梗死區(qū)與非梗死區(qū)分界清晰。預(yù)處理各組心肌梗死面積均較I/R組顯著縮小(P<0.05)；預(yù)處理2、3組心肌梗死面積更小于預(yù)處理1組(P<0.05)，2、3組間

7、梗死面積比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 結(jié)論：1.心肌組織切片HE染色顯示各組鼠心肌均存在不同程度梗死區(qū)域，證明本實(shí)驗(yàn)采用結(jié)扎方法能夠模擬心肌缺血，模型制作成功，結(jié)果可靠。2.七氟烷預(yù)處理能明顯縮小在體大鼠心肌缺血模型的梗死面積，對(duì)缺血再灌注損傷有明確的保護(hù)作用。3.經(jīng)一定時(shí)間預(yù)處理后，預(yù)處理各組鼠心肌均表現(xiàn)出明確的抗缺血再灌注損傷效果，2、3兩組略優(yōu)于1組，提示七氟烷預(yù)處理時(shí)，一定范圍內(nèi)提高濃度，可增強(qiáng)抗缺血再灌注損傷效果