缺血后處理對(duì)肺移植缺血再灌注損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景： 肺臟移植是大器官移植中最后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)移植術(shù)研究的，臨床肺移植的進(jìn)展也落后于其它器官。目前肺移植已成為一種治療多種終末期肺部疾患的有效手段．甚至是唯一手段。肺移植術(shù)后缺血再灌注損傷是導(dǎo)致手術(shù)失敗的主要原因之一．大量的實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，缺血后處理是針對(duì)缺血再灌注損傷引發(fā)的效應(yīng)的保護(hù)方式。關(guān)于缺血后處理方式的研究，心臟、腦等器官開(kāi)展較多，肺移植方面相對(duì)很少。 研究目的：利用犬單肺移植模型，初步探討缺血后處理對(duì)犬單肺移植缺

2、血再灌注損傷的保護(hù)作用，為臨床上移植肺保護(hù)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 研究方法：比咯犬24只，體重13.2±2.65 kg，雌雄不限，一一配對(duì)成供受體，供受體體重匹配在士20％之內(nèi)。動(dòng)物分成2組，對(duì)照組：比咯犬12只，一一配對(duì)，進(jìn)行供受體左側(cè)異體單肺移植。實(shí)驗(yàn)組：比咯犬12只，一一配對(duì)，進(jìn)行供受體左側(cè)異體單肺移植，常規(guī)方式獲取的供體犬肺植入后，再灌注早期實(shí)施3個(gè)周期的10秒再灌-10秒再阻斷，總時(shí)程1分鐘的缺血后處理。分別于再灌注后1h、2

3、h時(shí)間點(diǎn)，取血清及肺組織，記錄Paw值，采用考馬斯亮蘭法測(cè)定兩組供體肺組織脂質(zhì)代謝產(chǎn)物丙二醛的含量，超氧化物歧化酶活性，并測(cè)定血清IL-8含量。采集各時(shí)間點(diǎn)新鮮肺組織標(biāo)本，HE染色光鏡下觀察有無(wú)明顯水腫、滲出，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)等變化，并測(cè)定2h肺組織濕干重比值。應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，以P<0.05為統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著差別。 結(jié)果： 1.12組均手術(shù)均無(wú)失敗，供體植入后1h與2h的Paw比較，差異明顯(P<0.05)；

4、動(dòng)脈血?dú)獗O(jiān)測(cè)提示，供體植入后1h與2h的PaO2比較，差異明顯(P<0.05)；供體植入后1h與2h的PaCO2比較，差異不明顯(P>0.05)。可以認(rèn)為肺植入后肺順應(yīng)性及肺功能有所下降，符合缺血再灌注的病理變化。 2.植入后的1h與2h試驗(yàn)組與對(duì)照組的Paw分別比較，Paw植入后兩組的重復(fù)測(cè)量對(duì)比結(jié)果示P=0.136>0.05，兩組沒(méi)有差異。可以認(rèn)為植入后肺順應(yīng)性兩組未見(jiàn)明顯差異；實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組對(duì)比：PaO2兩組對(duì)比P=1.0

5、0>0.05，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；PaCO2兩組對(duì)比P=1.00>0.05，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?？梢哉J(rèn)為缺血后處理對(duì)移植早期的肺功能無(wú)明顯影響。 3.植入后1h兩組的肺組織MDA含量的檢驗(yàn)結(jié)果P<0.001，可以認(rèn)為兩組植入后1h，MDA含量水平有差異，實(shí)驗(yàn)組MDA含量明顯減低；植入后2h兩組MDA含量的檢驗(yàn)結(jié)果P<0.001，可以認(rèn)為兩組植入后2h，MDA含量水平有差異，實(shí)驗(yàn)組MDA含量明顯減低；植入后1h兩組肺組織SOD活性的檢

6、驗(yàn)結(jié)果(P<0.001)，可以認(rèn)為兩組植入后1h，SOD活性水平有差異，實(shí)驗(yàn)組SOD的活性明顯升高；植入后2h兩組肺組織SOD活性的檢驗(yàn)結(jié)果(P<0.001)，可以認(rèn)為兩組植入后2h，SOD活性水平有差異，實(shí)驗(yàn)組SOD的活性明顯升高；重復(fù)測(cè)量資料的方差分析，結(jié)果時(shí)間與IL-8沒(méi)有交互作用，兩組IL-8含量間有差異，P=0.014<0.05?？梢哉J(rèn)為試驗(yàn)組IL-8含量明顯明顯減少。 4.植入后2H肺組織濕干重比，實(shí)驗(yàn)組(5.85±

7、1.36)％明顯低于對(duì)照組(9.42±3.25)％(P=0.01<0.05)，可以認(rèn)為試驗(yàn)組肺水腫明顯低于對(duì)照組；再灌注后1h、2h時(shí)間點(diǎn)，對(duì)照組的肺組織標(biāo)本的HE染色光鏡下觀察肺間質(zhì)有輕度的滲出，部分肺泡腔可見(jiàn)少量纖維素性滲出，臟層胸膜輕度水腫滲出，肺間質(zhì)無(wú)明顯炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；再灌注后1h、2h時(shí)間點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)組的肺組織標(biāo)本的HE染色光鏡下觀察無(wú)明顯水腫、滲出，無(wú)明顯炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。 結(jié)論： 1.本模型建立簡(jiǎn)潔，穩(wěn)定，為肺臟移

8、植的器官保存、缺血再灌注損傷、排斥反應(yīng)等基礎(chǔ)研究和臨床實(shí)踐提供操作平臺(tái)。 2.肺移植早期，缺血后處理對(duì)肺的順應(yīng)性及肺功能無(wú)明顯影響作用。 3.缺血后處理可以減少移植后早期供體肺組織的丙二醛含量，增加抗自由基酶類超氧化物歧化酶活性，從而減少供體肺臟再灌注早期的氧化自由基的損傷；并減少移植后早期供體血清的IL-8含量，從而減少對(duì)中性粒細(xì)胞的趨化抑制損傷程度。 4.缺血后處理可以減少移植后早期肺水腫及上皮細(xì)胞受損程度。