潔澤凝膠對(duì)小鼠陰道內(nèi)環(huán)境影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本研究分為二部分：
　　 第一部分：潔澤凝膠對(duì)小鼠陰道pH值、產(chǎn)H2O2乳桿菌、陰道粘膜刺激性及陰道和宮頸組織形態(tài)學(xué)影響的實(shí)驗(yàn)研究
　　 目的：
　　 通過(guò)觀察使用潔澤一號(hào)凝膠、潔澤二號(hào)凝膠前后，對(duì)小鼠陰道pH值、產(chǎn)過(guò)氧化氫乳桿菌、陰道和宮頸組織病理形態(tài)學(xué)變化及陰道粘膜的刺激性，評(píng)價(jià)一次性使用潔澤復(fù)方凝膠對(duì)小鼠陰道酸性環(huán)境、嗜酸乳桿菌及陰道和宮頸的影響。
　　 方法：
　　 1.陰道pH值檢測(cè)方法

2、：
　　 2.產(chǎn)H2O2乳桿菌檢測(cè)方法：
　　 3.粘膜刺激實(shí)驗(yàn)及組織形態(tài)學(xué)觀察：
　　 以上18個(gè)組中，每組隨機(jī)選取5只小鼠，解剖取出陰道、宮頸組織，進(jìn)行HE染色，觀察組織形態(tài)學(xué)變化。
　　 結(jié)果：
　　 1 .陰道pH值
　　 (1)生理鹽水和藥物凝膠pH值:生理鹽水、空白凝膠、潔澤一號(hào)凝膠高中低劑量、潔澤二號(hào)凝膠高中低劑量、10[％]N-9凝膠的pH均值分別為：6.0、5.3、5.4

3、、5.6、5.4、5.8、6.2、5.3、5.3。
　　 (2)給藥前后自身對(duì)照結(jié)果:24h亞組：正常組、空白凝膠組、潔澤一號(hào)各劑量組、潔澤二號(hào)低中劑量組，任意一組給藥后24h陰道pH值與給藥前相比，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其中，潔澤二號(hào)高劑量組陰道pH值給藥前和給藥24h后相比，差別有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；10[％]N-9組陰道pH值給藥前和給藥24h后的相比，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異有極顯著性意義。
　　 72h亞組：正常組、空白凝膠組、潔

4、澤一號(hào)高中低劑量組、潔澤二號(hào)高中低劑量組、10[％]N-9組任意一組給藥后72h pH值與給藥前相比，差別均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 (3)給藥前后組間比較結(jié)果: 24h亞組：正常組、空白凝膠組、潔澤一號(hào)高中低劑量組、潔澤二號(hào)高中低劑量組、10[％]N-9組給藥前陰道pH值任意兩組相比，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 各組給藥后24h陰道pH值比較中，空白凝膠組與正常組相比，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；潔澤一號(hào)高中低劑量組、潔澤二號(hào)高中低劑

5、量組pH值分別與正常組、空白凝膠組相比，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，10[％]N-9組pH值分別與正常組、空白凝膠組相比，差別有極顯著性意義；潔澤二號(hào)高劑量組陰道pH均值比潔澤一號(hào)低劑量組、潔澤二號(hào)低劑量組高，低于10[％]N-9組，與它們的差別均有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其他潔澤凝膠組，潔澤一號(hào)高中低劑量組，潔澤二號(hào)高中劑量組，5組間任意兩組pH值相比差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。72h亞組：正常組、空白凝膠組、潔澤一號(hào)高中低劑量組、潔澤二號(hào)高中低劑量組、10[

6、％]N-9組給藥前陰道pH值任意兩組相比，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 以上各組給藥后72h陰道pH值任意兩組相比，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2.乳桿菌菌落計(jì)數(shù)
　　 給藥后24h：在各組菌落計(jì)數(shù)均數(shù)相比較中，空白凝膠組與正常組菌落數(shù)相比，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。潔澤一號(hào)中劑量組菌落數(shù)與正常組、空白凝膠組相比差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，潔澤二號(hào)中劑量組較正常組菌落數(shù)目少，相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性意義，潔澤二號(hào)中劑量組菌落數(shù)與空白凝膠組

