異氟醚、卡托普利聯(lián)合預(yù)處理對兔心肌缺血再灌注損傷保護作用的研究.pdf

1、目的：建立缺血再灌注模型，觀察異氟醚、卡托普利聯(lián)合預(yù)處理對兔缺血再灌注的心肌保護作用。
　　 方法：健康新西蘭大白兔，采用結(jié)扎冠狀動脈左前降支法制備心肌缺血再灌注模型。隨機分成6組：假手術(shù)組(S組)：僅開胸并分離冠狀動脈左前降支，但不阻斷血流；缺血再灌注組(I/R組)：缺血30min，再灌注120 min；缺血預(yù)處理組(IPC組)：缺血5min，再灌注5min，重復(fù)3次后同I/R組處理；異氟醚預(yù)處理組(Ⅰ組)：給予1.1％異氟醚

2、持續(xù)吸入30min，洗脫15min，之后處理同I/R組；卡托普利預(yù)處理組(C組)：給予喂飼卡托普利片25 mg·kg-1，24h后處理同I/R組；異氟醚、卡托普利聯(lián)合預(yù)處理組(I+C組)：給予喂飼卡托普利片25 mg·kg-1，24h后處理同Ⅰ組。記錄缺血再灌注前后不同時間點血流動力學(xué)指標(biāo)：阻斷前(T0)，阻斷30min(T1)，再灌注30min(T2)，再灌注60min(T3)，再灌注120min(T4)；記錄心律失常發(fā)生率；取動脈血

3、檢測乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸磷酸激酶(CK)、肌酸磷酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌鈣蛋白(cTnI)濃度；再灌注結(jié)束后檢測血清丙二醛(MDA)濃度及超氧化物歧化酶(SOD)活性：觀察各組心肌細胞超微結(jié)構(gòu)變化。
　　 結(jié)果：1.T0～T2Ⅰ組與I+C組HR相對高于其它各組，T0～T4Ⅰ組、C組與I+C組MAP與RPP相對較低并依次遞減(P<0.05，或P<0.01)，IPC組、I組、C組再灌注期間心律失常發(fā)生率(37.5％、

4、50％、50％)低于I/R組(62.5％)，但高于I+C組(25％，P<0.05)。2.心肌酶變化：與S組比，各組心肌酶學(xué)指標(biāo)從T1至T4均較T0有所升高(P<0.05或P<0.01)，但IPC組、I組、C組和I+C組增高程度低于I/R(.P<0.05)，IPC組和I+C組又較I組和C組低(P<0.05)。3.生化指標(biāo)變化：與S組比，各組MDA均增高，SOD降低(P<0.01)，但與I/R組比，各處理組MDA降低，SOD較高(P<0.0

5、1)。IPC組和I+C組MDA和SOD分別較I組和C組降低和升高(P<0.05)。4.心肌超微結(jié)構(gòu)變化：預(yù)處理組心肌細胞損傷輕于I/R組。
　　 結(jié)論：異氟醚、卡托普利聯(lián)合預(yù)處理對缺血再灌注兔心肌有保護作用，較單獨應(yīng)用異氟醚、卡托普利預(yù)處理的保護作用增強，其效果與缺血預(yù)處理相似。
　　 目的：建立缺血再灌注模型，觀察異氟醚、卡托普利聯(lián)合預(yù)處理對兔心肌細胞凋亡的影響。
　　 方法：健康新西蘭大白兔，采用結(jié)扎冠狀動脈

6、左前降支法制備心肌缺血再灌注模型。隨機分成6組：假手術(shù)組(S組)：僅開胸并分離冠狀動脈左前降支，但不阻斷血流；缺血再灌注組(I/R組)：缺血30min，再灌注120 min；缺血預(yù)處理組(IPC組)：缺血5 min，再灌注5 min，重復(fù)3次后處理同I/R組；異氟醚預(yù)處理組(I組)：給予1.1％異氟醚持續(xù)吸入30min，洗脫15min，之后處理同I/R組；卡托普利預(yù)處理組(C組)：給予喂飼卡托普利片25 mg·kg-1，24h后處理同I

7、/R組；異氟醚、卡托普利聯(lián)合預(yù)處理組(I+C組)：給予喂飼卡托普利片25 mg·kg-1，24h后處理同I組。再灌注結(jié)束后采用伊文思藍和TTC染色法檢測心肌梗死面積，流式細胞儀檢測細胞凋亡的情況。
　　 結(jié)果：1.心肌梗死面積：IPC組、I組、C組和I+C組心肌梗死面積(33.64±3.8％、39.8±5.7％、39.64±3.4％、33.9±5.9％)均小于I/R組(60.7±6.0)(P<0.01)，IPC、I+C組心肌梗死

