川芎嗪對(duì)大鼠肺移植急性缺血再灌注損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分：“非內(nèi)皮化袖套”大鼠左肺原位移植模型的建立目的：探討建立一種更簡(jiǎn)單有效、可短期觀察的大鼠肺移植模型。 方法：將20對(duì)SD大鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組10對(duì)和對(duì)照組10對(duì)。實(shí)驗(yàn)組采用改進(jìn)的“非內(nèi)皮化袖套”吻合技術(shù)行大鼠左肺原位移植手術(shù)；對(duì)照組采用傳統(tǒng)的“內(nèi)皮化袖套”吻合技術(shù)行大鼠左肺原位移植手術(shù)。移植術(shù)后灌注4h，再阻斷右側(cè)肺門30min后，觀察移植肺的血運(yùn)，并行血?dú)夥治鰴z測(cè)，了解移植肺的功能。 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組10對(duì)大鼠套管

2、成功率為90％，至實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)存活率為80％(8只)；移植術(shù)后灌注4h，右側(cè)肺門阻斷30分鐘后，移植肺呈粉紅色，均能耐受30分鐘的右側(cè)肺門阻斷。對(duì)照組10對(duì)大鼠套管成功率為60％，至實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)存活率為40％(4只)；移植術(shù)后灌注4h，右側(cè)肺門阻斷30分鐘后，移植肺出現(xiàn)不同程度的瘀血，顏色呈暗紅色，2只在阻斷右側(cè)肺門30分鐘內(nèi)死亡．右肺門阻斷30min后測(cè)左肺靜脈血?dú)夥治觯瑢?shí)驗(yàn)組的PaO2為68.8±2.5mmHg，PaCO2為53.3±4

3、.3mmHg，對(duì)照組PaO2為59.8±3.1mmHg，PaCO2為60.1±2.6mmHg，兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。 結(jié)論：經(jīng)改進(jìn)后的大鼠“非內(nèi)皮化袖套”肺移植模型簡(jiǎn)單可行，明顯提高了成功率，適用于短期的實(shí)驗(yàn)研究。 第二部分：川芎嗪對(duì)大鼠肺移植急性缺血再灌注損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究目的：探討川芎嗪對(duì)大鼠肺缺血再灌注損傷的保護(hù)作用機(jī)制。 方法：將20對(duì)SD大鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(川芎嗪預(yù)處理)10對(duì)和對(duì)

4、照組(未行川芎嗪預(yù)處理)10對(duì)。采用改進(jìn)的“非內(nèi)皮化袖套”吻合技術(shù)，行大鼠左肺原位移植手術(shù)。移植術(shù)后灌注4h，再阻斷右側(cè)肺門30min后，采左肺靜脈血行血?dú)夥治鰴z測(cè)，并行移植肺濕干比(W/D)、丙二醛(MDA)、血小板激活因子(PAF)、細(xì)胞間粘附分子(ICAM-1)的檢測(cè)和光鏡、電鏡的觀察。 結(jié)果：右側(cè)肺門阻斷前實(shí)驗(yàn)組動(dòng)脈血氧分壓(Pa02)為94。1±8。8 mmHg、二氧化碳分壓(PaCO2)為38.9±4.5 mmHg，

5、對(duì)照組Pa02為93.6±6.7 mmHg，PaC02為39.8±1.1mmHg，兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)；右肺門阻斷30min后，實(shí)驗(yàn)組的Pa02為78.8±2.5mmHg，PaC02為48.3±1.3mmHg，對(duì)照組Pa02為69.8±4.1 mmHg，PaC02為57.1±3.6 mmHg，兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。實(shí)驗(yàn)組W/D比值為5.18±0.13，MDA為1.23±0.11nmol/ml，PAF為

6、2.08±0.16ug/L，ICAM-1為6.58±0.44；對(duì)照組W/D比值為5.91±0.13，MDA為1.444±0.13nmol/ml，PAF為2.33+0.15ug/L，ICAM-1為8.71±0.54；兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。光鏡下：正常左肺組織的肺間質(zhì)及肺泡結(jié)構(gòu)保持完整，無(wú)明顯受損，未見(jiàn)明顯炎性細(xì)胞；對(duì)照組移植肺肺不張，肺間質(zhì)增寬水腫，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，肺泡內(nèi)可見(jiàn)較多紅細(xì)胞；實(shí)驗(yàn)組移植肺肺間質(zhì)水腫程度較對(duì)照組輕

7、，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)減少，肺泡內(nèi)紅細(xì)胞滲出減少，肺泡較完整。電鏡觀察正常左肺組織中，Ⅰ型、Ⅱ型肺泡上皮結(jié)構(gòu)完整，無(wú)腫脹；實(shí)驗(yàn)組Ⅰ型上皮吸泡細(xì)胞質(zhì)略有腫脹，以狹長(zhǎng)型為主。Ⅱ型肺泡上皮有線粒體稍腫脹，細(xì)胞邊緣的微絨毛少量脫落；對(duì)照組Ⅰ型上皮細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)空泡，以圓形為主，線粒體腫脹明顯，細(xì)胞邊緣的微絨毛脫落較多。 結(jié)論：川芎嗪通過(guò)降低FAP含量，下調(diào)ICAM-1表達(dá)，抑制氧自由基及白細(xì)胞在肺內(nèi)的聚集作用，從而降低自由基引發(fā)的肺組織脂質(zhì)過(guò)氧化