7、相比，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，10[％]N-9組與正常組、空白凝膠組相比菌落數(shù)明顯減少，統(tǒng)計(jì)有極顯著性差異；潔澤一號(hào)中劑量組菌落數(shù)比潔澤二號(hào)中劑量組多，相比差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；潔澤一號(hào)中劑量、潔澤二號(hào)中劑量組與10[％]N-9相比菌落數(shù)明顯增多，統(tǒng)計(jì)學(xué)差別有極顯著意義。
　　 給藥后72h：在各組菌落計(jì)數(shù)均數(shù)相比較中，正常組、空白凝膠組、潔澤一號(hào)中劑量、潔澤二號(hào)中劑量組任意兩組菌落數(shù)比較，差別均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；以上各組菌落數(shù)均比10[％]

8、N-9組多，統(tǒng)計(jì)學(xué)差別有極顯著性意義。
　　 正常組、空白凝膠組、潔澤一號(hào)中劑量組、潔澤二號(hào)中劑量組、10[％]N-9組各藥物組給藥后24h的菌落計(jì)數(shù)均數(shù)，分別與自身給藥后72h的相比較，差別均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 3. 陰道粘膜刺激性和陰道、宮頸組織形態(tài)學(xué)
　　 (1)一次性用藥后陰道粘膜刺激性結(jié)果：給藥后24h，正常組、空白凝膠組、潔澤一號(hào)各劑量組和潔澤二號(hào)低劑量組粘膜刺激評(píng)分均小于0.5，對(duì)陰道粘膜無(wú)刺激性

9、；潔澤二號(hào)高中劑量?jī)山M、10[％]N-9組評(píng)分大于0.5對(duì)陰道有輕度刺激性，但10[％]N-9分值1.14遠(yuǎn)高于潔澤二號(hào)高中劑量?jī)山M，刺激程度稍重。
　　 (2)陰道、宮頸組織病理學(xué)結(jié)果：陰道組織病理學(xué)結(jié)果：10[％]N-9組在給藥后24h亞組中，見(jiàn)2例陰道組織粘膜下充血和水腫，輕度炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；其他3例陰道組織與正常組相比均未見(jiàn)明顯異常。給藥后72h亞組中，見(jiàn)2例小鼠陰道組織有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和充血，其他3例陰道組織與正常組相比均

10、未見(jiàn)明顯異常。
　　 宮頸組織病理學(xué)結(jié)果：空白凝膠組、潔澤一號(hào)各劑量組、潔澤二號(hào)各劑量組各組給藥后24h和72h亞組中，宮頸組織形態(tài)與正常組相比無(wú)明顯異常。10[％]N-9組給藥后24h亞組中有1例宮頸組織見(jiàn)粘膜下炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，其他4例和給藥后72h亞組宮頸組織與正常組相比無(wú)明顯異常。
　　 結(jié)論：
　　 一次性使用潔澤一號(hào)，潔澤二號(hào)凝膠對(duì)小鼠陰道pH值無(wú)明顯影響，一次性使用10[％]N-9凝膠后可使陰道pH值升

11、高，用藥72h后恢復(fù)尚可。
　　 第二部分：潔澤凝膠對(duì)小鼠陰道過(guò)氧化氫濃度、過(guò)氧化氫酶活力影響的實(shí)驗(yàn)研究
　　 目的：
　　 觀察一次性使用潔澤一號(hào)中劑量、潔澤二號(hào)中劑量凝膠對(duì)小鼠陰道分泌物中過(guò)氧化氫濃度和組織粘膜中過(guò)氧化氫酶活力的干預(yù)作用；評(píng)價(jià)潔澤凝膠對(duì)小鼠陰道內(nèi)環(huán)境中H2O2濃度、CAT活力的影響。
　　 方法：
　　 陰道H2O2濃度和CAT活力觀察方法：取雌性昆明小鼠100只隨機(jī)分為0.9