8、面積均小于I組、C組(P<0.05)。2.細胞凋亡：與S組比較各組凋亡指數(shù)明顯增高(P<0.01.)；與I/R組相比各預(yù)處理組細胞凋亡指數(shù)均有所降低(P<0.01)；I組和C組較IPC組和I+C組細胞凋亡指數(shù)有所增加(p<0.05)。但IPC組和I+C組之間，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　 結(jié)論：1.異氟醚、卡托普利聯(lián)合預(yù)處理可明顯減少心肌缺血再灌注的梗死面積以及降低細胞凋亡，較單獨藥物預(yù)處理組作用增強，與缺血預(yù)處理的

9、作用相似。2.異氟醚、卡托普利聯(lián)合預(yù)處理對心肌缺血再灌注損傷產(chǎn)生了協(xié)同的抗細胞凋亡保護作用。
　　 目的：建立缺血再灌注模型，初步探討異氟醚、卡托普利聯(lián)合預(yù)處理對凋亡相關(guān)基因的影響，以及對凋亡通路的作用機制。
　　 方法：健康新西蘭大白兔，采用結(jié)扎冠狀動脈左前降支法制備心肌缺血再灌注模型。隨機分成6組：假手術(shù)組(S組)：僅開胸并分離冠狀動脈左前降支，但不阻斷血流；缺血再灌注組(I/R組)：缺血30min，再灌注120 m

10、in；缺血預(yù)處理組(IPC組)：缺血5min，再灌注5min，重復(fù)3次后處理同I/R組；異氟醚預(yù)處理組(I組)：給予1.1％異氟醚持續(xù)吸入30min，洗脫15min，之后處理同I/R組；卡托普利預(yù)處理組(C組)：給予喂飼卡托普利片25 mg·kg-1，24h后處理同I/R組：異氟醚、卡托普利聯(lián)合預(yù)處理組(I+C組)：給予喂飼卡托普利片25 mg·kg-1，24h后處理同I組。再灌注結(jié)束后采用免疫印跡法(Western-Blot)檢測各組

11、心肌凋亡相關(guān)基因Bcl-2、Bax和凋亡通路蛋白Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的表達，流式細胞儀檢測細胞凋亡的情況。
　　 結(jié)果：1.各組心肌Bcl-2、Bax蛋白表達的變化：與I/R組比較，各預(yù)處理組Bcl-2表達明顯增加，Bax表達降低，Bcl-2/Bax比值明顯增加，差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；與I組和C組相比，IPC組和I+C組Bcl-2/Bax比值明顯增高(P<0.01)，IPC組

12、和I+C組之間比值沒有差異(P>0.05)。2.各組心肌凋亡通路蛋白Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白表達的變化：與I/R組比較各預(yù)處理組Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白表達明顯降低，差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；與I組和C組相比，IPC組Caspase-3蛋白表達較低(P<0.01)，但與I+C組相比差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；各藥物預(yù)處理組Caspase-8蛋白

13、表達與IPC組相比均較低(P<0.05或P<0.01)；I+C組Caspase-8蛋白的表達量也低于I組和C組(P<0.01)；與各藥物預(yù)處理組相比，IPC組的Caspase-9蛋白表達較低(P<0.01)；I+C組與I組和C組相比，Caspase-9蛋白的表達量也有差異(P<0.05)。3.細胞凋亡：與I/R組相比，各預(yù)處理組細胞凋亡指數(shù)均有所降低(P<0.01)I+C組凋亡指數(shù)低于I組和C組(P<0.05)，但與IPC組無差異(P>

14、0.05)
　　 結(jié)論：1.異氟醚、卡托普利聯(lián)合預(yù)處理組通過上調(diào)Bcl-2蛋白表達，下調(diào)Bax蛋白表達，增加Bcl-2/Bax比值，對缺血再灌注兔心肌產(chǎn)生保護作用。2.異氟醚、卡托普利聯(lián)合預(yù)處理組降低心肌缺血再灌注后Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的蛋白表達，抑制凋亡通路信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，減少心肌細胞的凋亡。3.異氟醚、卡托普利聯(lián)合預(yù)處理對凋亡的死亡受體通路和線粒體通路具有抑制作用，但主要是通過死亡受體通路發(fā)揮