他莫昔芬對人肝癌細胞TGF-β1、Smad4和ER影響的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:在腫瘤細胞中,TGF-β1對腫瘤細胞增殖起抑制作用,Smad4作為Smad通路中的核心因子,國內外研究表明其與肝癌發(fā)生有一定關系。TGF-β1/Smad4通路的.信號轉導異常在肝癌發(fā)病中起一定的作用。雌二醇(E2)主要在肝臟代謝和滅活,可以誘導肝原癌基因活化。雌激素受體(ER)調控基因表達,與肝癌發(fā)生、發(fā)展和預后有關。近年來非}}{體類抗雌激素藥物他莫昔芬應用于治療肝癌,但治療作用仍有爭議,作用機制未明。他莫昔芬對其他腫瘤細胞TG

2、F-β1、Smad4、ER的表達影響已經有報道,但他莫昔芬作用后上述指標在肝癌細胞表達的變化還沒有比較系統(tǒng)的文獻報道,本課題試圖通過研究人不同濃度及作用時間的他莫昔芬對人肝癌HepG2細胞增殖及TGF-β1、Smad4、ER的表達的變化,探討TGF-β1、Smad4、ER在肝癌發(fā)生中的機制及他莫昔芬治療肝癌是否有效,并探討其機制,為應用他莫昔芬治療肝癌提供實驗及理淪基礎。 材料與方法:將人肝癌HepG2細胞株常規(guī)培養(yǎng)于RPMI

3、1640培養(yǎng)液中(內含已用葡聚糖和活性炭去除了雌激素的10﹪小牛血清),培養(yǎng)液中加入青霉素(濃度1 00U/ml)和鏈霉素(濃度100μg/ml),在37℃、5﹪CO<,2>培養(yǎng)箱中培養(yǎng)并進行傳代。(1)觀察不同濃度及作用時間的他莫昔芬對人肝癌細胞生長的影響:采用MTT測定光密度值(OD值),計算抑制率;(2)人肝癌細胞形態(tài)學觀察:倒置相差顯微鏡及HE染色觀察人肝癌細胞生長狀況;(3)免疫組織化學染色(SP法)檢測不同濃度他莫昔芬分別培

4、養(yǎng)24 h、48 h和72 h后,人肝癌細胞TGF-β1、Smad4、ER表達的變化。 結論: 1、他莫昔芬抑制肝癌細胞的增殖,呈濃度一時間依賴。 2、他莫昔芬促進肝癌細胞TGF-β1的表達,呈濃度一時間依賴。 3、他莫昔芬促進肝癌細胞Smad4的表達,呈濃度一時間依賴。 4、他莫昔芬抑制肝癌細胞ER的表達,呈濃度一時間依賴。 5、他莫昔芬通過影響肝癌細胞TGF-β1、Smad4及ER的表

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