燃煤型氟斑牙大鼠切牙成釉細(xì)胞顯微、亞顯微結(jié)構(gòu)觀察及TGF-β1、Smad4的表達(dá)研究.pdf

1、目的：通過建立燃煤型氟斑牙大鼠模型，觀察SD大鼠食用含氟煤烘玉米后牙齒成釉細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生的改變，以及氟對大鼠牙齒發(fā)育過程中細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子TGF-β1、Smad4在成釉細(xì)胞中表達(dá)的影響，探討燃煤型氟斑牙發(fā)生的分子機制和預(yù)防控制措施。
　　 方法：選取80只SD大鼠，雌雄各半，隨機分為8組，每組10只，雌雄各5只，分籠喂養(yǎng)，自由飲食，分別為：
　　 （1）低氟組：飼以含氟量為30mg/kg的玉米，配以面粉、豆粉、魚粉、骨

2、粉、麥麩和食鹽；
　　 （2）低氟偏食組：飼以含氟量為30mg/kg的玉米，配以面粉、豆粉和食鹽；
　　 （3）中氟組：飼以含氟量為56mg/kg的玉米，配以面粉、豆粉、魚粉、骨粉、麥麩和食鹽；
　　 （4）中氟偏食組：飼以含氟量為56mg/kg的玉米，配以面粉、豆粉和食鹽；
　　 （5）高氟組：飼以含氟量為88mg/kg的玉米，配以面粉、豆粉、魚粉、骨粉、麥麩和食鹽；
　　 （6）高氟偏食組：飼

3、以含氟量為88mg/kg的玉米，配以面粉、豆粉和食鹽；
　　 （7）飲水加氟組：予飲用100mg/L的氟化鈉水溶液，玉米不含氟，配以面粉、豆粉、魚粉、骨粉、麥麩和食鹽；
　　 （8）正常飲食組：飲水和玉米均不含氟，配以面粉、豆粉、魚粉、骨粉、麥麩和食鹽；
　　 觀察到大鼠切牙出現(xiàn)明顯的氟斑牙體征后（約3個月），斷頸處死大鼠，利用HE染色、透射電鏡觀察大鼠切牙成釉細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)，免疫組織化學(xué)技術(shù)觀察成釉細(xì)胞中TGF-

4、β1、Smad4的表達(dá)。
　　 結(jié)果：（1）HE染色結(jié)果：正常飲食組大鼠切牙成釉細(xì)胞從根端向切端由立方狀向高柱狀分化，釉質(zhì)成熟后又逐漸變矮，細(xì)胞排列整齊，胞核逐漸遠(yuǎn)離基底膜；實驗組大鼠切牙成釉細(xì)胞排列紊亂，高度變矮，細(xì)胞扭曲變形，可見空泡性變，Tomes突不規(guī)則或消失。
　　 （2）透射電鏡觀察：正常飲食組成釉細(xì)胞核卵圓，核膜完整，核仁明顯，細(xì)胞器發(fā)達(dá)，胞質(zhì)中可見豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和核糖體，胞漿中有基質(zhì)小泡；中氟組成釉細(xì)胞

5、體積變小，細(xì)胞器減少，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹，線粒體部分腫脹、嵴消失，出現(xiàn)較多的空泡性變，核膜不完整，核仁固縮體積縮??；高氟組細(xì)胞器溶解消失，線粒體腫脹空泡化嚴(yán)重，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹明顯，核膜斷裂，常染色質(zhì)片狀溶解，異染色質(zhì)邊聚，核仁碎裂消失。
　　 （3）免疫組化觀察：TGF-β1、Smad4均在細(xì)胞漿表達(dá)，與正常組相比，實驗組成釉細(xì)胞各期表達(dá)均下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　 結(jié)論：過量氟可引起大鼠切牙成釉細(xì)胞排列紊亂