12、％Nacl溶液組(正常組)、空白凝膠組、潔澤一號(hào)中劑量組，潔澤二號(hào)中劑量組，10[％]N-9凝膠組，每組設(shè)給藥后24h,72h兩個(gè)亞組。每只小鼠皮下注射生理劑量的苯甲酸雌二醇(E2)2ug，72h后，小鼠陰道分別注入上述各藥物凝膠20ul，正常組注射等量的生理鹽水，分別于給藥后24h或72h取陰道灌洗液，采用分光光度法檢測(cè)H2O2濃度變化，并脫臼處死，取陰道組織，勻漿、蛋白定量，采用分光光度法檢測(cè)單位蛋白CAT活力。
　　 結(jié)果

13、：
　　 1.陰道H2O2濃度：
　　 給藥后24h：在各組 H2O2濃度均數(shù)比較中，空白凝膠組、潔澤一號(hào)中劑量組H2O2濃度與正常組相比較，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，潔澤二號(hào)中劑量組、10[％]N-9組H2O2濃度低于與正常組，相比有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)；潔澤一號(hào)中劑量組H2O2濃度與空白凝膠組相比較，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，潔澤二號(hào)中劑量組H2O2濃度與空白凝膠組相比較低，相比有顯著性

14、統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，10[％]N-9組H2O2濃度比空白凝膠組低，相比有極顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)；潔澤二號(hào)中劑量組H2O2濃度比潔澤一號(hào)中劑量低，兩者差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；潔澤二號(hào)中劑量組H2O2濃度高于10[％]N-9組，相比差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，10[％]N-9組H2O2濃度比潔澤一號(hào)中劑量組的低，相比差別有極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 給藥后72h：在各組 H2O2濃度

15、均數(shù)比較中，空白凝膠組、潔澤一號(hào)中劑量組H2O2濃度與正常組相比較，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，潔澤二號(hào)中劑量組、10[％]N-9組H2O2濃度與正常組相比較低，差異均有顯著性意義(P＜0.05)；潔澤一號(hào)中劑量組H2O2濃度與空白凝膠組相比較，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，潔澤二號(hào)中劑量組H2O2濃度與空白凝膠組相比較低，差別有顯著性意義(P＜0.05)，10[％]N-9組H2O2濃度比空白凝膠組低，相比有極顯著性差異(P＜

16、0.01)；潔澤二號(hào)中劑量組H2O2濃度比潔澤一號(hào)中劑量低，兩者差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；潔澤二號(hào)中劑量組H2O2濃度高于10[％]N-9組，相比差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，10[％]N-9組H2O2濃度比潔澤一號(hào)中劑量組的低，相比有極顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。
　　 正常組、空白凝膠組、潔澤一號(hào)中劑量組、潔澤二號(hào)中劑量組、10[％]N-9組各藥物組給藥后24h的H2O2濃度均數(shù)，分別與自身給藥后72h的相

17、比較，差別均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 2. CAT活力觀察結(jié)果
　　 給藥后24h：正常組、空白凝膠組、潔澤一號(hào)中劑量、潔澤二號(hào)中劑量組、10[％]N-9組任意兩組CAT活力均值相比均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　　 給藥后72h：正常組、空白凝膠組、潔澤一號(hào)中劑量、潔澤二號(hào)中劑量組、10[％]N-9組任意兩組CAT活力均值相比，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 正常組、空白凝膠

18、組、潔澤一號(hào)中劑量組、潔澤二號(hào)中劑量組、10[％]N-9組各藥物組給藥后24h的CAT活力均值，分別與自身給藥后72h的相比較，差別均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 一次性使用潔澤一號(hào)中劑量凝膠對(duì)小鼠陰道中H2O2濃度無(wú)明顯影響，一次性使用10[％]N-9凝膠明顯降低H2O2濃度，給藥后72h，濃度尚不能恢復(fù)；一次性使用潔澤二號(hào)中劑量凝膠能輕度降低陰道H2O2濃度，降低程度與10％N-9相比較低，雖給